可视化胰蛋白酶原Ⅱ外分泌功能转基因小鼠的制备研究

可视化胰蛋白酶原Ⅱ外分泌功能转基因小鼠的制备研究

论文摘要

胰腺外分泌功能研究是为了从生理的角度观察胰腺的正常分泌的过程或从病理生理的角度来探讨胰腺疾病的发病机制。本实验利用显微注射技术试图建立一种胰腺外分泌功能的转基因动物模型,利用整体成像仪能够在活体内动态地观察到胰蛋白酶原Ⅱ的分泌过程。为研究胰腺外分泌功能生理机制和与胰腺外分泌功能相关的疾病(如胰腺炎、胰腺癌)的发生、发展过程的病理生理机制以及筛选治疗上述疾病的药物提供理想的动物模型。为此,本文进行了如下的研究: 1.目的基因的构建: 1.1 胰蛋白酶原Ⅱ信号肽(Pre-pro)基因的构建:采用人工合成Pre-pro基因:5′aattcatgagtgcacttctgatcctagctcttgttggagctgctgttgctttccccgtggatgatgatgacaaga 3′gtactcacgtgaagactaggatcgagaacaacctcgacgacaacgattggggcacctacgactactgttct tcgttggag 3′agcaacctcctag 5′其5’端带有EcoR I,3’端带有BamH Ⅰ酶切位点。 1.2 中间载体pPreEGFP的构建:我们将Pre-pro基因定位克隆到pEGFP-N1载体的EcoR I,BamH Ⅰ位点,增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的5’端与Pre-pro基因相连接,这一载体我们称之为:pPreEGFP 1.3 载体pPEL-PreEGFP的构建:将在胰腺中特异性表达的弹性酶Ⅰ启动子(Rat Elastase Ⅰ Promoter,PEL)克隆到pPreEGFP载体的HindⅢ及EcoR Ⅰ位点,PEL的3’端与Pre-pro基因的5’端相连,这一载体我们称之为pPELPreEGFP。 1.4 目的基因PEL-Pre-EGFP的获得:BindⅢ和Sph Ⅰ双酶切pPEL-PreEGFP质

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 前言
  • 第一章 目的基因PEL-Pre—EGFP的构建
  • 1.1 实验流程图
  • 1.2 材料和方法
  • 1.3 结果
  • 第二章 转PEL-PreEGFP基因鼠的建立
  • 2.1 实验流程图
  • 2.2 材料和方法
  • 2.3 结果
  • 第三章 转基因小鼠的检测
  • 3.1 实验步骤
  • 3.2 结果
  • 讨论
  • 参考文献
  • 英文缩略词表
  • 致谢
  • 学位论文原创性声明
  • 相关论文文献

    • [1].尿胰蛋白酶原2检测在急性胰腺炎诊断中的应用[J]. 赣南医学院学报 2015(01)
    • [2].尿胰蛋白酶原-2、血尿淀粉酶的检测在诊断急性胰腺炎中的意义分析[J]. 医学理论与实践 2017(08)
    • [3].尿胰蛋白酶原激活肽测定对急性重症胰腺炎诊断价值[J]. 现代仪器与医疗 2013(06)
    • [4].急性胰腺炎诊断中尿胰蛋白酶原-2的临床应用评价[J]. 中国医药指南 2013(05)
    • [5].尿胰蛋白酶原-2的临床应用[J]. 吉林医学 2012(29)
    • [6].尿胰蛋白酶原激活肽与急性胰腺炎早期分型[J]. 山东医药 2010(36)
    • [7].尿胰蛋白酶原-2检测对急性胰腺炎的诊断价值[J]. 胃肠病学和肝病学杂志 2009(07)
    • [8].胰蛋白酶原基因突变影响T淋巴细胞受体对乙型肝炎病毒表面抗原的应答[J]. 胃肠病学和肝病学杂志 2009(09)
    • [9].血浆胰蛋白酶原激活肽和尿胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎预后监测中的价值[J]. 江西医学院学报 2008(01)
    • [10].血清胰蛋白酶原-2在大肠肿瘤中的表达及临床意义[J]. 解放军医药杂志 2013(07)
    • [11].胃蛋白酶原与胰蛋白酶原-2联合检测筛查胃癌的意义[J]. 中国临床医学 2009(04)
    • [12].胰蛋白酶原基因新突变胰腺炎患者的临床分子生物学特征[J]. 世界华人消化杂志 2008(21)
    • [13].重组猪源胰蛋白酶原的构建、表达与活性分析[J]. 药学进展 2014(12)
    • [14].尿胰蛋白酶原-2诊断胰腺炎的医学决定水平探讨[J]. 中国全科医学 2014(10)
    • [15].尿胰蛋白酶原-2、淀粉酶在急性胰腺炎诊断中的应用评价[J]. 国际检验医学杂志 2013(03)
    • [16].尿胰蛋白酶原-2快速检测在急性胰腺炎早期诊断中的应用[J]. 放射免疫学杂志 2012(03)
    • [17].尿胰蛋白酶原-2检测在急性胰腺炎早期诊断中的应用[J]. 医药论坛杂志 2011(12)
    • [18].胰蛋白酶原基因与T淋巴受体Vβ7.2片段之间的间隔序列分析[J]. 胃肠病学和肝病学杂志 2008(09)
    • [19].尿胰蛋白酶原-2、淀粉酶检测在急性胰腺炎临床中的应用[J]. 中国临床研究 2010(12)
    • [20].经皮穿刺置管引流术联合通腑化瘀解毒方对急性重症胰腺炎并胰腺感染患者P物质、胰蛋白酶原激活肽水平的干预作用[J]. 中国中医急症 2020(04)
    • [21].联合检测尿胰蛋白酶原-2和淀粉酶在诊断急性胰腺炎中的应用[J]. 临床检验杂志(电子版) 2019(01)
    • [22].尿胰蛋白酶原-2快速检测在诊断早期急性胰腺炎中的应用价值[J]. 当代医药论丛 2019(03)
    • [23].金鱼胰蛋白酶原基因的克隆及镉和过氧化氢暴露对其基因表达的影响(英文)[J]. 水生生物学报 2018(01)
    • [24].血清淀粉酶、血脂肪酶、尿淀粉酶、尿胰蛋白酶原-Ⅱ检测在急性胰腺炎早期诊断中的临床价值[J]. 实用医院临床杂志 2013(06)
    • [25].血清胰蛋白酶原-2与急性胰腺炎严重程度分析[J]. 中国热带医学 2013(06)
    • [26].尿胰蛋白酶原-2快速检测在急性胰腺炎早期诊断中的应用[J]. 皖南医学院学报 2013(05)
    • [27].尿胰蛋白酶原-2测定对急性胰腺炎的临床诊断价值[J]. 中外医学研究 2012(31)
    • [28].尿胰蛋白酶原-2和C-反应蛋白在急性胰腺炎诊断中的意义[J]. 当代医学 2010(07)
    • [29].尿胰蛋白酶原-2指标在早期诊断重症急性胰腺炎方面的临床价值分析[J]. 当代医药论丛 2015(05)
    • [30].血浆胰蛋白酶原激活肽浓度与高脂血症性胰腺炎严重程度的相关性研究[J]. 中华保健医学杂志 2013(05)

    标签:;  ;  ;  ;  

    可视化胰蛋白酶原Ⅱ外分泌功能转基因小鼠的制备研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢