论文摘要
目的:探讨中华眼镜蛇毒(Chinese Cobra Venom, CCV)的抗补体作用及其对大鼠肾缺血/再灌注(I/R)损伤的肾保护作用。为临床治疗急性肾衰竭提供新的依据。 方法:雄性 SD 大鼠 32 只,随机分为四组。Ⅰ、Ⅱ组在建立肾 I/R 模型基础上,分别于再灌注前 0.5h、12h 腹腔注射 0.1%的中华眼镜蛇毒(0.4mg/Kg);Ⅲ组制备肾 I/R 模型,腹腔注射等量生理盐水作病理对照;Ⅳ组为假手术组,仅麻醉开腹,但不阻断血流,作为正常对照。按设计时间点留取标本待检。应用苦味酸法和二乙酰一肟法分别测定大鼠缺血前、再灌注后 24h 的血肌酐和尿素氮值。用免疫比浊法测定再灌注后 0、0.5、2、24h 的血清补体 C3 水平,间接了解补体系统激活状态。HE 染色光镜下观察肾组织损伤形态学改变,并利用原位调亡法检测 TUNEL 阳性调亡细胞情况。 结果:①肾功能改变:缺血前各组肾功能均在正常范围,组间无明显差别。再灌注后 24h 的血肌酐和尿素氮值在Ⅱ组明显降低,与Ⅰ、Ⅲ组相比差异显著(P<0.05),但Ⅰ和Ⅲ组相比较无统计学意义(P>0.05);②补体 C3 改变:Ⅰ、Ⅲ组 C3 于再灌注 2h 明显下降,与各自再灌注 0h 值比较有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ组 C3 于再灌注 0h 显著降低,与其他组 0h 值比较均有意义(P<0.05);但与本组再灌注 2h 值比较无统计意义。③组织学改变:Ⅲ组病理损伤较重,以近端及皮髓交界处的肾小管上皮细胞变性、坏死为主,部分细胞核破裂,细胞浆浓缩,有蛋白管型,细胞水肿,坏死,上皮细胞脱落,肾小管管腔阻塞。间质有中性粒细胞浸润,基质轻度增生。Ⅰ组病变与Ⅲ组相近,而Ⅱ组病变明显减轻,肾小球、肾小管结构清晰,肾小管上皮细胞排列整齐,细胞变性、坏死及脱落减少,管腔规则。④细胞凋亡改变:在Ⅰ和Ⅲ组均可检察到明显细胞凋亡的发生, TUNEL 阳性细胞于Ⅲ组多达 28.80±7.54 个/HP,而在Ⅱ组其数量与上两组相比显著减少(P<0.05)。 结论:肾 I/R 可明显引起肾脏组织结构损伤和功能损害,而且补体系统的激活参与了这一损伤过程。用 CCV 预处理大鼠肾 I/R 模型,能够明显清除血清补体 C3,从而有效抑制补体介导的肾 I/R 损伤。
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