雌激素对破骨细胞基质金属蛋白酶mRNA表达的影响

论文题目: 雌激素对破骨细胞基质金属蛋白酶mRNA表达的影响

论文类型: 硕士论文

论文专业: 外科学

作者: 叶凡

导师: 吴小涛

关键词: 雌激素,破骨细胞,基质金属蛋白酶

文献来源: 东南大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:本实验通过体外分离培养兔破骨细胞,观察不同浓度及不同时间雌激素对兔破骨细胞基质金属蛋白酶MMP-9 mRNA、MMP-8 mRNA表达的影响,进一步阐明雌激素对破骨细胞介导的骨质疏松症的作用机制,讨论药物开发和治疗的实验和理论基础。方法:体外分离培养出生24小时内的新西兰兔破骨细胞,用含有不同浓度17β-雌二醇0M(空白对照)、10-5M、10-6M、10-7M、10-8M、10-9M、10-10M、10-11M、10-12M、10-13M的M199培养液1ml分别作用于破骨细胞,进行药物干预实验,观察不同浓度雌激素及相同浓度雌激素不同时间对破骨细胞活性的影响。同时加入0、10-5～10-13M 17β-雌二醇观察其对兔破骨细胞MMP-9 mRNA、MMP-8 mRNA表达的影响,用Trizol法提取细胞内总mRNA,MMP-9 mRNA、MMP-8 mRNA表达采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定。结果:不同浓度17β-雌二醇对破骨细胞的成活有不同程度的抑制,当实验组雌激素浓度为10-5mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L时,对破骨细胞活性的抑制作用与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余剂量虽然有抑制作用,但无统计学意义。而观察不同浓度雌激素对破骨细胞性骨吸收实验表明,随着雌激素浓度的增加,无论是骨片的骨陷窝数目,还是骨陷窝的面积均有不同程度的抑制。当雌激素浓度分别为10-5mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L时,与对照组相比存在统计学意义(P<0.05)。接着选择不同时间内观察不同浓度17β-雌二醇0M(空白对照)、10-6M、10-8M、10-10M、10-12M对骨陷窝数目和面积的影响,实验表明尽管随着时间的推移,各个实验组的骨陷窝数目和面积均有不同程度的增加,培养后第六天骨陷窝数目和面积增加最为显著,但与对照组相比,各种浓度的雌激素均存在着不同程度的抑制作用,尤以浓度为10-6M的雌激素的抑制作用最为明显,有统计学意义(P<0.05)。为了进一步证实雌激素对破骨细胞性骨吸收的抑制作用的机理,我们还应用RT-PCR方法对培养的兔破骨细胞进行了MMP-9mRNA和MMP-8mRNA表达的检测,发现不同浓度的雌激素对体外培养的兔破骨细胞MMP-9 mRNA表达较对照组均有抑制作用。当雌激素浓度为10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L时对MMP-9 mRNA的表达有明显抑制作用,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),说明MMP-9 mRNA的表达水平可以随着骨吸收活性的不同而改变。虽然重复试验了3次,但是本实验中所有破骨细胞均未表达MMP-8 mRNA。结论:不同浓度的雌激素呈时间和剂量依赖性地抑制破骨细胞的活性,表现为破骨细胞性骨吸收陷窝的数目和面积的增加受到不同程度的抑制作用。不同浓度的雌激素呈剂量依赖性地下调兔破骨细胞MMP-9mRNA的表达,说明雌激素对兔破骨细胞基质金属蛋白酶表达的调控作用随其浓度变化而不同,这可能是雌激素抑制破骨细胞介导的骨吸收的部分作用机制。

论文目录:

中文摘要

英文摘要

前言

文献综述

引言

1、骨量峰值

2、破骨细胞

3、基质金属蛋白酶

4、雌激素和骨质疏松症

材料和方法

一、动物

二、主要试剂

三. 主要仪器和材料

四、方法

结果

一、兔破骨细胞体外分离培养

二、破骨细胞的鉴定

三、不同浓度雌激素对破骨细胞活性的影响

四、不同浓度雌激素对破骨细胞性骨吸收的抑制作用

五、不同时间雌激素对破骨细胞性骨吸收的作用

六、雌激素对体外培养破骨细胞 MMP-8、MMP-9 mRNA 表达的影响

讨论

一、破骨细胞体外培养

二、基质金属蛋白酶与骨吸收之间的关系

三、雌激素与原发性骨质疏松症的关系

结论

致谢

参考文献

作者简介

发布时间: 2007-06-11

参考文献

• [1].“铁蓄积”在绝经后骨质疏松症（Ⅰ型）中作用机制的相关研究[D]. 王啸.苏州大学2015
• [2].基于破骨细胞功能探讨腺苷激酶敲除小鼠和贞术调脂胶囊对骨代谢的影响[D]. 叶秋莹.广东药科大学2017
• [3].铁调素过表达对铁蓄积小鼠破骨细胞和骨量影响的实验研究[D]. 张辉.苏州大学2018
• [4].破骨细胞外泌小体促进成骨前体细胞成骨分化的初步研究[D]. 赖敏锋.暨南大学2016
• [5].白介素-23诱导破骨细胞表达成骨分子[D]. 逄丹丹.第二军医大学2017
• [6].雌激素对成骨细胞血管内皮生长因子表达的影响[D]. 潘晋平.山西医科大学2010
• [7].脂肪细胞Rankl表达对破骨细胞发育和骨稳态的调节作用[D]. 李吉隆.天津医科大学2017
• [8].脂肪细胞通过CXCL12/CXCR4信号通路促进破骨细胞的分化和功能[D]. 罗婷婷.山西医科大学2017
• [9].10-羟基喜树碱对RAW264.7细胞分化为破骨细胞的影响[D]. 张蒙.郑州大学2017
• [10].破骨细胞对1型糖尿病大鼠骨质疏松形成的影响和阿仑膦酸钠对破骨细胞的作用[D]. 尚可.河北医科大学2004

相关论文

• [1].离体条件下低氧环境对破骨细胞生成及功能影响的实验研究[D]. 郎红梅.第三军医大学2007
• [2].P60PLAD蛋白对破骨细胞生成、分化及骨吸收影响的相关研究[D]. 曹晓瑞.第四军医大学2007
• [3].RNA干扰靶向atp6i基因抑制破骨细胞骨吸收的实验研究[D]. 沈龙祥.浙江中医药大学2006
• [4].淫羊藿苷对体外培养破骨细胞影响的实验研究[D]. 吕明波.兰州大学2007
• [5].原发性骨质疏松椎体性及股骨颈骨折病人血清基质金属蛋白酶-1、基质金属蛋白酶-2、组织金属蛋白酶抑制因子-1与骨密度、血清碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原氨基末端肽的关系[D]. 王虑.中南大学2007
• [6].植物雌激素对大鼠成骨细胞生物活性影响的实验研究[D]. 郑丽.河北医科大学2007
• [7].破骨细胞在小鼠关节炎软骨/骨损伤中的作用及小剂量激素治疗的影响[D]. 赵雯.第四军医大学2005
• [8].大鼠高产量的破骨细胞分离、诱导培养鉴定与纯化[D]. 王正东.中国医科大学2006
• [9].MMPs在大鼠牙周组织改建以及体外培养成骨细胞中的表达[D]. 金钫.第四军医大学2001
• [10].体外培养大鼠破骨细胞的生物学特性研究[D]. 王兴强.第四军医大学2002

标签：雌激素论文;  破骨细胞论文;  基质金属蛋白酶论文;