乳腺癌癌周浸润转移过程中VEGF、Flt-4及p53表达及意义

论文摘要

背景与目的:近几年来研究发现有多种生长因子及其受体在乳腺癌中表达,分别由肿瘤细胞、浸润细胞、血管内皮细胞及细胞外基质产生,对乳腺癌血管生成、转移、预后有重要作用。乳腺癌的侵袭性生长及其转移主要依赖于血管和淋巴管的生成,血管和淋巴管不仅提供了肿瘤生长所需要的营养,而且也是癌细胞播散的途径。目前认为肿瘤组织中血管形成的发生主要是由于肿瘤组织细胞、巨噬细胞及内皮细胞等产生的血管生成因子与抑制因子的失衡,导致了血管内皮细胞分裂增生和微血管生成,同时微血管的通透性增加。而这其中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是目前所知作用最强的促血管内皮生长的细胞因子,是对血管内皮细胞的特异性生长因子,对血管内皮细胞的促有丝分裂作用十分强烈,也是目前发现的最强的增加血管通透性的物质之一,其刺激血浆蛋白如纤维蛋白的渗出,并在细胞外基质沉积,成为肿瘤基质和新生的毛细血管网络基础,从而促进了肿瘤组织中血管的大量生成。而VEGF家族中的VEGF-C及其特异性受体Flt-4是特异性的淋巴管内皮细胞生长因子,可通过促进肿瘤新生淋巴管形成和/或淋巴管的扩张,直接或间接促进肿瘤的转移。因为肿瘤血管和淋巴管形成可能是多基因、多因素共同参与的结果,所以p53基因的突变或失活可能影响VEGF、Flt-4在乳腺癌中的表达,对乳腺癌的发生发展及转移发挥一定的作用。随着世界范围内对乳腺癌的手术治疗呈缩小趋势,“保留乳房的乳腺癌切除术”在越来越多的早期乳腺癌患者中广泛应用。如何选择合适的手术切除范围并指导术后的辅助治疗方式显得格外重要。乳腺癌保乳手术局部复发和远处转移是目前乳腺外科探讨的重点之一。乳腺癌的局部浸润发生最早并影响淋巴和血行转移,继而关系到局部治疗方式的选择和局部控制效果。保乳手术时不同病理分型及分期的病人切除范围尚无定论,手术的切除范围影响复发率,寻找与局部复发和远处转移相关的危险因子更显得尤为重要。但直至目前,乳腺癌肿瘤边缘至切缘的距离,至今尚无一致意见。本实验主要通过观测乳腺癌癌周浸润距离的大小,继而把VEGF、Flt-4及p53在乳腺癌及癌周组织中的表达的情况进行分析,探讨其与乳腺癌的组织学类型及分期、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、雌孕激素受体等的关系,阐明VEGF、Flt-4及p53与乳腺癌癌周浸润深度的关系,从而筛选出浸润深度相关因子,指导手术切除范围以及预测肿瘤局部复发和远处转移。方法:选取44例乳腺癌标本,经处理后沿标本周边平均四个方向分别完整切取一块肿瘤连同其周边正常乳腺及结缔组织进行常规H&E染色切片。光镜下观察癌周边四个方向不同范围内的乳腺和结缔组织内有无癌浸润,计算距离癌边缘的距离为浸润深度,以癌浸润最远距离计算。然后选取癌周浸润最远距离的切片所对应的石蜡切片作免疫组织化学染色,以检测VEGF、Flt-4及p53在乳腺癌及癌周组织中的表达情况,同时观察10个400倍视野下Flt-4阳性淋巴管个数。评估VEGF、Flt-4及p53的表达与乳腺癌癌周浸润程度和转移等的关系。采用单因素方差分析与等级资料秩和检验,应用SPSS12.0统计软件,P值取<0.05有显著性差异。结果:（1）44例乳腺癌浸润距离最远为13mm。浸润癌巢直径30～400μm,中位110μm。浸润距离与肿块大小无显著关系,但与组织学类型有显著关系。（2）VEGF与Flt-4的表达强度在早期浸润癌、浸润性导管癌与乳头状癌间差异均有非常显著性,其在分化程度低的肿瘤中表达强度明显高于分化程度高的肿瘤。Flt-4与肿瘤分期、ER、PR受体表达及淋巴结转移有明显关系,但是VEGF与上述指标关系不大。（3）VEGF与Flt-4在肿瘤实体的表达越强,其肿瘤的浸润能力越强,其生长浸润的距离越远,p53表达则与癌周浸润无明显关联。Flt-4阳性淋巴管数在浸润距离远的肿瘤中高于浸润距离近的肿瘤。其在淋巴结转移阳性组中的表达水平明显高于淋巴结表达阴性组。（4）癌组织VEGF、Flt-4及p53的表达强度均明显高于癌周正常乳腺组织,距离癌肿区越远,以上各因子的表达强度越低。VEGF、Flt-4及p53在近癌区与中距离区、远癌区、癌周正常组织表达差异均有显著性。中距离区与远癌区、癌周正常组织比较差异有显著性,远癌区与癌周正常组织比较差异无显著性。（5）p53表达的强度与VEGF、Flt-4表达的强度均有显著关联,而VEGF表达的强度与Flt-4表达的强度也存在显著关联。结论:（1）VEGF与Flt-4在乳腺癌中表达水平与乳腺癌的恶性程度和浸润能力相关,二者的高表达促进癌周的局部浸润;Flt-4及其阳性淋巴管的高表达还可能与乳腺癌的淋巴结转移相关。（2）P53基因的突变或失活促使了VEGF的表达,肿瘤新生血管生成;P53基因的突变或失活是乳腺癌发生与发展的早期事件并且贯穿乳腺癌发展的整个过程,对肿瘤发生发展及转移发挥一定的作用。（3）距离乳腺癌边缘>1.3cm是保乳手术时的“相对安全距离”,保乳手术时需切除肿瘤边缘至少1.5cm正常组织,可有效降低癌残留率,同时可能降低肿瘤局部复发及远处转移的机会。但无需将切除范围扩大到>3cm,需结合个体差异和临床指标进行选择。（4）VEGF与Flt-4可为临床上早期预测乳腺癌有无淋巴转移提供一种可测的参考指标,对临床治疗及预后的评价有一定的参考作用。二者也可能成为乳腺癌抗血管/淋巴管治疗的靶点。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料和方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• （九） 附图
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢