毛木耳单孢杂交及遗传分析

论文摘要

为选育出毛木耳优质的新品种,本研究采用单孢杂交育种法,以亲缘关系较远、农艺性状具有互补性的褐色菌株黄耳10和AU2,白色菌株APW822三个菌株为亲本,从所选亲本的单孢菌株中,选择菌丝生长健壮而浓密、交配型因子可以配对形成锁状联合的单孢菌株,进行配对杂交选育毛木耳新品种,主要研究结果如下:1、筛选亲本菌株以四川省农科院土肥所保存的菌株为筛选亲本菌株的基础材料,通过对13个菌株ITS序列分析,建立系统发育树,并结合DNA指纹图谱统计分析,建立基于ISSR相似系数的聚类图谱,最后筛选出亲缘关系较远、农艺性状具有互补性的3个毛木耳亲本菌株,即黄耳10、AU2和APW822。2、毛木耳极性研究目前多数研究表明毛木耳的极性是四极性异宗结合,但早期一些学者认为毛木耳的极性是二极性异宗结合,针对这种现象,本研究采用三轮配对法对3个毛木耳亲本单孢菌株进行极性分析,并分离3个毛木耳亲本菌株的单核原生质体,将每个亲本两种交配型的单核原生质体区分开来,并测出其交配型。将上述结果进行适合性x2测验,测验结果显示其中两株亲本菌株的交配型的实际菌株数符合其理论菌株数,可认为毛木耳的交配类型是四极性异宗结合。3、杂交种遗传分析本实验通过对杂交种进行拮抗实验、测定菌丝生长速度、出耳实验及建立基于ISSR相似系数的聚类图谱发现:（1）黄耳10号与AU2共配对180对, 80株杂交种出耳,其中11株杂交种的出耳产量高于主栽品种黄耳10号,黄耳10号与APW822共配对90对,21个杂交种出耳,只有1株的出耳产量高于主栽品种黄耳10号。黄耳10和AU2配对杂交种的品质优于黄耳10和APW822配对杂交种的品质;（2）杂交种AU55菌丝浓密、产量高、抗病强、耳片形态特征介于两亲本之间且与其他杂交种的亲缘关系较远,是一个品质较好的菌株;（3）菌株菌丝的生长速度和浓密程度与菌株的产量基本是正相关的,但又不是绝对的;（4）杂交种组织分离种的遗传稳定高于其多孢分离种的遗传稳定性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 综述
• 1 毛木耳概述
• 1.1 毛木耳的分类学地位及价值
• 1.2 毛木耳的形态特征及生物学特性
• 1.3 毛木耳的资源分布及栽培现状
• 1.4 毛木耳的国内外研究现状及产业开发前景
• 2 食用菌的交配系统
• 2.1 同宗配合
• 2.2 异宗配合
• 3 原生质体单核化技术在食用菌研究中的应用
• 4 木耳属育种研究概况
• 4.1 选择育种
• 4.2 杂交育种
• 4.3 诱变育种
• 4.4 原生质体融合育种
• 4.5 基因工程育种
• 5 食用菌的拮抗反应
• 6 DNA 分子标记在木耳属真菌研究中的应用
• 6.1 木耳属研究中常用的分子标记
• 6.2 DNA 分子标记的局限性及应用前景
• 7 本研究的目的和意义
• 第二章 毛木耳菌株分子鉴定与遗传差异分析
• 1 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 培养基
• 1.3 试剂与仪器
• 1.4 菌丝培养
• 1.5 DNA 提取
• 1.6 ITS 分析
• 1.7 ISSR 分析
• 1.8 亲本的拮抗试验
• 2 结果与分析
• 2.1 ITS 分析
• 2.2 ISSR 分析
• 2.3 选择杂交亲本
• 2.4 亲本间的拮抗实验
• 3 讨论
• 第三章 毛木耳的极性分析
• 1 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 培养基与试剂
• 1.3 试剂与仪器
• 1.4 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 亲本单孢菌株的交配型测定结果
• 2.2 亲本原生质体单核化菌株的交配型测定
• 2.3 亲本交配型的分析
• 2.4 筛选配对的单孢
• 3 讨论
• 第四章 毛木耳杂交种的遗传分析
• 1 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 培养基
• 1.3 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 杂交种与亲本间的拮抗实验
• 2.2 杂交种及亲本的菌丝生长速度测定结果及方差分析
• 2.3 杂交种及亲本出耳产量及方差分析
• 2.4 杂交种及亲本的农艺性状分析
• 2.5 杂交种及亲本的ISSR 聚类分析
• 3 讨论
• 第五章 毛木耳杂交种及其组织分离种和F2 代的遗传差异分析
• 1 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 培养基、试剂与仪器
• 1.3 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 拮抗实验
• 2.2 ISSR 聚类分析
• 3 讨论
• 第六章 总结
• 1 毛木耳菌株系统发育与遗传差异分析
• 2 毛木耳的极性分析
• 3 毛木耳杂交种的遗传分析
• 4 毛木耳杂交种及其组织分离种和F2 代的遗传差异分析
• 5 进一步的工作
• 参考文献
• 附录
• 致谢