外周血及蜕膜淋巴细胞CD28/CTLA-4的表达与子痫前期相关性研究

论文摘要

正常妊娠的维持有赖于胎儿母体间免疫平衡的建立与稳定,这种免疫平衡一旦失调即可发生病理妊娠。妊娠期高血压疾病是妊娠所特有的疾病,而子痫前期是其一种发展阶段,严重将发展为子痫甚至导致孕产妇及围产儿死亡。病因迄今未明。近年来,免疫学病因成为研究热点。协同刺激分子被认为在维持免疫系统相对平衡方面起重要作用,其中B7:白细胞分化抗原28（CD28）/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原（CTLA-4）最为重要。CD28/ CTLA-4与B7的相互作用是T细胞活化的重要调节因子,也是影响T淋巴细胞活化、增殖的一个必要条件,对其深入研究,可以加深对子痫前期免疫机制的认识,从而为临床免疫治疗途径提供理论依据。目的:1目前,妊娠期高血压疾病病因不清,近年来免疫学病因是研究热点,其中Th1/ Th2比率失衡现象已得到证实,但Th1/ Th2比率失衡原因仍是不解之谜。本研究旨在通过测定孕晚期（>28周）母血和子宫蜕膜淋巴细胞中分化抗原28（cluster of differentiation,CD28）、细胞毒性T细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte antigen, CTLA-4）的表达水平来进一步研究影响Th1/ Th2比率失衡的原因及提供治疗与预防新思路。2探讨早发型和晚发型子痫前期患者的外周血及蜕膜淋巴细胞CD28和CTLA-4协同刺激分子表达水平在母-胎免疫调节中的作用。方法:1研究对象1.1病例组（子痫前期组）:选取2006年12月至2007年6月在我院孕检并分娩的孕妇24例,并将它们分为两组:早发型子痫前期和晚发型子痫前期。采用流式细胞仪检测12例早发型（<34w）子痫前期患者,平均年龄27.83岁,平均孕周31.86周和12例晚发型（>34w）子痫前期患者平均年龄27.44岁,平均孕周37.86周。采用流式细胞技术测定外周血及蜕膜淋巴细胞CD28和CTLA-4在CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞上的表达水平。1.2对照组:选取2006年12月至2007年6月在我院孕检并分娩的正常足月妊娠孕妇10例,平均年龄26.87岁,平均孕周38.6周。采用流式细胞技术测定在外周血及蜕膜淋巴细胞CD28和CTLA-4在CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞上的表达。1.3诊断标准:孕20周以后血压≥140/90mmHg;尿蛋白≥0.3g/24h或阳性;有或无浮肿。血肌酐>106μmol/L;血小板<100×109/L;微血管病性溶血（血LDH升高）;血清ALT或AST升高;持续性头痛或其它脑神经或视觉障碍;持续性上腹不适。早发型子痫前期孕周小于34周,晚发型子痫前期孕周大于34周。各组年龄无统计学差异（P>0.05）;早发型子痫前期的平均孕周与晚发型子痫前期和对照组之间有统计学差异（P<0.05）,但比较早发型子痫前期和晚发型子痫前期CD28和CTLA-4表达水平无统计学差异（P>0.05）,表明分娩孕周不影响CD28和CTLA-4的表达。2标本采集:血标本采集:分别抽取三组孕妇前臂肘静脉血1ml（均于治疗前抽血）,注入肝素无菌管中,进行处理。蜕膜组织标本采集:三组孕妇胎盘娩出后取子宫蜕膜组织4g,进行处理。3实验方法:采用流式细胞技术检测外周血和蜕膜淋巴细胞CD28和CTLA-4在CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞上的表达水平。结果:1早发型和晚发型子痫前期患者外周血CD3+ T细胞较正常对照组无显著差异（P>0.05）; CD4+T细胞较正常对照组增加,有显著差异（P<0.05）; CD8+T细胞较正常对照组减少,有显著差异（均P<0.05）。晚发型子痫前期患者外周血CD3+ T、CD4+T、CD8+T较早发型子痫前期均无显著差异。2早发型和晚发型子痫前期患者外周血CD4/CD8比率较正常对照组增加,有显著差异（P<0.01）。3在CD3+CD4+T和CD3+CD8+T细胞亚群上的CD28在早发型和晚发型子痫前期患者较对照组的表达无显著差异（P>0.05）;晚发型子痫前期患者较早发型子痫前期CD28的表达无显著差异; CTLA-4在早发型和晚发型子痫前期患者较对照组的表达均增加,与对照组比较,有显著差异（P<0.05）;晚发型子痫前期患者较早发型子痫前期的表达减少,但无显著差异。4早发型和晚发型子痫前期患者外周血CD28/CTLA-4比率较正常对照组降低,有显著差异。5蜕膜T淋巴细胞CD28、CTLA-4亚群不同于外周血,蜕膜T淋巴细胞CD28、CTLA-4细胞的比例明显低于外周血,有显著差异。6子痫前期组CD3+CD28+和CD3+CTLA-4+无相关性。结论:1高表达的CTLA-4促进CD4+T淋巴细胞过度活化并向Th1亚群分化,导致Th1/ Th2比率失衡,这可能是促使子痫前期发生的重要原因,因此人工阻断CTLA-4的表达可能抑制子痫前期的发生发展,有望成为子痫前期免疫治疗新的辅助手段。2子痫前期患者母-胎免疫调节功能紊乱与T淋巴细胞亚群CD4/CD8表达异常具有相关性。3蜕膜T淋巴细胞CD28、CTLA-4亚群不同于外周血,蜕膜T淋巴细胞CD28、CTLA-4细胞的比例明显低于外周血,这可能与蜕膜组织中淋巴细胞的含量少有关。4早发型子痫前期外周血和蜕膜淋巴细胞的淋巴细胞亚群及协同刺激分子CD28、CTLA-4表达较晚发型子痫前期无显著差异, CTLA-4表达水平与子痫前期发病时间无关。5早发型和晚发型子痫前期外周血CD28的表达与CTLA-4的表达无相关性,说明CD3+CD28+的表达不因CD3+CTLA-4+的增加而变化。

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• 研究论文 外周血及蜕膜淋巴细胞CD28/CTLA-4 的表达与子痫前期相关性研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
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