角蛋白关联蛋白基因(KAP和KRT)与绵羊毛品质的相关性研究

角蛋白关联蛋白基因(KAP和KRT)与绵羊毛品质的相关性研究

论文摘要

新疆是我国重要的绵羊生产基地,细毛羊数量居全国首位,细毛羊业在国内处于领先地位,目前国内外毛纺产品也已经向轻薄、柔软、挺括、高档方向发展。因此,加快细毛羊的发展,提高细毛羊的育种水平,既是社会经济发展的需要,也是此领域科技进步的需要。但从目前情况来看,要提高或保持现有高品质细毛羊的羊毛品质存在一定难度,其关键问题是对控制绵羊主要经济性状的基因调控机制研究较少,特别是与绵羊毛品质相关的基因位点及相关关系尚不清楚。目前研究热点主要是针对构成羊毛纤维的角蛋白关联蛋白(Keratin-associated proteins,KAPs)和角蛋白中间丝(Keratin intermediate filament, KRT-IF)的相关基因的研究上,本研究在已有研究的基础上进一步从两个方面对KAP和KRT相关基因进行了研究:一、新疆5种绵羊角蛋白关联蛋白基因遗传多态性研究本试验选择KAP和KRT部分基因(KAP1.3,KAP6-1,KAP3.2,KAP8和KRT1.2)作为候选基因,利用primer5.0引物设计软件对相关基因分别设计13对引物,以新疆不同毛品质的绵羊(半细毛陶赛特羊;半细毛羊萨福克羊;肉羊德克塞尔羊;粗毛羊湖羊;中国美利奴(新疆军垦型)细毛羊)为研究基础,利用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术进行遗传多态性分析。结果得出:(1)5种绵羊在KAP1.3位点都处于中度多态PIC在0.25~0.50之间;χ2适合性检验德克塞尔羊未达到遗传平衡,其他四种绵羊均达到平衡。(2)在KAP81位点陶赛特羊为高度多态(PIC>0.50),德克塞尔羊处于低度多态(PIC<0.25),中国美利奴羊,萨福克羊和湖羊处于中度多态;经χ2适合性检验得出,只有德克塞尔羊达到遗传平衡,其他四种绵羊均未达到平衡。(3)在KAP87位点5种绵羊的多态信息含量较低,萨福克羊为中度多态,其他4种绵羊均为低度多态;χ2适合性检验显示萨福克羊未达到遗传平衡,其他4种绵羊达到遗传平衡。(4)在KRT123位点5种绵羊中湖羊为中度多态,其他4种绵羊均为低度多态;χ2适合性检验显示5种绵羊达到遗传平衡。(5)X611位点5种绵羊中德克塞尔羊处于中度多态,其他4种绵羊均处于高度多态;χ2适合性检验5种绵羊均未达到遗传平衡。因此KAP1.3,KAP81,KAP87,KRT123和X611位点可能与毛品质存在相关性。二、毛细度,强度,长度育种值与基因位点相关性研究利用第一部分分析得出与绵羊毛品质相关的基因位点,以中国美利奴(新疆军垦型)细毛羊为研究基础,利用多重比较及t检验计算分析个体毛性状育种值与基因位点的关系得出:(1)表型值和个体育种值分析结果:KAP81位点的AC基因型,KAP1.3位点的AA基因型和X611位点的BC基因型可对羊毛细度进行标记;KAP81位点的BC基因型和KRT123位点的AB基因型可对羊毛强度进行标记;X611位点的AA基因型可对羊毛长度进行标记。(2)对15只公羊利用分子标记检测结果进行育种值分析结果:通过基因型效应估计育种值,其结果与后代表型值更接近,因此可以直接利用基因型进行优质绵羊的选育,并可通过同型交配达到快速选种的目的。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 引言
  • 第一章 文献综述
  • 1 目前国内外羊毛生产及市场情况
  • 2 羊毛生长的调控因子研究进展
  • 2.1 GH 及GHR 对毛生长的影响
  • 2.2 EGF 及其受体对羊毛生长的影响
  • 2.3 IGF-I 及IGF-IR 对羊毛生长的影响
  • 3 羊毛性状的微卫星标记研究进展
  • 4 角蛋白关联蛋白基因与毛性状关系的研究进展
  • 第二章 新疆5 种绵羊角蛋白关联蛋白基因遗传多态性研究
  • 1 材料和方法
  • 1.1 材料
  • 1.1.1 血液样本
  • 1.1.2 引物
  • 1.1.3 主要试剂
  • 1.1.4 主要仪器设备
  • 1.2 试验方法
  • 1.2.1 基因组DNA 的提取
  • 1.2.2 PCR 扩增,酶切反应及SSCP 变性条件
  • 1.2.3 电泳条件
  • 1.3 测序
  • 1.4 数据统计及处理
  • 2 结果分析
  • 2.1 用于PCR 扩增的绵羊基因组DNA
  • 2.2 部分引物PCR 产物琼脂糖电泳检测结果
  • 2.3 RFLP 琼脂糖电泳检测结果
  • 2.4 SSCP 聚丙烯酰胺凝胶电泳结果
  • 2.4.1 部分具有多态性表现基因位点的SSCP 结果
  • 2.4.2 部分多态性不明显基因的SSCP 结果
  • 2.5 测序结果分析
  • 2.5.1 KAP81 基因测序结果
  • 2.5.2 KRT123 基因测序结果
  • 2.6 遗传多态性分析
  • 3 讨论
  • 3.1 样本的采集方式与样本含量
  • 3.2 DNA 的提取与检测
  • 3.3 PCR-SSCP 的影响因素
  • 3.4 群体遗传变异程度
  • 4 小结
  • 第三章 基因位点与羊毛品质相关性研究及育种值估计
  • 1 材料和方法
  • 1.1 材料
  • 1.1.1 血液样本
  • 1.1.2 引物
  • 1.1.3 主要药品试剂及主要仪器与设备见第二章
  • 1.2 试验方法
  • 1.2.1 羊毛品质分析
  • 1.3 育种值估计及数据处理
  • 2 结果与分析
  • 2.1 5 对引物电泳结果
  • 2.2 群体间表型值及育种值比较
  • 2.3 不同位点与毛品质性状育种值及表型值间方差分析
  • 2.3.1 不同位点与毛细度育种值及表型值间方差分析
  • 2.3.2 不同位点与羊毛强度的方差分析
  • 2.3.3 不同位点与毛长度育种值及表型值间方差分析
  • 2.4 不同位点与毛品质性状育种值及表型值的T 检验
  • 2.4.1 羊毛细度的育种值及表型值t 检验结果分析
  • 2.4.2 羊毛强度表型值t 检验结果分析
  • 2.4.3 羊毛长度的育种值及表型值t 检验结果分析
  • 2.5 公羊育种值估计
  • 3 讨论
  • 3.1 角蛋白关联蛋白基因与毛性状的关系
  • 3.2 育种值估计应用的理论意义
  • 3.3 育种值估计对种公羊选择的意义
  • 3.4 分子标记辅助选择的意义
  • 4 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 作者简介
  • 导师评阅表
  • 相关论文文献

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