本文主要研究内容
作者彭宏燕（2019）在《赤霉素处理条件下枇杷内源激素含量测定和Aux/IAA基因表达初步分析》一文中研究指出：三倍体枇杷由于配子母细胞减数分裂异常,难以形成正常的花粉,造成花粉败育而不能正常授粉受精,所以三倍体自然结实率极低,施用外源赤霉素（Gibberellins,GAs）后坐果率显著提高。已有研究表明,生长素（Auxin）是促进果实坐果和生长发育的重要内源激素之一,主要作用是促进细胞分裂。生长素/吲哚乙酸蛋白（auxin/indoleacetis acids proteins,Aux/IAAs）是生长素精确反馈调节的关键环节。为了从生理和分子水平探讨外源GA3诱导枇杷坐果过程中生长素信号转导途径的变化,本研究测定了GA3处理后子房壁厚度、内源吲哚-3-乙酸（indole-3-acetic acaid,IAA）含量以及生长素原初响应基因表达等指标的动态变化,旨在为三倍体无籽枇杷坐果机制研究提供理论参考。本试验以三倍体枇杷A322无性繁殖株系为研究对象,以清水处理为对照,分析了坐果期外源GA3处理后三倍体枇杷坐果率、子房壁厚度、子房和其他部分6种内源激素含量等形态学和生理指标的变化。同时,以前期转录组测序结果为依据,克隆了6个Aux/IAA家族基因的cDNA片段:IAA6,IAA8,IAA9,IAA10,IAA11和IAA20,进一步分析了这6个基因在三倍体枇杷坐果期的表达情况,主要研究结果如下:1.外源GA3处理后,三倍体枇杷坐果率显著提高,平均坐果率为43.32%,而对照组坐果率仅为1.9%。坐果期形态学观察发现,GA3处理7 d后萼片开始闭合,并在处理21 d后完全闭合。石蜡切片发现坐果期子房及周围组织细胞没有明显变化,通过测量坐果期子房壁厚度发现在坐果期子房壁未明显增厚,说明此时细胞分裂和膨大都很缓慢,处于幼果滞长期。通过测量坐果期胚珠纵横径发现处理组和对照组胚珠都没有继续发育。2.外源GA3处理后,子房内源IAA含量明显高于其它部分,并在处理后第3d和第5 d出现了两个高峰,推测其含量升高可能与外源GA3处理有关,高浓度的IAA替代受精作用从而启动枇杷坐果。对于脱落酸（Abscisic acid,ABA）含量变化而言,GA3处理后,子房中内源ABA含量整体较低;对照组（清水处理）在处理21 d后出现一个高峰,与落花时间一致。此外,枇杷坐果过程中玉米素（Zeatin,ZT）的含量无论是在子房还是在其他部分比另外五种激素高,推测内源ZT可能与枇杷坐果有关。3.基于转录组组装序列分析结果设计引物进行cDNA序列克隆,得到的IAA6与苹果MdIAA6（HM122447.1）相似性为93%;IAA8与苹果MdIAA8（NM001294015.1）相似性为97%;IAA9与苹果MdIAA9（NM001293892.1）相似性为93%;IAA10与苹果MdIAA10（HM122440.1）相似性为90%;IAA11与苹果MdIAA11（NM001293857.1）相似性为97%;IAA20与苹果MdIAA20（NM001293857）相似性为95%,其序列特征与预期结果一致。4.荧光定量PCR分析发现,GA3处理后6个基因的表达量都有明显变化,IAA6,IAA8,IAA10在子房中的表达量明显高于其它部分;IAA9在子房和其它部分的表达量相当,IAA11和IAA20在子房中的表达量低于其它部分。此外,在相同发育时期,外源GA3处理后子房中IAA9的表达量与内源IAA含量变化趋势一致,推测内源IAA含量升高,诱导IAA9表达上调,从而诱导枇杷果实坐果。子房中,IAA8在GA3处理3 d后表达量开始升高,并显著高于对照组,推测其功能可能与IAA9相似。
Abstract
san bei ti pi pa you yu pei zi mu xi bao jian shu fen lie yi chang ,nan yi xing cheng zheng chang de hua fen ,zao cheng hua fen bai yo er bu neng zheng chang shou fen shou jing ,suo yi san bei ti zi ran jie shi lv ji di ,shi yong wai yuan chi mei su （Gibberellins,GAs）hou zuo guo lv xian zhe di gao 。yi you yan jiu biao ming ,sheng chang su （Auxin）shi cu jin guo shi zuo guo he sheng chang fa yo de chong yao nei yuan ji su zhi yi ,zhu yao zuo yong shi cu jin xi bao fen lie 。sheng chang su /yin duo yi suan dan bai （auxin/indoleacetis acids proteins,Aux/IAAs）shi sheng chang su jing que fan kui diao jie de guan jian huan jie 。wei le cong sheng li he fen zi shui ping tan tao wai yuan GA3you dao pi pa zuo guo guo cheng zhong sheng chang su xin hao zhuai dao tu jing de bian hua ,ben yan jiu ce ding le GA3chu li hou zi fang bi hou du 、nei yuan yin duo -3-yi suan （indole-3-acetic acaid,IAA）han liang yi ji sheng chang su yuan chu xiang ying ji yin biao da deng zhi biao de dong tai bian hua ,zhi zai wei san bei ti mo zi pi pa zuo guo ji zhi yan jiu di gong li lun can kao 。ben shi yan yi san bei ti pi pa A322mo xing fan shi zhu ji wei yan jiu dui xiang ,yi qing shui chu li wei dui zhao ,fen xi le zuo guo ji wai yuan GA3chu li hou san bei ti pi pa zuo guo lv 、zi fang bi hou du 、zi fang he ji ta bu fen 6chong nei yuan ji su han liang deng xing tai xue he sheng li zhi biao de bian hua 。tong shi ,yi qian ji zhuai lu zu ce xu jie guo wei yi ju ,ke long le 6ge Aux/IAAjia zu ji yin de cDNApian duan :IAA6,IAA8,IAA9,IAA10,IAA11he IAA20,jin yi bu fen xi le zhe 6ge ji yin zai san bei ti pi pa zuo guo ji de biao da qing kuang ,zhu yao yan jiu jie guo ru xia :1.wai yuan GA3chu li hou ,san bei ti pi pa zuo guo lv xian zhe di gao ,ping jun zuo guo lv wei 43.32%,er dui zhao zu zuo guo lv jin wei 1.9%。zuo guo ji xing tai xue guan cha fa xian ,GA3chu li 7 dhou e pian kai shi bi ge ,bing zai chu li 21 dhou wan quan bi ge 。dan la qie pian fa xian zuo guo ji zi fang ji zhou wei zu zhi xi bao mei you ming xian bian hua ,tong guo ce liang zuo guo ji zi fang bi hou du fa xian zai zuo guo ji zi fang bi wei ming xian zeng hou ,shui ming ci shi xi bao fen lie he peng da dou hen huan man ,chu yu you guo zhi chang ji 。tong guo ce liang zuo guo ji pei zhu zong heng jing fa xian chu li zu he dui zhao zu pei zhu dou mei you ji xu fa yo 。2.wai yuan GA3chu li hou ,zi fang nei yuan IAAhan liang ming xian gao yu ji ta bu fen ,bing zai chu li hou di 3dhe di 5 dchu xian le liang ge gao feng ,tui ce ji han liang sheng gao ke neng yu wai yuan GA3chu li you guan ,gao nong du de IAAti dai shou jing zuo yong cong er qi dong pi pa zuo guo 。dui yu tuo la suan （Abscisic acid,ABA）han liang bian hua er yan ,GA3chu li hou ,zi fang zhong nei yuan ABAhan liang zheng ti jiao di ;dui zhao zu （qing shui chu li ）zai chu li 21 dhou chu xian yi ge gao feng ,yu la hua shi jian yi zhi 。ci wai ,pi pa zuo guo guo cheng zhong yu mi su （Zeatin,ZT）de han liang mo lun shi zai zi fang hai shi zai ji ta bu fen bi ling wai wu chong ji su gao ,tui ce nei yuan ZTke neng yu pi pa zuo guo you guan 。3.ji yu zhuai lu zu zu zhuang xu lie fen xi jie guo she ji yin wu jin hang cDNAxu lie ke long ,de dao de IAA6yu ping guo MdIAA6（HM122447.1）xiang shi xing wei 93%;IAA8yu ping guo MdIAA8（NM001294015.1）xiang shi xing wei 97%;IAA9yu ping guo MdIAA9（NM001293892.1）xiang shi xing wei 93%;IAA10yu ping guo MdIAA10（HM122440.1）xiang shi xing wei 90%;IAA11yu ping guo MdIAA11（NM001293857.1）xiang shi xing wei 97%;IAA20yu ping guo MdIAA20（NM001293857）xiang shi xing wei 95%,ji xu lie te zheng yu yu ji jie guo yi zhi 。4.ying guang ding liang PCRfen xi fa xian ,GA3chu li hou 6ge ji yin de biao da liang dou you ming xian bian hua ,IAA6,IAA8,IAA10zai zi fang zhong de biao da liang ming xian gao yu ji ta bu fen ;IAA9zai zi fang he ji ta bu fen de biao da liang xiang dang ,IAA11he IAA20zai zi fang zhong de biao da liang di yu ji ta bu fen 。ci wai ,zai xiang tong fa yo shi ji ,wai yuan GA3chu li hou zi fang zhong IAA9de biao da liang yu nei yuan IAAhan liang bian hua qu shi yi zhi ,tui ce nei yuan IAAhan liang sheng gao ,you dao IAA9biao da shang diao ,cong er you dao pi pa guo shi zuo guo 。zi fang zhong ,IAA8zai GA3chu li 3 dhou biao da liang kai shi sheng gao ,bing xian zhe gao yu dui zhao zu ,tui ce ji gong neng ke neng yu IAA9xiang shi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自西南大学的彭宏燕，发表于刊物西南大学2019-09-24论文，是一篇关于枇杷论文,赤霉素论文,果实坐果论文,生长素论文,基因家族论文,西南大学2019-09-24论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自西南大学2019-09-24论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。