本文主要研究内容
作者倪荣,张晓双,程爱霞（2019）在《铁线蕨中氧甲基转移酶基因克隆与功能鉴定》一文中研究指出：目的克隆并鉴定铁线蕨中参与黄酮及苯丙类化合物生物合成的氧甲基转移酶(OMTs)。方法以铁线蕨的叶片总RNA为模板,采用RT-PCR技术,从中获得两个OMTs cDNA全长,分别命名为AcOMT1和AcOMT2,并将其构建到蛋白表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,利用镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白。在合适的反应条件下进行体外酶活分析。利用Swiss-model在线服务器分别生成AcOMT1和AcOMT2三维同源模型,通过PyMOL软件预测影响蛋白活性的关键氨基酸位点。利用MEGA v5.1和DNAMAN 7.0.2软件分别进行系统发育进化树分析和氨基酸多序列比对。结果从铁线蕨的转录组测序数据库中筛选并克隆得到两个OMTs,序列比对与进化树分析结果表明它们均属于Ⅰ型OMTs。酶活结果显示AcOMT1和AcOMT2均可催化多种底物,催化特点相似,其最适底物均为槲皮素。结论从铁线蕨中克隆并鉴定了两个OMT基因,对阐明蕨类植物中黄酮类化合物的甲基化修饰具有一定的理论指导意义。
Abstract
mu de ke long bing jian ding tie xian jue zhong can yu huang tong ji ben bing lei hua ge wu sheng wu ge cheng de yang jia ji zhuai yi mei (OMTs)。fang fa yi tie xian jue de xie pian zong RNAwei mo ban ,cai yong RT-PCRji shu ,cong zhong huo de liang ge OMTs cDNAquan chang ,fen bie ming ming wei AcOMT1he AcOMT2,bing jiang ji gou jian dao dan bai biao da zai ti pET32azhong ,zai da chang gan jun BL21zhong jin hang dan bai biao da ,li yong nie li zi qin he ceng xi zhu chun hua chong zu dan bai 。zai ge kuo de fan ying tiao jian xia jin hang ti wai mei huo fen xi 。li yong Swiss-modelzai xian fu wu qi fen bie sheng cheng AcOMT1he AcOMT2san wei tong yuan mo xing ,tong guo PyMOLruan jian yu ce ying xiang dan bai huo xing de guan jian an ji suan wei dian 。li yong MEGA v5.1he DNAMAN 7.0.2ruan jian fen bie jin hang ji tong fa yo jin hua shu fen xi he an ji suan duo xu lie bi dui 。jie guo cong tie xian jue de zhuai lu zu ce xu shu ju ku zhong shai shua bing ke long de dao liang ge OMTs,xu lie bi dui yu jin hua shu fen xi jie guo biao ming ta men jun shu yu Ⅰxing OMTs。mei huo jie guo xian shi AcOMT1he AcOMT2jun ke cui hua duo chong de wu ,cui hua te dian xiang shi ,ji zui kuo de wu jun wei hu pi su 。jie lun cong tie xian jue zhong ke long bing jian ding le liang ge OMTji yin ,dui chan ming jue lei zhi wu zhong huang tong lei hua ge wu de jia ji hua xiu shi ju you yi ding de li lun zhi dao yi yi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自山东大学学报(医学版)的倪荣,张晓双,程爱霞，发表于刊物山东大学学报(医学版)2019年04期论文，是一篇关于铁线蕨论文,黄酮类化合物论文,氧甲基转移酶论文,基因克隆论文,功能鉴定论文,山东大学学报(医学版)2019年04期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自山东大学学报(医学版)2019年04期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：铁线蕨论文; 黄酮类化合物论文; 氧甲基转移酶论文; 基因克隆论文; 功能鉴定论文; 山东大学学报(医学版)2019年04期论文;