胎猪皮肤前体组织异种移植的实验研究

论文摘要

皮肤是身体最大的器官,它兼负着机械防护、免疫调节、物质代谢及体温调节等功能。局部皮肤的严重损伤可通过自体全厚皮、游离皮瓣及带蒂皮瓣移植重建其完整的结构与功能;但临床大面积烧、创伤患者由于自体皮源严重不足,大张异体皮加盖自体微粒皮虽然能够较快地封闭创面,挽救患者生命,但是往往遗留大量瘢痕,愈合后的皮肤组织机械强度和弹性远不及正常皮肤,严重影响患者的愈后生活质量。近年有研究发现特定胎龄的猪胚胎前体组织/器官（肝、肾、胰、脾等）异种移植后既能够生长发育成为相应的成熟组织（或器官）又不形成畸胎瘤,且能发挥一定的生理功能。胎猪皮肤前体组织是否也具有这种特性呢?为解决大面积烧、创伤后创面覆盖材料来源及创面愈合质量等问题,本课题主要围绕胎猪皮肤前体组织移植裸鼠后的生长发育问题,应用简便有效的胎猪皮肤前体组织异种移植模型,观察了五个不同胎龄的胎猪皮肤前体组织移植裸鼠后的创面愈合特点及新生组织的形态结构,评价了不同胎龄的胎猪皮肤前体组织的移植后生长潜能及成瘤性,探讨胚胎皮肤前体组织移植后的生长发育及其可能的机理。全文主要结果及结论如下:1、本课题采用精确胎龄为56天的胎猪皮肤前体组织对3种不同的移植模型进行了对比,观测移植后的生长特性。研究结果表明,裸鼠背部全层缺损创面加盖异种皮移植胎猪皮肤前体组织微粒的方式是简便有效的移植模型。①背部创面移植模型:裸鼠背部正中开创至肌膜上,创面植入胎猪皮肤前体组织微粒悬液,用人尸体皮覆盖、缝合;②背部皮下移植模型:裸鼠背部正中横向切口至肌筋膜上,植入小块邮票皮,缝合切口;③耳廓皮下移植模型:裸鼠双耳廓皮下穿刺行胎猪皮肤前体组织微粒移植;背部创面模型及耳廓皮下模型新生组织块大小采用双样本t检验。3种模型中移植的胎猪皮肤前体组织均能继续生长发育成为具有表皮及真皮结构的双层皮肤组织,其中背部创面移植模型及背部皮下移植模型观察到了汗腺,皮脂腺及毛囊等附件,耳廓皮下移植模型未见汗腺;背部创面移植模型的生长潜能远高于耳廓皮下移植模型的生长潜能。2、系统筛选了用于异种移植的胎猪皮肤前体组织的最佳“妊娠时间窗”（gestational window,以下简称时间窗）。选取了5个精确胎龄（E35、E42、E56、E70、E91）的胎猪皮肤前体组织,采用背部创面移植模型,观察移植后创面的愈合情况,于移植后6周及12周取材检测新生皮肤组织的结构形态,评价成瘤性。直接免疫荧光及黑色素染色鉴定新生组织的种属来源。移植后12周的新生组织块大小采用单因素方差分析,比较其移植后的生长潜能。研究结果认为胎猪皮肤前体组织异种移植后能够继续生长发育成为结构“完整”的成熟皮肤,且其最佳的取材时间窗在胎龄56天左右。①各胎龄的胎猪皮肤前体组织移植均能生长发育为具有表皮、真皮及毛发、皮脂腺及汗腺等附件的“完整”成熟皮肤组织;②E42的胎猪皮肤前体组织具有最大的生长能力（新生组织平均大小为47.1 mm2,L×W）,E56为31.1 mm2,E35为18.4 mm2,E70为20.1 mm2,E91为6.5 mm2;③抗鼠的H-2Dd（FITC）免疫荧光及Fortana法黑色素染色鉴定新生组织的种属来源。④新生的皮肤组织大部分胶原纤维排列规则,表皮钉突明显。⑤E56及以后的胎猪皮肤前体组织异种移植后未发现形成畸胎瘤。[结论] E56的胎猪皮肤前体组织具有良好的移植后器官发育成力、生长能力及安全性;胎猪皮肤前体组织异种移植的最佳“妊娠时间窗”在胎龄56天左右。

论文目录

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• 论文正文 胎猪皮肤前体组织异种移植的实验研究
• 前言
• 第一部分 胎猪皮肤前体组织——鼠异种移植模型的确定
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论
• 第二部分 异种移植胎猪皮肤前体组织的最佳“妊娠时间窗”
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论
• 全文总结
• 致谢
• 参考文献
• 文献综述 异种移植——现状与未来
• 参考文献
• 学习期间参与撰写的学术论文及专利
• 英文论著