论文摘要
胶原蛋白酶(collagenase)简称胶原酶,是可用于脊椎介入治疗椎间盘(intervertebral disc,IVD)源性疼痛的关键药物。在影像设备引导下,该药可被准确注射到IVD组织突出物周围并使其溶解,从而有效解除其对脊神经的压迫,达到解除或缓解疼痛的目的。 目的 1.构建椎间盘组织与细胞的体外培养系统。2.初步探讨不同浓度胶原酶对人工培养的IVD组织和细胞的形态学影响。3.通过湿重称量和活细胞计数来探讨胶原酶对IVD组织的溶解。 材料与方法:实验一 构建椎间盘组织与细胞体外培养系统 将人变性间盘组织或家兔正常间盘组织在无菌状态下剪切,置于含DMEM高糖培养基、20%胎牛血清及转化生长因子(TGF—β)培养液中培养。每三天换液。分别在各个时段观察其形态学变化。实验二 观察胶原酶对体外培养IVD组织及细胞的形态学影响。第一部分:随机获取18例颈IVD突出症患者手术切除的变性IVD组织。参照实验一行体外培养。随机分为实验组①、②和对照组,每组6例。实验组①、②分别加入200U/ml及400U/ml胶原酶200μl,对照组加等量生理盐水。在相差倒置显微镜观察各组24小时、48小时、1周时的形态学变化。第二部分:随机选取实验用家兔24只。处死后获取IVD组织。参照实验一行体外培养,待形成的单层细胞可传代后随机分为实验组①、②、③和对照组,每组6例。实验组①、②、③分别加入200U/ml、400U/ml、800U/ml
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