论文题目: 弓形虫ROP2基因在大肠杆菌和卡介苗中的表达及免疫原性的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 预防兽医学
作者: 王洪法
导师: 张西臣
关键词: 弓形虫,重组卡介苗,免疫保护
文献来源: 吉林大学
发表年度: 2005
论文摘要: 弓形虫(Toxoplasma gondii)为专性细胞内寄生原虫,全球分布,能引起人兽共患的弓形虫病,由于弓形虫生活史复杂,传播途径多样,对弓形虫病的治疗,特别是消灭弓形虫的包囊,迄今尚未有效的药物。因此弓形虫病疫苗的研究已成为弓形虫病防治工作的重点。ROP2 蛋白为弓形虫生活史各期均分泌的抗原,具有高度的保守性和免疫反应性,已成为弓形虫病疫苗研究的候选分子。为了探讨重组卡介苗对弓形虫感染的免疫保护作用,进行了以下研究:1.ROP2 基因在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析;2.分别构建了大肠杆菌-卡介苗穿梭表达载体pMV262-ROP2 和整合表达载体pOIP23H-ROP2,转化的重组卡介苗可诱导表达ROP2 重组蛋白。3.动物免疫保护试验,将重组卡介苗分别经静脉注射和口服两种免疫途径免疫BALB/c 小鼠,脾脏单个核细胞培养上清IFN-γ、IL-2 及CD4+、CD8+T 细胞较对照组都有不同程度的提高,与对照组比较差异显著,体现了Th1 型细胞免疫的特征。重组卡介苗(rBCG:pMV262-ROP2)静脉途径免疫的小鼠较对照组生存时间延长(p<0.05)。本研究为研制高效的弓形虫基因重组卡介苗疫苗奠定了基础。
论文目录:
前言
第一篇 文献综述
第一章 弓形虫疫苗研究进展
1 利用弱毒及减毒株作为疫苗
2 天然蛋白抗原疫苗及基因重组疫苗
3 核酸疫苗
4 乳酸菌口服疫苗
5 弓形虫植物疫苗
6 重组卡介苗疫苗
7 结语
第二章 重组卡介苗研究进展
1 rBCG 的构建
1.1 染色体外穿梭载体
1.2 染色体整合载体
1.3 第三代穿梭载体
1.4 我国重组卡介苗研究现状
2 rBCG 的表达
2.1 寄生虫抗原
2.2 病毒抗原
2.3 细菌抗原
2.4 细胞因子
2.5 分枝杆菌
3 既往BCG接种对未来rBCG接种的影响
4 重组 BCG 疫苗的作用机制
5 结语
第三章 BCG 与免疫
1 卡介苗接种的分子生物学
2 卡介苗接种的细胞微生物学
3 卡介苗可激活机体的非特异性免疫(天然免疫)
4 卡介苗可激活特异性免疫
第二篇 研究内容
第一章 弓形虫棒状体基因ROP2 在大肠杆菌中的表达及反应原性研究
1 材料
2 方法
3 结果
4 讨论
5 小结
第二章 pMV262-ROP2 穿梭表达载体的构建及在rBCG 中的表达
1 材料
2 方法
3 结果
4 讨论
5 小结
第三章 pOIP23H-ROP2 整合穿梭载体的构建及其在 BCG 中的表达
1 材料
2 方法
3 结果
4 讨论
5 小结
第四章 重组卡介苗对弓形虫的免疫保护试验
1 材料
2 方法
3 结果
4 讨论
5 小结
结论
参考文献
中文摘要
英文摘要
致谢
导师及作者简介
发布时间: 2005-08-26
参考文献
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