论文摘要
目的慢性胰腺炎是由于胆道疾病或酒精中毒等因素导致的胰腺实质进行性损害和纤维化,常伴钙化、假性囊肿及胰岛细胞减少或萎缩。其病理生理过程复杂,以胰腺内成纤维细胞和细胞外基质(ECM)在胰腺组织内过多沉积为其特征。传统的慢性胰腺炎胰腺纤维化指标是层粘连蛋白(LN)的含量升高及超氧化物歧化酶(SOD)活性降低。我们采用光度酶联免疫分析法(ELISA)检测SD大鼠胰腺正常组、慢性胰腺炎对照组、黄芪注射液干预小剂量组、黄芪注射液干预中剂量组、黄芪注射液干预大剂量组中的LN的含量及SOD的活性进行比较分析,观察大鼠慢性胰腺炎胰腺组织的病理学变化,以初步探讨黄芪注射液对慢性胰腺炎胰腺纤维化的治疗作用。方法SD大鼠随机方法等分成5组,每组10只,分别为正常组、对照组、低剂量黄芪注射液干预组(400mg/kg)、中剂量黄芪注射液干预组(800mg/kg)、大剂量黄芪注射液干预组(1600mg/kg)。除正常组外,其余4组大鼠术前禁食12h,胺碘酮(100mg/kg体重)腹腔注射麻醉,沿腹白线做正中切口,夹闭胰胆管近肝门端,通过恒流泵向十二指肠乳头注射2%TNBS乙醇磷酸盐缓冲液0.4ml,1h注完,关闭恒流泵后维持压力10min,以防药物回流,手术过程严格无菌操作。为防止大鼠脱水,每天皮下注射生理盐水2次,每次6ml,直至大鼠能自由饮水。术后禁食72h后给予常规饮食。于术后72h用不同剂量的黄芪肌肉注射至术后28天。所有观察对象抽取静脉血,分离血清,置于-20℃低温冰箱中备用。实验前将血清置室温复溶,转离心,取上清液进行测定。采用光度酶联免疫分析法(ELISA)检测胰腺正常组、对照组、干预组中的LN的含量。SOD试剂盒采用黄嘌呤氧化酶法测其总活力。用HE染色法观察慢性胰腺炎组织中纤维化的变化。结果对照组大鼠慢性胰腺炎胰腺组织明显病理变化。模型组大鼠造模4周后,可见胰腺间质炎性细胞浸润,管周纤维组织增生,胰管增生扩张,管周及胰腺小叶间和小叶内纤维化伴炎症细胞浸润,局部腺体萎缩坏死,腺泡空泡样变。黄芪注射液干预组较模型组纤维化程度明显减少。将五组大鼠胰腺组织病理切片进行纤维化评分,发现模型组大鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化程度远远高于干预照组慢性胰腺炎胰腺纤维化,有显著差异。SD大鼠正常组与对照组比较,对照组发生明显的胰腺纤维化,LN的含量明显升高,SOD活性明显降低。黄芪注射液干预组中胰腺纤维化程度减轻,黄芪注射液小中大剂量干预组均使LN含量降低,SOD活性显著升高。结论黄芪注射液具有抗大鼠慢性胰腺炎胰腺组织纤维化的作用。通过黄芪注射液对大鼠慢性胰腺炎纤维化的治疗,从病理变化上可明显观察到慢性胰腺炎胰腺组织纤维化程度降低,同时慢性胰腺炎血清中的LN含量明显降低,SOD的活性显著提高。
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