论文摘要
近年来的研究显示,外源性凝血机制与很多的病理过程密切相关,这些病理过程包括炎症反应,动脉粥样硬化,肿瘤的生成生长和转移等。本实验室经过多年研究发现并证明了TF在大肠癌组织中的表达以及TF/FⅦa促进的大肠癌肝转移,增强大肠癌细胞在体和体外的侵袭能力。先前的实验多数都着眼TF/FⅦa复合分子当中的TF的研究。本实验则针对该复合分子中的另一重要元素FⅦa,发现了FⅦa在大肠癌当中的肝外异源性表达,并且证明了其表达情况和大肠癌的肝转移,淋巴结转移密切相关。同时发现缺氧可以诱导FⅦa表达的上调。目的:研究大肠癌组织和大肠癌肿瘤细胞系中FⅦ的异源性表达情况,进一步探讨这种异源性表达和大肠癌肿瘤肝转移、淋巴结转移的关联性,研究缺氧对于大肠癌肿瘤细胞系中FⅦ异源性表达的影响。材料与方法:以我院新近（2006年1月至2007年6月间）手术切除的大肠癌肿瘤标本和同一病例的大肠正常粘膜共45例,以及大肠癌细胞系LoVo SW-480 HT-29为研究对象。通过RT-PCR方法首先检验FⅦmRNA在大肠癌组织和细胞系中的是否有异源性表达,进一步通过实时定量RT-PCR（Real-Time RT-PCR）方法检测FⅦmRNA在不同Dukes分期以及淋巴结转移情况下的大肠癌组织当中的表达量的差异性。通过免疫组织化学方法检测FⅦ在大肠癌组织当中的异源性合成。并通过Western-Blot方法检测FⅦ在不同Dukes分期的大肠癌组织当中合成的差异。从细胞学水平检测普通培养条件和缺氧（O2<1%）条件培养24小时FⅦ在三种大肠癌肿瘤细胞中表达量的变化。结果:RT-PCR发现在大肠癌组织和三种大肠癌肿瘤细胞当中均有表达,而在正常粘膜当中没有表达。实时定量RT-PCR（Real-Time RT-PCR）证明了在不同的Dukes分期的大肠癌肿瘤组织当中的FⅦ表达存在差异,从A期到D期,表达量逐渐提高,尤其是D期与其他各期存在明显的差异。有淋巴结转移组的大肠癌组织当中的FⅦ表达量也高于无淋巴结转移组,且差异具有统计学差异。缺氧培养24小时后FⅦ在三种大肠癌细胞当中的表达量均升高,且具有统计学差异。结论:大肠癌组织当中和大肠癌细胞当中存在异源性的活性凝血因子ⅦmRNA的表达和蛋白的合成;大肠癌组织当中的FⅦ表达量和肿瘤的Dukes分期以及淋巴结的转移密切相关,可能具有促进大肠癌肿瘤的侵袭和转移能力,但与淋巴结转移数目无关;缺氧可以上调大肠癌细胞系中FⅦ的表达量。