肿瘤细胞“重叠生长”成因初探

论文摘要

肿瘤细胞最主要的恶性特征是增殖生长失控和具有浸润转移能力,这两者均与肿瘤细胞的非接触抑制性生长行为有关。目前认为肿瘤细胞的非接触抑制性生长行为有二种表现形式,即在体情况下,肿瘤组织内部细胞呈无序堆积,边界区肿瘤细胞向周围正常组织呈扩张、浸润性生长;离体培养时肿瘤细胞增殖活跃极易长成多层重叠状。重叠生长的实质是肿瘤细胞不平衡的生长和迁移等细胞社会行为失调的结果,对其形成原因的研究和剖析将有助于更好了解肿瘤细胞非接触抑制生长的形成过程及其过程机制。目的以肿瘤细胞不平衡的生长和迁移行为为切入点,研究肿瘤细胞群体社会行为障碍的表现形式及其形成动因。方法运用显微形态学观察、计算机图象处理技术和统计学分析,以及细胞力学和生物化学捡测等研究手段,对肝癌细胞“重叠生长”的局部成因进行了实验研究:(1)对肝癌细胞重叠生长层形成过程进行连续观察;(2)对“重叠生长”层的结构进行解剖;(3)对肝癌细胞和正常肝细胞的运动变形能力及粘附特性进行比较观测。结果(1)肝癌细胞变形调节能力较正常肝细胞强,肝癌细胞生长灶呈对称扩大,且在生长灶中央区域可见片状“重叠斑”分布;(2)对“重叠生长”斑进行负压吸吮时,斑片从基底脱落,其下方未见铺展细胞;(3)“重叠生长”区的圆细胞粘附力明显低于铺展细胞;Fn裱衬基底后,细胞粘附力和形态稳定性增高,圆细胞产生及聚集减少;(6)在低密度时,圆细胞形变运动能力较低,铺展细胞形变运动频繁,在“重叠斑”内圆细胞聚集团位置改变频繁;(7)对生长灶圆斑拉伸后,铺展细胞出现向圆斑中心运动的趋势。结论(1)所谓“重叠生长层”实际上是由大量圆细胞堆积排列构成;(2)圆细胞产生与肿瘤细胞粘附稳定性下降相关;(3)肝癌细胞“重叠层”的形成与铺展细胞和圆细胞运动变形能力、粘附特性不同造成的细胞区域化分布相关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 绪论
• 1.1 问题的提出及研究意义
• 1.1.1 问题的提出
• 1.1.2 研究意义
• 1.2 国内外研究现状
• 1.2.1 肿瘤细胞恶性增殖特征
• 1.2.2 肿瘤细胞迁移运动特征
• 1.2.3 肿瘤细胞骨架结构与细胞力学行为
• 1.3 研究目的和研究内容
• 1.3.1 研究目的
• 1.3.2 研究内容
• 1.4 技术路线
• 2 肝癌细胞“重叠生长层”形成过程连续观察
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料、试剂和仪器设备
• 2.2.1 实验仪器与设备
• 2.2.2 实验材料
• 2.2.3 主要试剂的配制
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 细胞培养方法
• 2.3.2 显微形态学观察
• 2.3.3 细胞形状变化几何参数分析
• 2.3.4 细胞运动迁移行为表征
• 2.4 试验结果
• 2.4.1 肿瘤细胞集落的动态变化
• 2.5 讨论
• 3 “重叠生长”层的结构解剖
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料、试剂和仪器设备
• 3.2.1 实验仪器与设备
• 3.2.2 实验材料
• 3.2.3 主要试剂的配制
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 细胞培养方法
• 3.3.2 微管吸吮试验
• 3.3.3 静态拉伸试验
• 3.4 试验结果
• 3.4.1 微管吸允实验技术对“重叠斑”细胞层解剖
• 3.4.2 肿瘤圆细胞和铺展细胞粘附力比较
• 3.4.3 静态拉伸对“重叠斑”的影响
• 3.5 讨论与分析
• 4 肝癌细胞粘附特性与“重叠层”形成相关性
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料、试剂和仪器设备
• 4.2.1 实验仪器与设备
• 4.2.2 实验材料
• 4.2.3 主要试剂的配制
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 细胞培养方法
• 4.3.2 基底裱衬方法
• 4.3.3 显微形态学观察
• 4.3.4 细胞形状变化几何参数分析
• 4.3.5 细胞运动迁移行为表征
• 4.4 实验结果
• 4.4.1 正常肝细胞与肝癌细胞运动和形变能力比较结果
• 4.4.2 裱衬前后肝癌细胞与正常肝细胞的运动能力比较
• 4.5 讨论与分析
• 5 圆细胞和铺展细胞运动变形能力比较
• 5.1 引言
• 5.2 实验材料、试剂和仪器设备
• 5.2.1 实验仪器与设备
• 5.2.2 实验材料
• 5.2.3 主要试剂的配制
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 细胞培养方法
• 5.3.2 显微形态学观察
• 5.3.3 细胞运动迁移行为表征
• 5.3.4 静态拉伸试验
• 5.4 实验结果
• 5.4.1 低密度时铺展细胞与圆形细胞迁移净距离比较
• 5.4.2 高密度时铺展细胞与圆形细胞迁移净距离比较
• 5.4.3 对生长灶圆斑静态拉伸试验
• 5.4.4 对圆细胞和铺展细胞形变能力的测定
• 5.5 讨论与分析
• 6 结论和展望
• 6.1 结论
• 6.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 硕士期间发表论文