论文摘要
目的:通过建立Beagle犬牙槽隔减阻牙周膜牵张(periodontal ligament distraction,PDLD)快速移动牙齿的实验动物模型,观察压力侧牙周组织中RANKL和OPG的表达变化,并比较其与常规正畸牙齿移动过程中RANKL和OPG表达的区别,探讨RANKL和OPG在PDLD快速移动牙齿牙周组织改建过程中所起的作用,为研究PDLD快速移动牙齿过程中压力侧牙周组织改建的机制和临床运用提供理论依据。方法:8只纯种Beagle犬随机分为A组(加力1周)、B组(加力2周)、C组(加力2周,保持2周)和D组(加力2周,保持4周),每组二只,拔除8只Beagle犬下颌两侧第二前磨牙,采用自身对照设计,每只犬下颌的左右侧随机分为PDLD侧和常规方法正畸牙齿移动对照侧。以下颌第三前磨牙为支抗牙,下颌第一前磨牙为移动牙。上颌第一前磨牙为正常对照。PDLD侧移动牙远中牙槽间隔行减阻术,粘结牵张器,以2次/天的频率、每次将牵张器中螺旋扩大器的螺旋旋转90°,加力2周后固定保持。常规对照侧用NiTi螺旋弹簧牵引移动牙向远中,力约1.47牛顿,加力2周后固定保持。测量移动牙移动距离。实验动物在预先规定的时间取材,固定,脱钙,石蜡包埋,切片,HE染色观察移动牙压力侧牙周组织的形态学变化;TRAP染色观察压力侧牙周组织中破骨细胞数目的变化;免疫组化染色观察移动牙压力侧牙周组织中RANKL、OPG的变化,应用图像分析系统对RANKL、OPG含量进行半定量分析。并采用SPSS13.0统计软件对实验结果进行统计学分析。结果:1牙齿移动距离:加力1周时,常规对照侧牙齿向远中移动0.47±0.21mm,PDLD侧为1.47±0.55mm,两侧牙齿移动距离存在统计学差异(P<0.01)。加力2周时,常规对照侧远中移动0.68±0.59mm,PDLD侧为3.98±1.26mm,两侧牙齿总的移动距离存在统计学差异(P<0.01)。2 HE染色结果:加力后,常规对照侧移动牙压力侧牙周膜明显缩窄,可见明显无细胞结构的玻璃样变组织及潜掘性骨吸收,随着时间的延长玻璃样变组织逐渐被清除,牙槽间隔骨表面出现明显破骨细胞及骨吸收陷窝。PDLD侧牙周膜较常规对照侧受压缩窄程度轻,未见玻璃样变组织,随着加力时间的延长,远中固有牙槽骨弯曲或折断并进入拔牙窝,间隔骨周围及内部有大量破骨细胞,间隔骨吸收变薄,部分牙周膜与拔牙窝相通。加力2周,保持4周时,PDLD和常规方法移动牙压力侧牙周膜宽度基本恢复。3压力侧牙周组织中破骨细胞TRAP染色结果:PDLD侧和常规对照侧移动牙压力侧牙周组织中TRAP染色阳性破骨细胞在受力后均增加。PDLD侧在加力2周时,TRAP染色阳性破骨细胞个数达峰值。常规对照侧在加力2周,保持2周时达峰值。PDLD侧和常规对照侧的破骨细胞个数,在A组(P<0.01)、B组(P<0.01)和C组(P<0.01)中均存在统计学差异。4压力侧牙周组织中RANKL、OPG的表达变化:RANKL、OPG阳性着色部位主要位于牙周膜成纤维细胞、成骨细胞、血管内皮细胞、骨衬里细胞和骨陷窝内破骨细胞的胞浆。在常规对照侧,加力后RANKL和OPG的表达均逐渐增强,在加力2周,保持2周时RANKL的表达及RANKL/OPG含量比值达峰值,之后逐渐下降,而OPG的表达保持较高水平。在PDLD侧,加力后RANKL和OPG的表达均较强,在加力2周时RANKL的表达及RANKL/OPG含量比值达峰值,之后逐渐下降,而OPG的表达继续升高。在PDLD侧和常规对照侧的A组(P<0.01)、B组(P<0.01)和C组(P<0.05)中RANKL的表达均存在统计学差异。在PDLD侧和常规对照侧的A组(P<0.01)、B组(P<0.01)、C组(P<0.01)和D组(P<0.01)中OPG的表达均存在统计学差异。在PDLD侧和常规对照侧的A组(P<0.01)、B组(P<0.01)、C组(P<0.05)和D组(P<0.01)中RANKL/OPG含量比值均存在统计学差异。结论:1牙槽隔减阻牙周膜牵张移动牙齿可以明显加快正畸牙齿移动速度。2在观察时间内,牙槽隔减阻牙周膜牵张快速移动牙压力侧的破骨细胞数高于常规正畸牙齿移动,显示其压力侧发生较早与较快的骨吸收。3 RANKL和OPG参与牙槽隔减阻牙周膜牵张与常规正畸移动牙压力侧牙周组织的改建。RANKL/OPG含量比值的变化调节压力侧牙周组织中破骨细胞的产生及其吸收功能。与常规正畸牙齿移动相比,在牙槽隔减阻牙周膜牵张移动牙齿过程中RANKL、OPG的表达和RANKL/OPG含量比值变化更明显,从而导致其移动牙压力侧牙周组织的快速改建。
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