骨发生形态蛋白-2对胆碱能神经元发育的影响

骨发生形态蛋白-2对胆碱能神经元发育的影响

论文摘要

胆碱能神经元作为一种重要的功能神经元广泛的存在于中枢神经系统中,其具有不同的形态特征,行使着多种功能。它直接参与人类的学习、记忆、运动、睡眠等生理活动,同时又是临床上多种中枢神经系统退行性疾病的靶细胞。目前,临床上试图应用神经干细胞移植的方法来治疗此类疾病。但是,最棘手的问题是获得的神经干细胞不能全部定向分化为所需的胆碱能神经元,以至于所得到的胆碱能神经元的数量远远不足以起到治疗的作用。因此要解决与胆碱能神经元相关的中枢神经系统疾病,还是首先要从根本上掌握其发生发育和调节机制。因为它不但是探索疾病治疗途经的基础也是理解中枢神经系统功能的基础。若要研究影响胆碱能神经元发生发育过程的细胞外因子就要首先了解胆碱能神经元的发育情况。乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)是胆碱能神经元合成神经递质乙酰胆碱的限速酶,作为胆碱能神经元的标志性蛋白,可以显示其表达区域也可以追踪胆碱能神经元的发生、迁移及其最后的分布。在小鼠胚胎12 天(E12)胆碱能神经元前体细胞开始出现,主要位于端脑脑室的腹侧。E13.5 天,ChAT 阳性细胞存在于所有脑室的生发区。E 14 天出现于侧脑室背外侧及第三脑室的腹背侧部。E 15 天胆碱能神经元除在上述区域继续发育外,还出现在侧脑室内侧,背侧和腹侧壁。上述胆碱能神经元在发育端脑中的分布都是受到一定信息的引导,使其获得特定的时空发育命运。那么这种发育的命运是如何获得的呢?这是我们要研究的主要问题。在中枢神经系统发育中,细胞外因子和细胞内同源域蛋白共同参与了对细胞命运的决定,胆碱能神经元的发生也同样遵循这一规律。细胞外因子为神经元前体细胞向特定的神经元分化提供所需的信息,若要了

论文目录

  • 第一章 引言
  • 1.1 端脑胆碱能神经元的发育及其分布
  • 1.2 BMPs 在端脑发育中的作用
  • 1.2.1 BMPs 在端脑早期发育中的作用及其表达分布
  • 1.2.2 BMPs 对端脑背侧神经元分化的作用
  • 第二章 实验材料及方法
  • 2.1 主要试剂
  • 2.2 主要仪器
  • 2.3 实验动物
  • 2.4 动物取材及标本制备
  • 2.5 实验方法
  • 2.5.1 Vimentin/ChAT 免疫组化双重染色
  • 2.5.2 ChAT 流式细胞术
  • 2.5.3 E14 大鼠端脑背侧细胞原代培养
  • 2.5.4 培养液乙酰胆碱酯酶水平测定
  • 2.5.5 ChAT 免疫荧光细胞化学染色
  • 第三章 结果
  • 3.1 E14 大鼠端脑背侧脑室区放射状胶质细胞表达乙酰胆碱转移酶
  • 3.2 E12 大鼠端脑细胞表达乙酰胆碱转移酶
  • 3.3 体外培养的E14 大鼠端脑背侧细胞的形态观察
  • 3.4 E14 大鼠端脑背侧原代培养细胞中有乙酰胆碱转移酶的表达
  • 3.5 BMP-2 使幼稚胆碱能神经元合成乙酰胆碱酯酶的能力增强
  • 第四章 讨论
  • 4.1 放射状胶质细胞向特定神经元分化
  • 4.2 BMP-2 在胆碱能神经元发育中的作用
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 附图表
  • 中 文 摘 要
  • Abstract
  • 导师及作者简介
  • 致 谢
  • 相关论文文献

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