论文摘要
苎麻（Boehmeria nivea L.Gaud）是重要的韧皮纤维作物之一,在我国有悠久的栽培和加工历史。随着基因工程研究的越来越深入,苎麻基因工程特别是苎麻转基因技术也逐渐展开,苎麻离体再生体系的建立及优化愈显重要。本研究以苎麻优良品种“华苎4号”和“资兴麻”为材料,利用高效细胞分裂素氯吡苯脲（CPPU）进行苎麻离体再生研究,测定了不同CPPU对茎尖扩繁和愈伤组织诱导以及不定芽的分化的影响,测定了在不同CPPU浓度下形成的愈伤组织内源激素变化,对从茎段外植体形成的不同类型的愈伤组织进行了细胞学观察。主要研究结果如下：（1）在苎麻茎尖再生苗的扩繁应用上,与对照1.0 mg/L6-BA相比,CPPU是一种更高效的细胞分裂素,其最佳使用浓度对“华苎4号”和“资兴麻”分别为0.02、0.05 mg/L,最佳使用浓度为6-BA的五十分之一,其最高再生芽平均数为对照6-BA的2.6倍以上；在愈伤组织诱导和不定芽分化上,1.0 mg/L的CPPU最有利于华苎4号和资兴麻叶片愈伤的诱导和不定芽的分化,而“华苎4号”和“资兴麻”茎段的最佳再生浓度分别为0.2 mg/L和0.5 mg/L,与对照2.0mg/L6-BA相比,可见在竺麻再生应用上,CPPU生理活性是6-BA的4倍以上。0.2 mg/L～1.0 mg/L的CPPU有利于苎麻愈伤组织的形成和不定芽的分化。（2）在培养基中添加外源激素CPPU明显影响苎麻茎段外植体产生的愈伤组织中内源激素的含量和比例。随着外源CPPU浓度的增加,内源激素IAA、ABA、ZR含量升高,其中IAA、ABA升高到一定值后,含量趋于稳定,而ZR随着外源激素CPPU浓度升高含量增加。随着愈伤组织培养时间的延长,在不添加外源激素的情况下,内源激素整体含量下降；在添加外源激素的情况下,IAA和ZR的含量随着时间延长含量增加,ABA含量先增加后减少。结合研究结果1,可以推测,当苎麻愈伤组织中激素比例达到IAA/ZR=0.56和ABA/ZR=0.28时,此时外源激素CPPU浓度为0.5 mg／L,最有利于不定芽的分化。（3）通过对愈伤组织的徒手压片和石蜡切片观察,发现不定芽再生频率较高的愈伤组织表面有许多致密的细胞团,这些细胞团与周围形成生理隔离,细胞团内细胞比较规则,细胞质浓,细胞核大,线粒体大量存在。随着培养时间延长,可以清晰的看到芽原体出现。