论文摘要
苹果多酚（AP）是苹果中天然存在的一类重要生物活性物质,具有众多功能和极大的开发应用价值。研究发现,AP具有清除自由基、强抗氧化性、抗突变和抗癌、抑制血压上升、防龋齿、抑制人唾液产生口臭成分（四硫醇）、抑制鱼臭挥发、抗过敏、美白、减肥等作用。目前,AP已作为天然抗氧化剂和功能性食品添加剂而应用。肝脏是人体重要的解毒器官,同时肝脏也极易受到各种有害因子的影响而受损,进而发展成为各种类型的肝脏疾病,因此如何预防及治疗各类肝脏疾病一直受到国内外学者的关注。目前,从天然产物,尤其是食物来源的天然产物中,发现安全性高、疗效好的保肝药物是一个具有良好前景的研究方向。因此,本文考察AP对各种化学性肝损伤的保护作用,并对其可能的机制进行了初步探讨,为其临床治疗肝损伤相关疾病提供药理学依据。一、急性毒性实验AP灌胃给予小鼠的LD50＞5000mg/kg,腹腔注射给予小鼠的LD50=339.78mg&g。二、体外抗氧化实验AP能够抑制FeSO4-L-Cys诱导的大鼠体外肝微粒体的脂质过氧化反应,IC50=0.1063mg/ml;AP还表现出明显快速地清除DPPH自由基的能力,IC50=2.46×10-3mg/ml（time=120min）。三、整体肝损伤保护作用1、CCl4肝损伤实验首先确定CCl4所致小鼠急性肝损伤模型的剂量为0.1%（0.1ml/kg,i.p.）,AP的给药剂量是200、400和800mg/kg,给药周期为7天,给药方式为连续灌胃给药。AP各剂量均可显著地抑制CCl4引起的肝比重增加;AP 800mg/kg可以明显抑制血清中ALT、AST活性的升高,AP 400 mg/kg能够显著抑制AST的升高;AP各剂量对CCl4所致的肝组织的病理变化有明显的改善。同时,AP各剂量均能够显著地抑制CCl4引起的肝组织中MDA生成的增加;AP 200、400 mg/kg显著地抑制SOD活性的降低;AP 800 mg/kg对GSH的耗竭有明显地抑制作用。另外,AP 800 mg/kg可以显著地提高CCl4损伤小鼠肝组织中Ca2+-ATPase的活力;AP各剂量对肝细胞DNA损伤有显著的保护作用,并呈剂量依赖性;AP各剂量均可改善肝细胞线粒体膜电位;AP各剂量在一定程度上抑制肝细胞线粒体肿胀,但没有统计学差异。2、D-氨基半乳糖（D-GalN）肝损伤实验AP 800 mg/kg可以显著地抑制由D-GalN引起的血清ALT和AST的活性的升高,AP400 mg/kg对ALT有显著性降低作用;AP各剂量对肝组织的病理变化有改善作用。同时,AP 400和800mg/kg可以显著地减少D-GalN肝损伤小鼠肝组织中MDA的生成;AP 400和800mg/kg均可显著地提高SOD的活性;AP 800mg/kg对GSH的耗竭有明显地抑制作用。3、乙醇肝损伤实验AP各剂量能够剂量依赖地显著降低乙醇急性肝损伤小鼠血清中ALT的含量,AP 400和800mg/kg可以显著降低血清中AST的含量,AP 800mg/kg对肝比重增加有显著性降低作用;AP各剂量对肝组织的病理变化也有明显的改善。同时,AP 400和800mg/kg均可显著地减少乙醇肝损伤小鼠肝组织中MDA的生成;AP 400和800mg/kg均可显著地提高SOD的活性;AP各剂量都可以显著地提高肝组织中GSH的水平。4、顺铂（CP）肝损伤实验AP 800mg/kg可以显著降低CP肝损伤小鼠血清中ALT的含量;AP各剂量对肝组织的病理变化有改善作用。同时,AP 800mg/kg可以显著地减少CP肝损伤小鼠肝组织中MDA生成;AP 800mg/kg可以显著地提高SOD活性,对GSH的耗竭有明显地抑制作用。5、肝再生及修复能力AP 800mg/kg可以明显增加部分肝切除小鼠的相对肝重和脾指数;AP 400mg/kg能够明显增加相对肝重。6、正常小鼠胆汁分泌能力AP 400、800mg/kg均可明显增加正常小鼠的胆汁分泌量。综上所述,AP毒性较低,对多种肝损伤模型具有显著的保护作用,且具有利胆作用,其保肝的作用机制可能与清除自由基、抑制脂质过氧化反应、提高机体抗氧化能力、促进肝细胞修复与再生、保护肝细胞膜及线粒体的功能等有关。本实验结果为进一步开发利用AP在保肝方面的保健用、药用价值提供了实验依据。