尖锐湿疣中PAR-1、β-catenin的表达及研究

论文摘要

背景和目的:尖锐湿疣（condyloma acuminatum,CA）也称生殖器疣（Genital wart）,是最常见的性传播疾病之一,其潜伏期长、发病率及复发率均很高。尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒（Human Papilloma virus,HPV）感染所致的皮肤粘膜良性增生性疾病,引起尖锐湿疣的常见病毒型别为HPV 6、11、16、18型,其中16和18型又与宫颈癌的发生有密切相关,故日益受到人们的重视。临床上尖锐湿疣疣体生长速度快,理化方法治疗时极易出血,组织病理检查也发现角质形成细胞过度增殖,真皮毛细血管增多并伴有管腔扩张,我们推测CA中存在某些促细胞增殖和血管生成的因素。我们在前期实验中已经证实了多种与血管生长有关的因子如血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）和转化生长因子β1（Transforming growth factor beta,TGFβ1）等在CA中的过度表达,证实了CA中存在促血管生成的因素。蛋白酶激活受体（Protease-activated receptor 1,PAR-1）是一种G蛋白偶联受体,其功能逐渐引起人们的关注,已发现其有促进细胞增殖与血管生成作用,并有稳定VEGF mRNA的功能。Wnt/β-catenin是胚胎组织发育分化所必需的关键信号通路,我们前期实验证实了CA中存在wnt-1蛋白高表达,提示CA中存在wnt-1异常激活从而促进细胞不断增殖,β-连环素（β-catenin）是Wnt/β-catenin信号通路中关键的下游效应分子,明确其在CA中的作用十分重要。本研究用聚合酶链反应（Polymerase-chain reaction, PCR）检测了CA组织中HPV6/11、16/18型别,初步探讨HPV基因型与CA之间的相关性,同时对CA组织进行血管计数并检测PAR-1和β-catenin的表达情况,意在探讨它们在CA发生发展过程中的作用,为CA发病机制的进一步阐明提供新的思路。方法:对28例CA病变组织行常规组织病理切片和HE染色并对其进行血管计数,采用免疫组化法检测PAR-1和β-catenin蛋白的表达,用PCR法检测人乳头瘤病毒（HPV）型别,用RT-PCR法检测PAR-1 mRNA的表达情况,所有实验以17例正常包皮组织作为对照。结果:CA组织的血管数（20.81±9.09）比正常包皮组织（11.36±2.45）明显增多（t=5.192,P<0.001）。CA组织中PAR-1 mRNA平均表达水平（1.541±0.1280）显著高于正常包皮对照组（0.728±0.214,t=7.26,P<0.001）;CA皮损中PAR-1蛋白表达较正常人表皮中的表达显著增强（X2=16.218,P<0.001）,正常人表皮中仅在基底层弱阳性表达,而在CA皮损中PAR-1的表达为基底层至角质层下方。PAR-1蛋白表达跟血管数存在显著正相关（r=0.823,P<0.001）。β-catenin在正常组中的表达均定位于细胞膜,为正常表达,6例（21.4%）CA皮损为细胞膜表达缺失,呈胞质和/或胞核异常表达,其异常表达率显著高于正常组（X2=4.203,P<0.05）。PAR-1蛋白的阳性表达与β-catenin的异常表达存在正相关（P< 0.05,r=0.101）。28例CA皮损中均可检测出HPV DNA,其中HPV6/11型23例,HPV16/18型5例;而正常皮肤组织中HPV DNA均为阴性。HPV16/18的阳性表达与β-cat的异常表达存在高度正相关（P<0.001,r=0.893）。结论:CA主要是由HPV6/11型感染所致;PAR-1的过表达与β-catenin的异常表达参与CA的发病。PAR-1过表达和β-catenin的异常表达均可能与CA中的细胞增殖有关。PAR-1过表达还与CA的血管生成有关。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 病例报道
• 附录1: 略缩语中英语对照
• 附录2:在读期间发表的论文
• 致谢