重组人生长激素直肠栓的制备及其大鼠体内生物利用度的研究

论文摘要

人生长激素（hGH）是脑垂体前叶分泌的一种蛋白质类激素,含有191个氨基酸残基,分子量为22000道尔顿,内含两个二硫键,无糖基化,是人类出生后促进生长的重要的激素,具有调节人体生长代谢等多种生物学功能。随着基因工程制药技术的广泛使用,重组人生长激素已成为用于治疗儿童原发性矮小症的首选治疗用生物制品。目前上市的重组人生长激素均为注射剂,给药方法为每天一次皮下注射,治疗疗程为3个月至3年。由于此药治疗周期较长,患儿在接受治疗过程中会产生注射所带来的痛苦和风险,因此患者依从性较差。本研究旨在研制出具有较好生物利用度的重组人生长激素的栓剂剂型,从而达到增强患者用药的顺应性、降低患者用药成本的目的。本研究从重组人生长激素水溶性栓剂基质处方的制备工艺入手,筛选出以甘油/明胶作为栓剂的基质组分,通过加入蛋白稳定剂和蛋白促吸收剂使得重组人生长激素栓具有较好的稳定性和体内生物利用度,通过对研制的三批中试规模生产的产品的质量研究、长期稳定性研究以及大鼠体内的生物利用度研究结果表明,以甘油/明胶为基质、Triton X-100为促吸收剂所制备的重组人生长激素栓的产品质量在融变时限、微生物限度等方面完全符合《中华人民共和国药典》中关于栓剂的相关要求;产品在4℃条件下保存24个月具有良好的稳定性;在大鼠体内的相对生物利用度可达到40%以上。上述实验数据为重组人生长激素栓临床应用提供了重要的实验室数据。

论文目录

• 内容提要
• 第1章 引言
• 1.1 简介
• 1.2 生长激素（GH）的临床应用
• 1.3 栓剂定义
• 1.4 栓剂的发展历史及发展新形势
• 1.5 栓剂剂型特点
• 1.6 GH 栓剂课题摘要
• 1.7 开发GH 栓剂剂型课题意义
• 1.8 国内外发展状况
• 第2章 处方优化及制备工艺研究
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 原料药来源
• 2.2 处方摸索
• 2.2.1 制剂处方制定的依据
• 2.2.2 处方的确定
• 2.2.3 促吸收剂促进吸收的原理
• 2.3 制备工艺研究
• 2.3.1 制备方法
• 2.3.2 重组人生长激素原液制备工艺图
• 2.3.3 重组人生长激素栓制备工艺流程图
• 第3章 重组人生长激素栓的质量研究
• 3.1 实验目的
• 3.2 实验材料
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 高效液相色谱仪（waters1525）色谱法
• 3.3.2 微生物限度检查法检查
• 3.4 重组人生长激素栓的制造
• 3.4.1 产品批号
• 3.4.2 产品规格
• 3.4.3 产品制造工艺
• 3.5 重组人生长激素栓的检验
• 3.5.1 处理产品的工艺的验证
• 3.5.2 检测波长的确立
• 3.5.3 重组人生长激素标准品和样品图
• 3.5.4 标准曲线的绘制
• 3.5.5 回收率的测定
• 3.5.6 精密度的测定
• 3.6 实验结果
• 3.6.1 性状
• 3.6.2 鉴别
• 3.6.3 重量差异
• 3.6.4 融变时限
• 3.6.5 pH 值
• 3.6.6 含量
• 3.6.7 微生物限度
• 3.6.8 贮藏
• 第4章 重组人生长激素栓稳定性实验研究
• 4.1 概述
• 4.1.1 引起多肽不稳定性的因素
• 4.2 提高多肽稳定性的途径
• 4.2.1 定点突变
• 4.2.2 化学修饰
• 4.2.3 添加剂
• 4.2.4 冻干
• 4.3 稳定性研究指标的确立及试验方法
• 4.4 三批中试样品的稳定性研究
• 4.5 注射用重组人生长激素初步稳定性研究总结
• 第5章 重组人生长激素栓大鼠体内生物利用度实验研究
• 5.1 实验目的
• 5.2 试验材料与方法
• 5.2.1 受试药
• 5.2.2 对照药
• 5.2.3 试验动物
• 5.2.4 检测 rhGH 试剂盒
• 5.2.5 试验用主要仪器
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 剂量设定
• 5.3.2 动物分组
• 5.3.3 给药途径和方法
• 5.3.4 血清中药物含量的测定
• 5.3.5 样品测定及药动参数的计算和分析
• 5.4 实验结果
• 5.4.1 rhGH 的标准曲线的制备
• 5.4.2 大鼠皮下注射 rhGH（250μg/kg）后不同时间的血药浓度
• 5.4.3 大鼠直肠给予 rhGH栓（250μg/kg）后不同时间的血药浓度
• 5.4.4 大鼠直肠给予 rhGH 栓（250μg/kg）后的相对生物利用度
• 第6章 讨论
• 6.1 历史发展
• 6.2 栓剂作用的认识
• 6.2.1 全身作用
• 6.2.2 局部作用
• 6.3 直肠给药环境的新认识
• 6.4 影响栓剂作用的因素
• 6.4.1 基质
• 6.4.2 表面活性剂
• 6.5 促吸收剂促进吸收的原理
• 第7章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 中文摘要
• ABSTRACT