稀土敏化荧光的机理研究及在药物分析中的应用

论文摘要

稀土敏化荧光法具有灵敏度高、选择性好、快速、简便的特点,因此得到研究人员越来越多的关注,利用此技术对生物样品及药物进行分析的报道也越来越多。本文在该方面进行了一些研究,共分以下五部分：第一章：综述了稀土敏化荧光技术的机理及在生物样品及药物分析中的研究进展,共引用文献64篇。第二章：研究Tb3+与沙拉沙星的结合反应,建立测定沙拉沙星的荧光分析方法。在pH=5.9醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,Tb3+与沙拉沙星反应形成1：2的稳定络合物,发出Tb3+特征荧光。通过测定Tb3+在激发波长335nm,发射波长545nm处的特征荧光强度测定沙拉沙星含量。在优化的实验条件下,沙拉沙星浓度在0.05-0.65mg/L范围内符合线性关系,方法检出限为0.72μg/L。该方法可直接用于未经处理的尿样中沙拉沙星含量的测定,六次平行测定该方法回收率为104.4%-109.0%,相对标准偏差为1.57%-3.07%。本文建立了荧光测定沙拉沙星的分析方法,该方法利用“稀土敏化荧光”镧系离子锐线光谱的优良特性：谱线窄、荧光寿命长、稳定、背景干扰小,使测定方法具有更高的稳定性、灵敏度和选择性。第三章：铽-环丙沙星稀土敏化荧光猝灭法测定痕量叶酸。在pH=5.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,铽（Ⅲ）与环丙沙星反应形成1：2的稳定络合物,其最佳激发、发射波长分别为λex=330 nm、λem=545nm。在该反应体系中加入适量叶酸溶液,铽（Ⅲ）与环丙沙星络合物的激发、发射波长位置不变,但荧光强度下降。利用这一现象,建立了简单、快速、灵敏的测定叶酸的荧光分析方法。该方法保持了叶酸结构的完整性,叶酸浓度在22.1-882μg/L范围内符合线性关系,方法检出限为7.77μg／L。用于片剂及胶囊中叶酸含量的测定,结果满意。六次平行测定该方法回收率为93.7%-107.9%,相对标准偏差为0.38%-2.82%。第四章：铕（Ⅲ）-诺氟沙星-十二烷基硫酸钠稀土敏化荧光法测定硫酸新霉素。在pH=7.4的氨-氯化钱缓冲溶液中,铕（Ⅲ）与诺氟沙星反应形成稳定络合物,产生稀土敏化荧光,其最佳激发、发射波长分别为λex=340 nm、λem=612nm,表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）的加入使其荧光强度进一步增加。在该反应体系中加入适量硫酸新霉素溶液,铕（Ⅲ）与诺氟沙星络合物的激发、发射峰位置不变,但荧光强度降低。利用这一现象,建立了灵敏的测定硫酸新霉素的荧光分析方法。硫酸新霉素的浓度在0.909-22.72 mg/L范围内符合线性关系,方法检出限为0.40mg/L。该方法用于片剂及滴眼液中硫酸新霉素含量的测定,快速、简便、结果满意。六次平行测定的回收率90.5%-102.3%,相对标准偏差1.4%-3.5%。第五章：铽-环丙沙星与罗丹明B间稀土敏化荧光能量转移机理研究。利用荧光光谱法及紫外光谱法研究发现pH=6.2醋酸-醋酸钠（HAc-NaAc）水溶液中铽与环丙沙星形成络合物使铽在490,545,590 nm处出现Tb3+的特征发射峰。且在545nm处的荧光强度最大,铽离子的锐线发射光谱的特征最强峰545nm与罗丹明B的最大吸收峰波长552nm十分接近,能够发生能量转移反应。实验表明,随着碱性染料罗丹明B的加入铽-环丙沙星的545nm特征荧光呈现有规律降低,表明罗丹明B对铽-环丙沙星荧光有猝灭作用,研究结果表明其猝灭类型主要为静态猝灭。又根据Forster理论,测得了罗丹明B对铽-环丙沙星的能量转移效率,相互结合距离等参数。从而进一步证明了该反应是单一静态猝灭过程,阐述了其荧光猝灭机理是通过能量转移产生的。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 综述
• 1.1 稀土敏化荧光技术的机理研究
• 1.2 稀土敏化荧光技术的研究进展
• 1.3 喹诺酮类药物在稀土敏化荧光技术中的应用
• 1.3.1 稀土喹诺酮体系在分析中的应用
• 1.4 稀土喹诺酮体系敏化荧光的研究意义
• 第2章 铽-沙拉沙星荧光光度法测定沙拉沙星
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 激发与发射光谱
• 2.3.2 酸度的影响
• 2.3.3 缓冲溶液用量的影响
• 3+溶液用量的影响'>2.3.4 Tb³⁺溶液用量的影响
• 2.3.5 稳定性实验
• 2.3.6 干扰试验
• 2.3.7 工作曲线与检出限
• 2.3.8 样品分析
• 2.4 结论
• 第3章 铽-环丙沙星稀土敏化荧光猝灭法测定痕量叶酸
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 铽-环丙沙星-叶酸体系的荧光光谱
• 3.3.2 溶液酸度的影响
• 3.3.3 缓冲溶液的选择及用量
• 3+的用量选择'>3.3.4 环丙沙星、Tb³⁺的用量选择
• 3.3.5 反应稳定性
• 3.3.6 干扰试验
• 3.3.7 工作曲线
• 3.3.8 样品分析
• 3.4 结论
• 第4章 铕（Ⅲ）-诺氟沙星-十二烷基硫酸钠稀土敏化荧光法测定硫酸新霉素
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 仪器与试剂
• 4.2.2 实验方法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 体系的荧光光谱
• 4.3.2 溶液酸度的影响
• 3+、SDS的用量选择'>4.3.3 诺氟沙星、Eu³⁺、SDS的用量选择
• 4.3.4 反应时间
• 4.3.5 干扰试验
• 4.3.6 工作曲线
• 4.3.7 样品分析
• 4.4 结论
• 第5章 铽-环丙沙星与罗丹明B间稀土敏化荧光能量转移机理研究
• 5.1 引言
• 5.2 实验部分
• 5.2.1 仪器与试剂
• 5.2.2 实验方法
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 荧光光谱
• 5.3.2 反应条件选择
• 3+-CPFX-RB体系猝灭类型'>5.3.3 Tb³⁺-CPFX-RB体系猝灭类型
• 3+-CPFX与RB作用距离的计算'>5.3.4 Tb³⁺-CPFX与RB作用距离的计算
• 5.4 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢