论文摘要
目的:检测钙视网膜蛋白(calretinin, CR)在先天性无神经节细胞症(Hirschsprung’s disease,HD)患儿扩张段、移行段、痉挛段结肠壁的表达结果,同时设立对照组。探讨将钙视网膜蛋白用于诊断先天性无神经节细胞症(尤其是新生儿先天性无神经节细胞症)的可行性。方法:1.标本来自于重庆医科大学附属儿童医院2010年—2011年诊断为散发性HD的根治切除术患者标本50例,其中年龄<1个月标本6例,1-3个月标本23例,4个月-1岁标本11例,>1岁标本10例,将此作为实验组。正常对照组为同年龄段小儿尸检结肠标本10例,经显微镜检查可见发育成熟的神经节细胞。2.采用免疫组织化学染色法检测CR在50例HD患儿结肠扩张段、移行段、痉挛段肠壁和10例正常对照组患儿结肠壁的表达结果,并与常规HE染色进行对比分析。用Image-Pro-Plus图文分析系统定量分析染色结果。SPSS17.0数据分析系统进行统计学分析。结果:1.痉挛段粘膜下层CR表达的平均光密度值(mean opticaldensity,MOD)为0.03446±0.02732,扩张段MOD为0.39218±0.05555,P<0.01,差异有统计学意义;痉挛段肌层间CR表达的MOD值为0.03914±0.02453,扩张段MOD为0.29879±0.06249,P<0.01,差异有统计学意义。2.HE染色扩张段及正常对照组结肠壁神经丛中可见神经节细胞,痉挛段神经节细胞缺失,CR免疫组化染色与HE染色诊断结果一致;3.新生儿痉挛段粘膜下层CR表示的MOD值0.03079±0.01563,年长儿为0.02933±0.02453,t=0.234,P=0.816,差异无统计学意义。结论:1.可取直肠粘膜活检检测CR表达情况,协助HD术前、术后诊断;2.与传统方法比较,CR免疫组化染色用于新生儿HD准确性较高,具有明显优越性
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