蜕皮甾酮对游离脂肪酸诱导的脂肪炎症/JNK通路影响的研究

论文摘要

目的：通过小鼠3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化,游离脂肪酸（FFA）培养建立胰岛素抵抗模型,观察蜕皮甾酮（EDS）对3T3-L1脂肪细胞增殖的影响,并探讨EDS在体外对胰岛素抵抗的影响及可能的作用机制。方法：小鼠3T3-L1前脂肪细胞常规培养于高糖的DMEM中,用含0.5mmol／L 1-甲基-3异丁基-黄嘌呤（IBMX）、1μmmol／L地塞米松、10μg／ml胰岛素的DMEM（H）及含10μg／ml胰岛素的DMEM（H）序贯培养诱导分化成脂肪细胞；用游离脂肪酸培养建立胰岛素抵抗模型。在培养液中加入蜕皮甾酮或吡格列酮共同孵育24小时。Western印迹法检测各组GRP78和PERK蛋白表达水平,RT-PCR检测JNK1基因表达水平,并检测脂肪细胞24小时培养液中葡萄糖的消耗量。实验共分为六组：（1）空白对照组：诱导分化后的3T3-L1脂肪细胞。（2）阳性对照组：游离脂肪酸培养后的肥胖细胞,为具有胰岛素抵抗的细胞。（3）蜕皮甾酮组：分为EDS1×10-7组、EDS1×10-6组、EDS1×10-5组。（4）阳性药物对照组：即吡格列酮组。结果：EDS在浓度>1×10-4mol／L时OD值显著下降（P<0.01）。在EDS1×10-7～1×10-5mol／L细胞生长率为95%-100%；胰岛素抵抗细胞中GRP78及PERK蛋白表达及JNK1基因表达显著增加,经蜕皮甾酮干预后,各组GRP78及PERK蛋白表达及JNK1基因表达有不同程度的减少；蜕皮甾酮在1×10-7～1×10-5mol／L浓度范围内可使脂肪细胞的葡萄糖消耗量增加。结论：（1）游离脂肪酸激活内质网应激,使脂肪细胞产生胰岛素抵抗。（2）蜕皮甾酮在浓度>1×10-4mol／L时对脂肪细胞有明显的细胞毒性作用。故实验选取蜕皮甾酮浓度为1×10-7～1×10-5mol／L。（3）蜕皮甾酮能减少3T3-L1细胞胰岛素抵抗模型中内质网应激蛋白GRP78、PERK蛋白的表达水平,下调JNK1 mRNA的表达水平,增加脂肪细胞的葡萄糖消耗量。这些作用位点可能揭示2型糖尿病的胰岛素抵抗是多个环节信号的变化叠加的结果。蜕皮甾酮可以通过这些位点改善胰岛素抵抗,增加胰岛素敏感性。

论文目录

• 1 蜕皮甾酮对游离脂肪酸诱导的脂肪炎症/JNK通路影响的研究
• 1.1 中文摘要
• 1.2 英文摘要
• 1.3 前言
• 1.4 材料与方法
• 1.5 结果
• 1.6 讨论
• 1.7 结论
• 1.8 参考文献
• 1.9 英汉缩略词对照表
• 2 致谢
• 3 脂肪细胞因子与胰岛素抵抗关系研究进展（综述）