蛋用型鸡禽白血病的病毒感染动态及病理学研究

蛋用型鸡禽白血病的病毒感染动态及病理学研究

论文摘要

禽白血病(Avian Leukosis, AL)是由禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus, ALV)和禽肉瘤病病毒(Avian Sarcoma Virus, RSV)引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称。该病对鸡能引起许多种具有传染性的良性和恶性肿瘤。本试验对山东省两个蛋鸡群禽白血病的病毒感染动态及病理学进行了研究。以期弄清楚在病毒混合感染情况下,禽白血病病毒在这两个鸡群的抗原抗体变化规律以及禽白血病的发病机制,为蛋鸡群中禽白血病的防治提供参考。本研究主要分为三个部分。第一部分,筛选出4只ALV-J和ALV-A/B抗体阳性父母代济宁百日鸡。然后将筛选出的鸡进行繁殖,获得21只商品代鸡。对父母代和商品代鸡进行连续数周的禽白血病抗体和抗原检测。结果显示,在同一鸡体内检测到ALV-A/B与ALV-J抗体,表明该品种鸡已经存在ALV-J与ALV-A/B的混合感染。禽白血病抗体相关性研究表明,ALV-J与ALV-A/B抗体不仅能够在同一只鸡中共存,而且具有相互促进的作用。已检出共感染的父母代鸡其抗体阳性率较高,但是其子代鸡却没有发现ALV-J与ALV-A/B抗体双阳性的鸡只。第二部分,对在检测过程中自然死亡的抗体双阳性鸡进行剖检病理组织学观察。剖检发现病鸡肝脏肿大,肝脏表面出现白色黄豆大小的肿瘤。脾、肾等器官也出现不同程度的肿大。组织病理学观察发现,肝脏实质中有由淋巴样瘤细胞构成的大小不等的肿瘤增生灶,压迫并破坏正常组织细胞。脾脏红髓中可见弥散性分布的髓样瘤细胞。肾小管之间有数量较多淋巴样瘤细胞。心肌中出现淋巴样瘤细胞和髓样瘤细胞,其中前者占多数,它们挤压并取代心肌细胞。肺脏中出现由大量髓样瘤细胞灶性生长的结节。腺胃间质明显增宽,内有较多的淋巴样瘤细胞。在组织病理学观察中,在同一组织切片看到淋巴细胞样瘤细胞和髓细胞样瘤细胞,这与ELISA检测结果ALV-J抗体和ALV-A/B抗体都呈阳性一致。说明ALV-J与ALV-A/B共感染仍可使不同的靶细胞发生癌化。第三部分,对表现腺胃炎的尼克珊瑚粉蛋鸡进行了病毒分离鉴定、遗传进化分析与病理学观察。结果显示,有9只鸡分离获得了ALV-J,同时,有4只鸡存在ALV-J与REV的共感染。PCR获得预期的片段。系统进化树结果比较发现,来自腺胃炎鸡的ALV-J与来自白羽肉鸡的更为接近。10只鸡病变极其相似,病鸡皮下脱水,生长抑制,营养极度不良。剖检可见腺胃肿大为正常腺胃的2-3倍,外观呈表面光滑的圆球型,质度变硬。腺胃乳头水肿、钝平,乳头流出脓性分泌物,腺胃壁水肿增厚,有的鸡腺胃粘膜有散在的出血点和出血斑。组织病理学变化表明,腺胃黏膜固有层可见数量较多的淋巴细胞增生灶,间质内大小有均一的小淋巴细胞浸润,有的腺体水肿,腺体内炎性细胞浸润,腺小管管腔狭窄或封闭,腺小管上皮细胞或脱落。超微结构显示,腺泡上皮细胞核染色质边集,或者整个细胞核被染色质浓缩构成的电子致密团块填充,核仁增大。腺胃细胞胞质深染。细胞质中聚焦或散在病毒粒子,病毒直径大小不一,约为60-90nm,无囊膜。细胞胞质中细胞器被严重破坏。细胞质中的黑色分泌颗粒很难看到,胞质出现大量空泡。腺泡上皮细胞间出现空泡状结构。腺胃病理学结果表明,淋巴细胞增多以及细胞内和细胞间的水肿,可能是临床上看到腺胃严重肿大的主要原因。综上所述,病毒的混合感染导致的蛋鸡机体免疫机能受到严重抑制而使发病率升高,这与近年来临床上发现蛋鸡中禽白血病病例的增多、以及死亡率升高关系十分密切,应引起蛋鸡业的注意。

论文目录

  • 符号及缩略词
  • 摘要
  • Abstract
  • 1 引言
  • 1.1 病原学
  • 1.1.1 禽白血病病毒不同亚群的划分
  • 1.1.2 禽白血病病毒的分子病毒学特性
  • 1.1.3 禽白血病病毒的培养特性
  • 1.1.4 禽白血病病毒的理化特性
  • 1.2 流行病学
  • 1.3 发病机理
  • 1.4 临床特征和病理变化
  • 1.4.1 淋巴细胞性白血病
  • 1.4.2 成红细胞性白血病
  • 1.4.3 成髓细胞性白血病
  • 1.4.4 骨髓细胞瘤病
  • 1.4.5 骨硬化病
  • 1.4.6 其他
  • 1.5 实验室诊断
  • 1.5.1 病毒分离和鉴定
  • 1.5.2 血清学检测
  • 1.5.3 聚合酶链反应(PCR)技术
  • 1.6 防制
  • 1.7 鸡群免疫抑制病毒混合感染现状
  • 1.8 鸡群免疫抑制病毒多重感染与宿主相互作用
  • 1.9 本研究的目的和意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 材料
  • 2.1.1 实验动物和细胞
  • 2.1.2 仪器设备
  • 2.1.3 相关试剂
  • 2.2 方法
  • 2.2.1 相关样品的采集
  • 2.2.2 禽白血病抗体及p27 抗原的检测
  • 2.2.3 病鸡剖检病变的观察
  • 2.2.4 病鸡组织病理切片的制备及观察
  • 2.2.5 病鸡超薄切片样品的制备及电镜观察
  • 2.2.6 病毒的分离培养及IFA 鉴定
  • 2.2.7 前病毒基因组cDNA 的提取
  • 2.2.8 ALV-J PCR 产物的克隆及序列测定
  • 3 结果与分析
  • 3.1 ALV-J 与ALV-A/B 共感染鸡抗体及抗原的变化规律
  • 3.1.1 父母代鸡ALV-A/B 抗体和ALV-J 抗体变化规律
  • 3.1.2 父母代鸡ALV-A/B 与ALV-J 抗体含量相关性
  • 3.1.3 父母代鸡ALV p27 抗原变化规律
  • 3.1.4 P2 号鸡抗原抗体变化规律
  • 3.1.5 子代鸡ALV-A/B 抗体检测结果
  • 3.1.6 子代鸡ALV-J 抗体变化规律
  • 3.1.7 子代鸡ALV-A/B 与ALV-J 抗体含量相关性分析
  • 3.1.8 子代鸡ALV p27 抗原变化规律
  • 3.2 ALV-J 与ALV-A/B 共感染鸡的剖检变化
  • 3.3 ALV-J 与ALV-A/B 共感染鸡的组织病理学变化
  • 3.4 ALV-J 与REV 共感染鸡的病理学变化
  • 3.4.1 ALV-J 与REV 共感染鸡剖检变化
  • 3.4.2 ALV-J 与REV 共感染鸡的组织病理学变化
  • 3.4.3 ALV-J 与REV 共感染鸡的超微病理学变化
  • 4 讨论
  • 4.1 ALV-J 和ALV-A/B 共感染的危害以及致病性的增强
  • 4.2 ALV-J 和ALV-A/B 共感染鸡抗体及抗原的变化规律
  • 4.3 ALV-J 和ALV-A/B 共感染时靶细胞及组织病理学变化
  • 4.4 ALV-J 与REV 共感染对鸡致病机理的探讨
  • 4.5 电镜切片的制备对病毒粒子直径的影响
  • 5 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表论文情况
  • 硕士学位论文内容简介及自评
  • 相关论文文献

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