腺病毒介导的人白介素24和p16基因体外治疗肺腺癌细胞株A549的实验研究

论文题目: 腺病毒介导的人白介素24和p16基因体外治疗肺腺癌细胞株A549的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 临床检验诊断学

作者: 田文标

导师: 邹全明

关键词: 非小细胞性肺癌,重组腺病毒载体,基因治疗,细胞周期,凋亡

文献来源: 第三军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 肺癌是人类最常见和最难治愈的恶性肿瘤之一,其发生、发展和转移是一个极其复杂的多基因调控异常的过程。该病确诊时多非早期,故疗效较差。最新统计表明,肺癌死亡率上升幅度居各类肿瘤之首[1]。肺癌在临床上分为非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC),其中前者约占肺癌发病总数的80%。虽然传统的放疗、化疗可以在一定程度上提高病人的预后情况,但由于存在负作用、转移等各种问题,目前仍缺乏有效的手段进行根治,严重影响着人类的生命健康。因此,关于肺癌的防治研究,尤其是非小细胞肺癌的治疗研究,成为当今最受人们关注的领域之一。近年来,随着医学分子生物学技术和理论的发展以及对肺癌发病机制认识的不断深入,尤其是DNA重组技术和基因转移技术逐步成熟,研究者们提出了利用基因转移技术向体内导入目的基因,从而对肺癌发病的分子环节进行干预的防治策略,为肺癌的治疗开辟了新途径。本研究拟以人白介素24(hIL-24)和p16基因作为分子工具,采用重组腺病毒为基因导入载体对非小细胞肺癌中具有代表性的肺腺癌A549细胞株进行体外基因治疗的实验研究,主要探讨外源性hIL-24和p16基因的转入及异位表达对治疗A549肿瘤细胞所发挥的作用及其内在机制,以期为肺癌基因治疗研究的进一步深入奠定必要的实验基础。研究方法:1.分离人外周血单个核细胞,提取其RNA作为模板采用RT-PCR方法分别扩增人白介素24(hIL-24)和p16基因cDNA全部编码序列,并将其亚克隆至测序载体pMD18-T上进行测序分析。2 .将测序正确的IL-24和p16基因片断定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上分别构建穿梭质粒pAdTrack-IL24和pAdTrack-p16,然后将阳性重组子分别与腺病毒基因组质粒pAdEasy1在BJ5183工程菌中进行同源重组构建重组腺病毒质粒pAdEasy-IL24和pAdEasy-p16并加以鉴定。3.采用脂质体DOTAP介导构建正确的重组腺病毒质粒pAdEasy-IL24和

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论文正文腺病毒介导的人白介素24 和p16 基因体外治疗肺腺癌细胞株A549 的实验研究

前言

第一部分人IL-24 和p16 基因cDNA 的克隆及序列测定

实验材料

实验方法

结果

讨论

参考文献

第二部分人IL-24 和p16 基因重组腺病毒的构建与鉴定

实验材料

实验方法

结果

讨论

参考文献

第三部分外源性人IL-24 和p16 基因的转导对A549 细胞增殖和凋亡的影响

实验材料

实验方法

结果

讨论

参考文献

第四部分外源性人IL-24 和p16 基因的转导对A549 细胞化疗、放疗敏感性的影响

实验材料

实验方法

结果

讨论

参考文献

全文总结

致谢

文献综述肺癌的分子生物学及基因治疗研究进展

参考文献

发布时间: 2006-10-19

参考文献

[1].组蛋白去乙酰化酶1在肺腺癌发生发展中的作用[D]. 顾红军.第二军医大学2009
[2].miR-125b通过调控Bcl-2和ABCC4的表达影响A549/DDP细胞系耐药性的研究[D]. 朱长亮.第四军医大学2014
[3].SOCS3对肺腺癌细胞株生长和转移的影响及相关信号通路的研究[D]. 余祖滨.第三军医大学2008
[4].麦冬皂苷类成分对NSCLC的体外抑制作用及相关机理研究[D]. 陈美娟.南京中医药大学2014
[5].非小细胞肺癌中Nodal的表达及其诱导转移的机制研究[D]. 何锦园.中山大学2015

腺病毒介导的人白介素24和p16基因体外治疗肺腺癌细胞株A549的实验研究

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