论文摘要
目的观察阿司匹林对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（Alveolar epithelial typeⅡcell, AEC-Ⅱ）的保护效应,探讨其抗氧化损伤的作用机制。方法分离纯化大鼠AEC-Ⅱ并离体培养40h,过氧化氢（H202）处理建立氧化损伤模型。第一阶段观察阿司匹林对AEC-Ⅱ的保护效应,随机分为五组：C组（正常对照组）,S组（损伤组,加入0.5mmol/L,H202）,A1-3组（阿司匹林预处理组,分别加入阿司匹林A1组50μmol/L、A2组100μmol/L、A3组200μmol/L预处理,培养40h后加入0.5mmol/LH202）。倒置显微镜观察细胞形态学变化,四甲基偶氮唑盐酶反应比色法（MTT法）检测细胞存活率。第二阶段观察阿司匹林对原代培养AEC-Ⅱ中血红素加氧酶-1（Heme oxygenase-1, HO-1）表达的影响,随机分为四组：C组（正常对照组,直接分离纯化及原代培养）; A1组（50μmol/L阿司匹林预处理）,A2组（100μmol/L阿司匹林预处理）；A3组（200μmol/L阿司匹林预处理）。培养20h、40h、60h免疫组化染色测定HO-1蛋白表达量,PCR技术测定HO-1 mRNA表达量。结果（1）胰蛋白酶消化、免疫粘附法可收获AEC-Ⅱ2-2.5×107个／鼠,纯度和活性>90%。（2）与C组比较,S组细胞间隙增宽,贴壁细胞数量减少,细胞皱缩,细胞存活率明显下降；与S组比较,A1-3组贴壁细胞数增多,细胞形态较完整,无明显细胞皱缩,A1-3组中细胞存活率明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）与C组比较,A1-3组HO-1蛋白及HO-1mRNA表达量明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）。结论（1）胰蛋白酶消化、免疫粘附法能够获得满意的细胞产量、纯度和活性。（2）阿司匹林对离体培养大鼠AEC-Ⅱ氧化损伤具有保护效应。（3）阿司匹林在离体培养的大鼠AEC-Ⅱ有上调HO-1表达的作用。HO-1可能是阿司匹林对离体培养大鼠AEC-Ⅱ氧化损伤保护的作用机制之一。