HIF-1α与TfR mRNA在脑白质软化动物模型中的表达及相关性研究

论文摘要

【目的】建立新生4天SD大鼠脑室周围白质软化模型（periventricular lerkomalacia,PVL）。在构建PVL模型大鼠的条件下，研究HIF-1α对TfR mRNA表达的调节，为缺氧缺血脑病发生机制与脑铁代谢之间关系的研究提供实验基础依据。【方法】1．4日龄新生SD大鼠通过随机数字表随机分为两组：PVL组和对照组；PVL组采用分离结扎双侧颈总动脉并予缺氧的方法建立脑室周围白质软化新生大鼠动物模型；对照组仅分离双侧颈总动脉，不予结扎及缺氧。采用HE染色法观察脑组织病理学改变，Western blot法检测MBP蛋白表达，实验动物生长发育及神经行为学等方法对动物模型进行评价。2．设立（1）对照＋HIF-1α组（2）对照＋空白组（3）PVL＋抗HIF-1α组（4）PVL＋PBS组；及（1）对照＋PBS组（2）对照＋抗HIF-1α组（3）PVL＋PBS组（4）PVL＋抗HIF-1α组；以Western blot技术测HIF-1α表达，以Real-time PCR技术测TfR mRNA的表达。【结果】1．对4日龄新生SD大鼠进行双侧颈总动脉结扎并予以缺氧后，模型组与对照组大鼠相比，模型组大鼠生长缓慢（P<0.01），睁眼时间延迟（21.67±1.19dVS15.54±1.60d），悬崖逃避能力及双臂悬吊能力均降低，差异有统计学意义（P＜0.001）。在水迷宫实验中，模型组大鼠在水中寻找站台的游泳速度减慢、寻找站台的所用的时间延长、撤去平台后在平台所在象限停留时间缩短（P＜0.05）。2．脑组织HE染色，模型组术后24小时、48小时可见弥散性皮质下和脑室周白质疏松水肿。3．Western blot法显示，HI1周后模型组MBP表达量较对照组降低，差异具有统计学意义。4．对照＋PBS组与PVL＋PBS组对比，Western blot法检测后者HIF-1α蛋白表达增加，Real-time PCR检测TfR mRNA的表达也增加，差异有统计学意义。5．对照＋HIF-1α组与对照＋空白组对比，Western blot法检测前者HIF-1α表达增多，Real-time PCR检测TfR mRNA的表达也增多，差异有统计学意义。6．PVL＋抗HIF-1α组与PVL＋PBS组对比，Western blot法检测后者HIF-1α表达增多，Real-time PCR检测TfR mRNA的表达也增多，差异有统计学意义。【结论】1．通过对4日龄新生SD大鼠进行双侧颈总动脉结扎联合缺氧的方法，可建立与人类早产儿脑室周围白质软化病理相似的PVL动物模型。2．缺氧缺血PVL可见HIF-1α表达增多，TfR mRNA的表达也增多；3．PVL模型中，抑制脑组织中HIF-1α的活性，TfR mRNA表达量随之减少，增加HIF-1α的表达，TfR mRNA表达量随之增加。即可推断HIF-1α可诱导TfR mRNA表达增加。4．TfR mRNA表达的增加，可能是脑缺氧缺血后铁代谢失衡的一个机制。由于脑铁代谢的复杂性，HIF-1α与TfR的作用机制需进一步研究。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 脑室周围白质软化模型的建立
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 第二部分 HIF-1α与TfR mRNA在脑白质软化动物模型中的表达及相关性
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 英文缩略词表
• 致谢
• 综述
• 参考文献