α酮酸加低蛋白饮食延缓KKAy小鼠糖尿病肾病进展的机制：抗氧化应激的作用

论文摘要

随着人口老龄化和生活方式改变,2型糖尿病（T2DM）的发病率逐年升高,预计到2030年全世界T2DM的患病人数将达到3亿,其中25%-40%的患者出现DN。DN是糖尿病最严重的微血管并发症之一,为糖尿病患者的主要死因。糖尿病进展至终末期糖尿病肾病一般要经过高滤过、微量白蛋白尿、大量蛋白尿和肾衰竭几个阶段。一旦患者出现持续大量蛋白尿,则病情不可逆转,直至ESRD。因此,早发现,早治疗糖尿病和糖尿病肾病十分重要。2型糖尿病和糖尿病肾病的治疗包括生活方式改变、控制高血糖、降低高血压、降低高血脂、降低蛋白尿及防治心血管并发症等措施。在降蛋白尿治疗中,限制蛋白质摄入及阻断肾素-血管紧张素系统是主要治疗方法。限制蛋白摄入,能够减少DN患者蛋白尿的排泄,减轻大量蛋白尿对肾组织的进一步损伤。但是目前的研究,对于LPD能否延缓CKD进展,降低患者死亡率尚存在争议。本课题利用KKAy小鼠这一糖尿病肾脏早期的动物模型,给予不同比例的蛋白饮食,通过检测小鼠肾脏病变进展情况,观察LPD加α酮酸饮食对糖尿病肾病进展的影响。本研究的目的在于：①明确低蛋白加α酮酸饮食是否能够减缓T2DM小鼠的肾脏病变进展。②探讨低蛋白加α酮酸饮食延缓DN进展的可能机制：是否影响肾组织氧化应激水平,从而为糖尿病肾病的饮食治疗提供理论依据。本研究由两部分组成。一、低蛋白加α酮酸饮食对2型糖尿病KKAy小鼠的肾脏保护作用选取雄性8周龄KK-Ay小鼠作为2型糖尿病动物模型,随机分为3组分别为正常蛋白饮食组（NPD）、低蛋白饮食组（LPD）、低蛋白+酮酸组（LPD+KA）。对照组同周龄具有相同遗传背景的C57BL／6J小鼠（Control）。上述各组小鼠给予正常蛋白饮食适应性喂养4周,于第12周开始给予相应的饮食。分别于12、16、20、24周龄收集血、尿标本。血清用于检测空腹血糖、血清白蛋白。24小时尿液用于尿蛋白／尿肌酐比值的检测。24周龄处死小鼠留取肾组织,行相关检查。结果显示,与对照组相比较,24周龄NPD组小鼠出现明显的糖尿病肾病的病理改变。24周龄NPD组出现明显的肾小球系膜基质增加,同时肾小球基底膜显著增厚。LPD和LPD+KA组病变轻于NPD组。LPD+KA组小鼠病理改变最轻,治疗效果优于LPD组。LPD组小鼠出现体重轻、血清白蛋白水平低,同时尿蛋白与尿肌酐比值升高,与LPD+KA组存在显著差异。二、低蛋白加α酮酸饮食可以通过减轻肾组织氧化应激水平延缓DN进展。将24周龄各组小鼠肾组织行组织匀浆检测SOD、MDA,提取总蛋白行Oxybolt检测蛋白氧化水平,行Western-blot检测硝基化酪氨酸。结果显示,与对照组比较,KKAy三组小鼠氧化应激（MDA、硝基化酪氨酸、Oxybolt）水平明显升高,SOD水平显著下降(（P<0.05）, LPD+KA组相关指标显著优于NPD组和LPD组。本研究发现低蛋白加α酮酸饮食与单纯低蛋白饮食比较,能够延缓2型糖尿病小鼠肾损害进展,其作用与减轻肾组织的氧化应激状态有关,其效果要优于单纯低蛋白饮食。因此,低蛋白加α酮酸饮食可作为防治糖尿病肾病的措施之一。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 前言
• 参考文献
• 第一部分 α酮酸加低蛋白饮食对2型糖尿病小鼠KKAy的肾脏保护作用
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 α酮酸加低蛋白饮食对KKAY小鼠肾组织氧化应激水平的影响
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 全文小结
• 综述
• 在读期间完成和发表文章
• 致谢