潮间带纤毛虫原生动物和小型底栖动物生态学研究

论文摘要

微型和小型底栖动物是底栖微/小食物网的重要构成。相对浮游生态系统,迄今国际间对底栖食物网的认知极为欠缺。这一方面是由于微型生物形态和功能上的复杂性和多样性,另一方面原因在于研究方法的障碍—主要是微型和小型底栖动物的定量提取和定性分析。本研究首先进行了方法学的改良,并应用新方法对底栖微食物网的重要功能类群—纤毛虫原生动物和小型底栖动物进行了不同生境的周年按月采样,在定性及定量研究的同时,联系环境因子对微型和小型底栖生物的环境监测进行了探讨。微型和小型底栖生物的定量研究首先涉及到目标生物在沉积物中的有效提取,目前硅胶液提取是普遍使用的方法,其中Ludox液主要应用于小型生物,它不但价格便宜而且比重合适,因此在常规生态研究中被广为接受。不过, Ludox易与于海水中的阳离子产生凝结而无法直接用于微型生物;目前唯一直接应用于微型生物提取的是Percoll硅胶液,但其昂贵的价格使其在常规生态研究中受到极大限制。本研究以价格低廉的Ludox硅胶液结合定量蛋白银染色（QPS）技术开发了一种新的方法,即Ludox-QPS法。主要流程为:样品采集与固定、淘洗/稀释降盐、Ludox密度梯度离心、过滤浓缩和琼脂包埋, QPS染色、永久封片及鉴定计数。添加已知数量的纤毛虫至无生物底泥的重获实验表明,该密度梯度离心的提取率大于94%;该方法对自然沉积物中纤毛虫的提取率达97.6%,对沙质、泥沙质和泥质中海洋线虫的提取率分别达97%、96.9%和97.8%。对比实验表明,经QPS制片获得的小型动物的丰度和类群数量与传统方法相当或更高,尤其当小个体虫体占优势时,该法显示出较传统方法（导致数量低估）更为明显的定量优越性。该方法除用于纤毛虫和小型动物的定量分析外,还具有较高的分类分辨率,染色后的纤毛虫原生动物大多类群可鉴定到属,部分可鉴定到种,以此可在群落水平上研究其生态作用。根据新开发的Ludox-QPS技术,在大沽河潮间带依据盐度梯度选定2个站位（IIQ和营海）进行了周年按月采样,对底栖纤毛虫和小型底栖动物进行了定量研究。纤毛虫原生动物在IIQ和营海的年平均丰度分别为2236 inds./10 cm2和935 inds./10cm2 （28 inds./ml和12 inds./ml）,平均生物量分别为119.1μgC/10 cm2和54.2μgC/10 cm2 （1.5μgC /ml 0.7μgC/ml）。丰度的季节变化趋势为:春天>秋天>夏天>冬天。垂直分布上,在营海分布于表层0 - 0.5 cm的比例为57.1%,分布于0.5-2 cm、2-4 cm和4-8 cm比例分别为23.1%、11.4%和8.5%; 13个月中除12月份外, 4-8 cm均有一定数量的纤毛虫分布;而在IIQ, 97%的纤毛虫分布在0-0.5 cm,分布在0.5-2 cm、2-4 cm和4-8 cm比例分别为2.4%、0.4%和0.2%, 4-8 cm的分布只发生在春季和秋季。纤毛虫的多样性季节变化明显,春秋季物种丰富,两个站点每毫升沉积物的平均物种数分别为18和6。Two-Way Crossed ANOSIM分析表明纤毛虫群落在月份间和站点间的差异极其显著。Pseudochilodonopsis sp., Chilodontopsis sp., Euplotes sp.及Prorodon sp.是表征两个生镜中纤毛虫群落的主要类群。同时,发现了14个小型生物类群,其中线虫在IIQ和营海的丰度优势度分别为97.4%和78.6%。小型动物在IIQ和营海的年平均丰度分别为4793 inds./10 cm2和8915 inds./10 cm2 （60 inds./ml和111 inds./ml）,其生物量分别为1068.8μgC /10 cm2和1790μgC /10 cm2 （13.4μgC/ml和22.4μgC/ml）。小型底栖动物的丰度在IIQ的季节变化为:夏季（7888 inds./10cm2） >秋季（5447 inds./10cm2） >春季（3731 inds./10cm2） >冬季（2780 inds./10cm2）;在营海则完全相反:冬季（15579 inds./10cm2） >春季（10691 inds./10cm2） >秋季（6611 inds./10cm2） >夏季（4667 inds./10cm2）。小型底栖动物和纤毛虫的相对重要性存在明显的区域和季节差异。纤毛虫原生动物、小型动物及环境因子的相关分析表明,纤毛虫的丰度和多样性与温度和盐度及有机质含量显著相关,与小型动物没有显著相关性;群落结构分析表明,温度、有机质和小型动物的丰度的组合与纤毛虫群落丰度的相关系数为0.345;盐度、脱镁叶绿素、有机质和小型动物生物量的组合与纤毛虫群落多样性的相关系数为0.403。依据海洋线虫和桡足类的比值（N/C）推测, IIQ可能存在严重的有机污染,营海的沉积物存在明显的季节波动, 8月和9月及2月可能是污染最严重的季节,这种状况在纤毛虫群落结构的CLUSTER聚类中得到验证。虽然目前尚没有形成有关微型底栖生物-纤毛虫原生动物的污染检测的直接依据,但本研究说明纤毛虫群落的确对环境污染具有一定的感应度,而且这种感应和利用小型生物的主要类群估算的污染检测（N/C）存在一定程度的关联。90年代早期有关青岛湾有机污染带的研究表明,经彻底截污后,其环境状况向良性发展。进一步了解该湾的健康状况, 2006.5 - 2007.5月对该湾沙质和泥沙质的小型动物进行周年按月采样。小型动物在泥沙质和砂质沉积物中的年平均丰度分别为4853±1292 inds./10 cm2和1528±569 inds./10 cm2;年平均总生物量分别为1434.1±897.0μgC /10cm2和720.7±353.8μgC/10cm2。在沙质底小型生物的丰度季节波动明显, 6月份和12月份最高, 3月份和9月份最低;泥沙质6月份最高,季节波动不明显。两个站点均有48%的小型动物分布在0-0.5 cm表层,海洋线虫在表层的分布比例分别为48%和34 %。共检获14个小型动物类群,其中线虫在泥沙质和砂质沉积物中的年平均丰度分别4619±1255 inds./10cm2和1014±376 inds./10cm2,其丰度优势度分别为95.2%和66.4%。其它丰度上占优势的类群,在泥沙质依次为多毛类（1.5%）、甲壳幼体（1.5%）和桡足类（0.7%）;沙质依次为:甲壳类幼体（12.6%）、腹毛类（8.3%）和桡足类（6.2%）。CLUSTER聚类分析表明,泥沙质和和砂质中小型生物的丰度组成具有64.01%的相似性。BIOENV分析表明,温度、盐度、中值粒径和粘土粉砂含量的组合最能解释不同月份之间和不同站位间的差异,其相关系数为0.614。依据线虫的丰度和类群组成,表明泥沙质底尚存一定的有机污染。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 海洋微型和小型底栖生物生态学研究综述
• 0 引言
• 1 底栖纤毛虫原生动物生态学研究
• 1.1 底栖纤毛虫形态结构的特化性
• 1.2 底栖纤毛虫生态功能的重要性和复杂性
• 1.3 底栖纤毛虫生态学方法研究
• 2 小型底栖动物生态学研究
• 2.1 小型底栖动物的研究历史和现状
• 2.2 小型底栖动物的研究方法
• 3 微型和小型底栖生物的相互作用
• 3.1 研究简况
• 3.2 底栖细菌和小型动物相互作用
• 3.3 底栖微藻和小型动物相互作用
• 3.4 底栖原生动物和小型动物的相互作用
• 3.5 小结
• 4 我国底栖纤毛虫和小型底栖生物生态学研究现状
• 5 本研究目的、意义及课题来源
• 第二章 纤毛虫原生动物和小型底栖动物定量方法学研究
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 不同盐度水平下 HS 40 的凝结实验
• 2.2 以无生物底泥检测Ludox 对纤毛虫的提取效率
• 2.3 Ludox 离心提取结合 QPS 技术在自然沉积物中的应用
• 2.3.1 样品采集和固定
• 2.3.2 应用Ludox 离心-QPS 染色进行纤毛虫和小型生物的定量
• 2.3.3 小型底栖动物的两种常规提取分析
• 3 结果与讨论
• 3.1 Ludox HS 40 对不同盐度梯度的凝结效应
• 3.2 Ludox 对无生物底泥中纤毛虫的的提取效率
• 3.3 Ludox 离心-QPS 染色法对自然沉积物中纤毛虫和小型底栖动物的提取
• 3.3.1 沉积物样品的淘洗效能
• 3.3.2 Ludox 离心-QPS 染色法的提取效率
• 3.3.3 Ludox 离心-QPS 染色法在纤毛虫原生动物的群落研究中的应用
• 3.4 QPS 制片对小型底栖动物的定量分析
• 3.5 传统的 Ludox TM 和改良的 Ludox HS 40 对小型动物的提取效率
• 3.6 Ludox 和 Percoll 密度梯度在定量提取中的应用
• 4 小结
• 第三章 大沽河河口潮间带纤毛虫原生动物和小型动物生态学研究
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 采样环境与研究站位
• 2.2 野外采样
• 2.3 样品分析与测定
• 2.4 数据处理与统计
• 3 结果与分析
• 3.1 沉积物环境
• 3.2 纤毛虫原生动物群落
• 3.2.1 丰度和生物量的季节变动和垂直分布
• 3.2.2 丰度和生物量与环境因子的相关分析
• 3.2.3 类群构成
• 3.2.4 类群组成与环境因子的相关分析
• 3.2.5 多样性分析
• 3.3 小型底栖动物
• 3.3.1 类群组成和垂直分布
• 3.3.2 丰度和生物量
• 3.3.3 与环境因子的关系
• 4 讨论
• 4.1 底栖纤毛虫和小型底栖动物及相关研究的比较
• 4.2 微型和小型底栖生物在环境监测中的应用
• 4.3 底栖纤毛虫和小型底栖动物在底栖生态系统中的相对重要性
• 第四章 青岛湾小型底栖动物的丰度和生物量
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 采样环境与研究站位
• 2.2 样品采集与分析
• 3 结果
• 3.1 沉积物环境
• 3.2 小型底栖生物的丰度和生物量、类群组成和垂直分布
• 3.3 小型底栖生物与环境因子的相关分析
• 4 讨论
• 4.1 小型底栖动物的丰度与同类研究的比较
• 4.2 海洋线虫的丰度及线虫/桡足比值在污染监测中的应用
• 5 小结
• 主要结论
• 主要参考文献
• 在读期间文章发表及撰写
• 在读期间获奖情况
• 致谢