论文摘要
目的:应用大鼠脑缺血再灌注模型和细胞缺氧复氧模型,研究JAK-STAT信号转导相关基因表达变化及药物的作用。方法:线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,体外培养小鼠脑微血管内皮细胞株制备缺氧复氧模型,用Superhrray公司的信号转导发现者基因芯片和JAK-STAT信号途径基因芯片来分析模型组和对照组基因表达的差异,并通过实时定量PCR方法对其中部分基因进行验证。采用实时定量PCR方法分析药物对细胞缺氧复氧后STAT2、STAT5A、STAT5B、STAT6、SOCS4、PIAS2、PIAS3和PIAS4表达的影响。结果:大鼠脑缺血2h再灌注24h缺血侧海马与正常侧比较,结果发现Jak-Stat信号转导通路和NF-κB信号转导通路表达上调,Jak-Stat信号转导通路相关基因上调的有STAT2、STAT5A、STAT5B和STAT6,下调的有JAK3;受体中上调的有MC-SF-R、Fcgr1、IFNAR1、IL-2Rg,下调的有EGFR和IFNAR2;核因子及与STAT相互作用的因子中上调的有Mcmd5、Ncoa1、NF-κB1、Sfpi1、Sp1、Stub1,下调的有c-JUN、Smad5、c-src、Stain;STAT诱导表达的基因中上调的有Tnfrsf6（Fas）、Maf;JAK-STAT转导途径的副调控因子中上调的有PIAS2、Pias3、Pias4、Socs4,经实时定量PCR方法验证,STAT2、STAT5A、STAT5B、STAT6、SOCS4、PIAS2、PIAS3和PIAS4与芯片结果一致。小鼠脑微血管内皮细胞株缺氧4h复氧18h后与正常组比较,Jak-Stat信号转导通路相关基因上调的有JAK1、Jak2、Tyk2、STAT1、STAT2、STAT4、STATSA、STAT5B和STAT6;受体中上调的有prolactin受体、IL-2Rg,下调的有IL-4R;核因子及与STAT相互作用的因子中上调的有Mcmd5、Ncoa1、NF-κb1、Sfpi1、Sp1、Stub1,下调的有Smad4;STAT诱导表达的基因中上调的有Tnfrsf6（Fas）、Maf、MMP3;JAK-STAT转导途径的副调控因子中上调的有PIAS2、Pias3、Pias4、Socs4。经实时定量PCR方法验证,与在体实验相同的8种基因结果与芯片结果一致。在体与细胞模型JAK-STAT信号转导相关基因比较,大部分基因的变化是一致的。细胞缺氧复氧模型中己酮可可碱中剂量可以刺激STAT2、STAT5A、STAT6、PIAS2、PIAS3的表达,而
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