CO2激光照射豚鼠耳蜗热生物学效应的研究

论文摘要

目的:研究出不同光斑直径、照射距离和功率的CO2激光照射耳蜗产生的热生物学效应,从而设计出CO2激光耳显微手术中最佳输出参数,并探索CO2激光照射后耳蜗HSP70表达情况和NOS表达情况与听力变化的关系,进一步探讨HSP70是否能在应激后对听觉功能有保护作用,NO在耳蜗中的神经生理学作用的研究。方法:48只红目豚鼠分4组（A、B、C和D）,每组12只,A、B、C组分别以功率为1、2、3W的CO2激光照射左耳耳蜗底周,D组采取同样手术但是不施行激光照射,作为对照组,术前及处死前分别行听性脑干反应（ABR）检查,分术后即刻和术后三周两批断头处死,应用扫描电镜技术观察耳蜗形态学变化。应用SABC免疫组化技术及图像分析技术,观察不同功率CO2激光照射耳蜗后iNOS和HSP70表达的情况。 结果:激光照射术后即刻A、B、C三组听阈较术前明显升高（A组P<0.05;B组P<0.05:C组P<0.01）,照射后三周A组听阈基本恢复（P>0.05）,B、C组听阈有所下降但仍高于术前（P<0.05）,D组听阈无明显变化（P>0.05）:照射后三周,扫描电镜观察A组内耳结构轻微改变,B组出现散在的外毛细胞静纤毛的倒伏,排列紊乱,C组出现外毛细胞静纤毛严重缺失、破坏和融合呈球状,D组内耳结构基本正常;术后即刻A、B、C三组耳蜗中Corti器和螺旋神经节iNOS表达较对照组明显增强（P<0.01）,术后三周A组iNOS表达与对照组无明显差异（P>0.05）,B和C

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 试剂和仪器
• 2.1.1 实验试剂
• 2.1.2 常用溶液的配制
• 2.1.3 实验仪器与设备
• 2.2 实验动物
• 2.3 激光照射的方法
• 2.4 ABR阈值的检测
• 2.5 扫描电镜检测豚鼠内耳超微结构
• 2.6 耳蜗石蜡切片的制备
• 2.7 免疫组织化学（SABC）方法检测iNOS
• 2.8 免疫组织化学（SABC）方法检测Hsp70
• 2.9 图象处理
• 2.10 统计学分析
• 3 结果
• 3.1 大体观察
• 3.2 ABR测听
• 3.3 扫描电镜观察
• 3.4 iNOS免疫组织化学方法检测结果
• 3.4.1 光镜观察结果
• 3.4.2 图象分析结果
• 3.5 Hsp70免疫组织化学方法检测结果
• 3.5.1 光镜观察结果
• 3.5.2 图象分析结果
• 3.6 豚鼠耳蜗iNOS阳性反应的平均灰度值与ABR阈值的关系
• 3.7 豚鼠耳蜗Hsp70阳性反应的平均灰度值与ABR阈值的关系
• 4 讨论
• 4.1 常用激光的种类和特点
• 4.2 激光对内耳超微结构的影响
• 4.3 激光对内耳神经生理学影响
• 4.3.1 iNOS在耳蜗中的表达及意义
• 4.3.2 Hsp70在耳蜗中的表达及意义
• 5 结论
• 6 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述和参考文献
• 附图