化痰方对慢性支气管炎大鼠EGFR合成粘蛋白MUC5AC影响的研究

论文题目: 化痰方对慢性支气管炎大鼠EGFR合成粘蛋白MUC5AC影响的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 中医内科学

作者: 陈景德

导师: 王鹏

关键词: 慢性支气管炎,实验研究,大鼠,粘蛋白,表皮生长因子受体,化痰方

文献来源: 湖北中医学院

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:从表皮生长因子受体(EGFR)合成粘蛋白作用的角度进一步研究化痰方对慢性支气管炎大鼠化痰的影响,希望能在一定程度上揭示中药化痰方作用的分子机理。 方法:健康SD大鼠48只,雌雄各半,体重180-220g,随机分为三组:慢性支气管炎组(模型组)、化痰组(中药组)、生理盐水组(假手术组)。慢支模型组和中药治疗组一次注入浓度为1g/L的脂多糖200ul造模,假手术组气管注入液以生理盐水代替内毒素造模。治疗组从第8天起开始予中药按9.5g/kg/d灌胃(相当于成人常用量,按体表面积折算),模型组和假手术组每天给予同体积生理盐水灌胃,连续14天后取材。①观察大鼠咳嗽,气喘,口鼻分泌物,活动状况,毛发光泽度,粪尿,食量,体重等一般情况和酚红排痰实验观察各组大鼠支气管痰的分泌;②采用常规病理,观察各组大鼠肺组织形态改变;③采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测各组大鼠肺组织粘蛋白(MUC)5ACmRNA的表达,采用免疫组化方法测定各组大鼠MUC5AC蛋白的表达;④采用免疫组化方法测定各组大鼠EGFR的表达;⑤大鼠处死后,取左肺进行支气管肺泡灌洗,在光镜下计数支气管肺泡灌洗液(BALF)沉渣200个细胞,计算中性粒细胞(PMN)所占百分比。⑥用双抗体夹心法测定血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。⑦用免疫组化方法测定各组大鼠肺组织核转录因子κB(NF-κB)的表达。 结果:①模型组大鼠普遍可听见明显的气道痰鸣音,并有咳嗽,气喘,逆毛,体毛干枯无光泽,拱背蜷睡,少动,反应迟钝,食少,大便稀,身体消瘦等症状。模型大鼠酚红排泄量高于假手术组(P<0.01),与中药治疗组比较有显著性差异(P<0.05);②组织形态学上观察可见模型组大鼠气管、支气管纤毛柱状上皮细胞部分剥脱,粘液腺肥大,分泌旺盛,浆液腺发生粘液化,杯状细胞增生;中药化痰治疗后,上述病理损害明显减轻;③模型大鼠MUC5ACmRNA高于假手术组(P<0.05),中药治疗后MUC5ACmRNA的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),模型大鼠MUC5AC蛋白高于正常组(P<0.05),中药治疗后MUC5AC蛋白的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);④模型组EGFR的表达高于假手术组(P<0.01),中药治疗后,EGFR的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);⑤模型组中PMN明显增加高于假手术组(P<0.01),中药治疗后,BALF中PMN所占比例降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);⑥模型组TNF-α的表达高于假手术组(P<0.01),中药治疗后,TNF-α的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)⑦模型组肺组织NF-κ博士学位论文B高于假手术组(P<0.01),中药治疗后NF一KB的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异。 结论:①化痰方通过减少EGFR的合成进而减少粘蛋白的合成而达到化痰目的。②化痰方减少中性粒细胞和肿瘤坏死因子含量,从而使EGFR的合成受到影响,最终使粘蛋白合成减少。③化痰方减少核因子表达,从而导致粘蛋白合成减少。关键词:慢性支气管炎;实验研究;大鼠;粘蛋白 表皮生长因子受体@化痰方

论文目录:

目录

中文摘要

Abstract

缩略词表

前言

第一部分 综述

第二部分 实验研究

实验一 化痰方对慢性支气管炎大鼠酚红排痰实验的影响

实验二 化痰方对慢性支气管炎大鼠肺组织形态学的影响

实验三 化痰方对慢性支气管炎大鼠MUC5AC基因和蛋白表达的影响

实验四 化痰方对慢性支气管炎大鼠肺组织EGFR表达的影响

实验五 化痰方对慢性支气管炎大鼠气道中性粒细胞数量的影响

实验六 化痰方对慢性支气管炎大鼠血清中TNF-α表达的影响

实验七 化痰方对慢性支气管炎大鼠肺组织NF-κBp65表达的影响

第三部分 结论与探讨

致谢

发布时间: 2005-06-22

参考文献

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