清气凉营注射液解热物质基础的研究

论文摘要

清气凉营注射液是由大青叶,金银花,大黄,知母,野菊花,淡竹叶6味药材组成的静脉注射液,具有清气泄热、凉营化瘀等功效。临床上治疗流行性出血热、流行性腮腺炎等急性病毒性传染病。1997年清气凉营课题组就已经在清气凉营注射液的研制和临床研究方面取得了一定的成果,在此研究的基础上为进一步探明该注射液的物质基础,我们采用大孔树脂分离技术对清气凉营注射液进行有效部位的分离,并在大鼠解热药效筛选结果的指导下采用HPLC指纹图谱技术对有效部位进行药材归属的追踪,并使用HPLC-MS技术对有效部位各成分进行分子结构定性分析,以期实现对全方药效物质基础的确定。在实验中,我们首先运用静态吸附解吸附,动态吸附解吸附实验对大孔树脂进行筛选,并以含固量为初步判断指标,结果显示型号为HPD-100的树脂可以对清气凉营注射液进行较好分离;通过筛选溶剂,最后采用水,30%乙醇和95%乙醇对清气凉营注射液进行分步洗脱,使清气凉营注射液中不同极性的成分得到较好分离。对大孔树脂分离出的不同类型的成分,我们通过对干酵母发热模型大鼠的退热试验,比较清气凉营注射液及其乙醇分离部分对大鼠体温的影响,从而判断清气凉营注射液及其分离部分的解热效果,并根据对发热大鼠下丘脑中PGE2和cAMP的含量影响结果,进一步阐明其解热机理。结果表明:清气凉营注射液具有良好的解热作用,水分离部分解热效果不明显,30%和95%的乙醇分离部分具有一定的解热作用,且30%乙醇分离部分的效果更好。我们采用HPLC技术对清气凉营注射液,30%乙醇分离部分以及含药血清进行了成分归属分析研究,并对清气凉营注射液中的水溶性成分、亲脂性成分和苷元三类成分进行分析。在实验中我们将处方中的原药材分别按注射液工艺的处理,通过各药材与清气凉营注射液及其30%乙醇分离部分HPLC指纹特征峰的保留时间和光谱图的分析,初步判断全方各特征峰的药材归属。通过含药血清与清气凉营注射液的HPLC指纹特征峰的保留时间和光谱图的分析,初步判断含药血清的成分归属。结果表明:清气凉营注射液中主要有效成分主要来自于大青叶,金银花,野菊花,大黄;而30%乙醇分离部分则主要来自于大黄,金银花,野菊花。从血清中成分归属判断解热有效成分有可能来自于野菊花。在成分分析方面,我们还进一步运用了HPLC-MS分析技术对所检测到的特征峰进行分子结构推测,以确定注射液和血清中的化学成分,通过分析,清气凉营注射液中检测到的17个峰有13个峰被推测出分子结构,而血清中检测到的归属于野菊花的2个峰也能够确定其中一个为蒙花苷。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1、中药物质基础研究
• 1.1 中药复方药效物质基础的研究目的
• 1.2 中药复方药效物质基础的研究思路
• 1.3 研究新思路
• 1.4 存在的问题
• 1.5 展望
• 2、血清药物化学在中药复方中的研究进展
• 2.1 血清药物化学概念
• 2.2 血清药物化学在中药复方中的应用
• 2.3 中药血清药物化学的未来发展
• 3、清气凉营注射液中各药材解热研究
• 3.1 大青叶的解热研究
• 3.2 金银花的解热研究
• 3.3 大黄的解热研究
• 3.4 知母的解热研究
• 3.5 野菊花的解热研究
• 3.6 淡竹叶的解热研究
• 第二章 清气凉营注射液的大孔树脂分离
• 1、药物、仪器及试剂
• 1.1 药物
• 1.2 仪器与试剂
• 2、实验方法
• 2.1 含固量的测定
• 2.2 大孔树脂筛选
• 2.3 洗脱溶剂的筛选
• 2.4 清气凉营注射液的大孔树脂分离
• 3、实验结果
• 3.1 含固量测定结果
• 3.2 静态吸附结果
• 3.3 动态吸附结果
• 3.4 五种洗脱溶剂的分离结果
• 3.5 清气凉营注射液分离结果
• 4、讨论
• 5、小结
• 第三章 清气凉营注射液及大孔树脂不同分离部分的大鼠解热实验
• 1、药物、仪器及试剂
• 1.1 药物
• 1.2 仪器与试剂
• 2、实验方法
• 2.1 动物与体温测定
• 2.2 给药时间的确定
• 2.3 动物分组
• 2.4 造模
• 2.5 给药
• 2.6 统计学方法
• 3、实验结果
• 3.1 给药时间的确定
• 3.2 清气凉营注射液及其分离部分对干酵母致热大鼠体温的影响
• 4、讨论
• 5、小结
• 第四章 清气凉营注射液及其30%乙醇分离部分解热机制—对下丘脑中PGE2和cAMP含量的影响
• 1、药物、仪器及试剂
• 1.1 药物
• 1.2 仪器与试剂
• 2、实验方法
• 2.1 动物与体温测定
• 2.2 动物分组与处理
• 2的提取和测定'>2.3 下丘脑组织PGE₂的提取和测定
• 2.4 下丘脑中cAMP的提取含量测定
• 2.5 统计学方法
• 3、实验结果
• 4、讨论
• 5、小结
• 第五章 清气凉营注射液,30%乙醇分离部分和血清中成分的HPLC图谱及其有效成分归属研究
• 1、药物、仪器及试剂
• 1.1 药物
• 1.2 仪器和试剂
• 2、清气凉营注射液的HPLC图谱的建立
• 2.1 实验方法
• 2.2 实验结果
• 2.3 讨论
• 3、大孔树脂30%乙醇分离部分的HPLC图谱分析
• 3.1 实验方法
• 3.2 实验结果
• 3.3 讨论
• 4、清气凉营注射液HPLC指纹特征峰的归属性分析
• 4.1 实验方法
• 4.2 实验结果
• 4.3 讨论
• 5、30%乙醇分离部分的HPLC指纹特征峰的归属分析
• 5.1 实验方法
• 5.2 实验结果
• 5.3 讨论
• 6、清气凉营注射液及30%乙醇分离部分的血清药物化学研究
• 6.1 实验方法
• 6.2 实验结果
• 6.3 讨论
• 7、小结
• 第六章 清气凉营注射液及其含药血清的HPLC-MS研究
• 1、药物、仪器及试剂
• 1.1 药物
• 1.2 仪器和试剂
• 2、清气凉营注射液的HPLC-MS研究
• 2.1 实验方法
• 2.2 实验结果
• 2.3 讨论
• 3、含药血清的HPLC-MS研究
• 3.1 实验方法
• 3.2 实验结果
• 3.3 讨论
• 4、小结
• 全文总结
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表论文