论文摘要
目的前胸腺素α是一种存在于所有哺乳动物组织中并且高度保守的天然无结构、强酸性小分子蛋白质,具有重要的生物学功能。β族胸腺素是一种刺激细胞运动的物质。它在多种肿瘤组织中表达明显升高,其表达上调与转移潜在性正相关。国内外对于前胸腺素α和β族胸腺素在膀胱癌中的表达及相关性的研究甚少。本次实验就是通过免疫组织化学方法来研究前胸腺素α和β族胸腺素在膀胱癌中的表达,并对其在膀胱癌的诊断和治疗中的意义进行展望。对象和方法1.材料实验标本选用天津医科大学第二附属医院1995年4月至2001年4月手术切除的86例膀胱粘膜组织存档蜡块,并经病理证实。2.临床及病理资料患者术前均未行放疗、化疗与免疫治疗。其中膀胱移行细胞癌76例,男56例,女20例;年龄35-86岁,平均54.8岁。按照WHO膀胱肿瘤组织学分类标准(1999)分级:G124例,G228例,G324例;TNM分期:Ta-126例;T2-450例。正常膀胱粘膜10例,均为前列腺增生开放性手术时留取,均为男性,年龄48-72岁,平均58.4岁。2组间年龄(F=3.72)、性别(F=2.63)差异无统计学意义。3.主要试剂胸腺素β4、胸腺素β10、胸腺素β15、前胸腺素α和CD34的兔抗人多克隆抗体(一抗),购自天津润泰科技发展有限公司。4.方法免疫组织化学染色,采用SABC法检测了76例膀胱移行细胞癌组织及10例正常膀胱粘膜的Tβ4、Tβ10、Tβ15、ProTα和CD34蛋白表达,并计数微血管密度。用PBS代替一抗作阴性对照。结果判定:细胞浆中出现棕黄色为阳性显色,用染色强度和阳性细胞指数进行综合判定。5.统计与分析采用SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计处理,三组样本以上计量资料用方差分析,多样本均数间的多重比较用Dunnett-t检验,计量资料用Pearson相关分析,计数资料用卡方检验分析。以P<0.05为差异有显著性。检验水准:双侧α=0.05。结果1.76例膀胱移行细胞癌组织中:Tβ4、Tβ10、Tβ15和ProTα蛋白表达阳性物质呈棕黄色细颗粒状,主要定位于膀胱癌癌细胞和膀胱粘膜上皮细胞胞浆,也见于脉管内皮细胞及间质细胞。全部的76例膀胱移行细胞癌组织,Tβ4、Tβ10、Tβ15和ProTα高表达率分别为88.2%(67/76)、28.9%(22/76)、76.3%(58/76)和86.8%(66/76)。10例正常膀胱粘膜组织中均无表达或低表达。2.Tβ4、Tβ15和ProTα在膀胱癌组织的高表达率与膀胱癌的分期分级有明显相关性,Tβ10只与膀胱癌的分期有相关性。ProTα在复发的膀胱癌和未复发的膀胱癌两者间差异有意义(p<0.05)。Tβ4、Tβ10、Tβ15和ProTα的蛋白表达,在膀胱移行细胞癌组织年龄、性别和肿瘤数目上均差异无意义(p>0.05)。3.膀胱癌组织内微血管在同一肿瘤内也存在分布与数量的差异,其中肿瘤边缘组显著高于肿瘤中心组和肿瘤浅表组(P<0.05)。76例膀胱癌总的微血管密度显著高于正常膀胱微血管密度(P<0.05),且肿瘤边缘区微血管密度均值与正常膀胱比较相差非常显著(P<0.05)。微血管密度与膀胱癌的分期分级和复发呈正相关(p<0.05)。4.血管内皮细胞Tβ10、Tβ15的蛋白表达在正常膀胱组织和膀胱癌组织中都呈低表达或无表达,提示Tβ10、Tβ15无促进膀胱癌边缘血管生成的作用。血管内皮细胞中Tβ4与ProTα阳性的膀胱癌中,其微血管密度较阴性组显著增加,尤以癌组织边缘区微血管密度增加更为显著。结论1.Tβ4、Tβ15和ProTα蛋白表达与膀胱癌的TNM分期分级正相关:2.膀胱癌微血管密度与膀胱癌TNM分期分级和复发呈正相关:3.ProTα蛋白表达与膀胱癌的复发正相关,Tβ4、Tβ10和Tβ15与膀胱癌的复发无关。4.Tβ4与ProTα蛋白在直接促进膀胱肿瘤细胞增殖转移的同时,也可能通过促进肿瘤周围血管新生的方式进一步促进肿瘤细胞增殖转移。
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