论文摘要
本课题研究的目的是在实验室前期研究的基础上考察肽聚糖缓释微球的免疫调节作用以及对铜绿假单胞菌感染小鼠的免疫保护效果,为该免疫增强剂的开发与应用提供前期工作基础。利用乳化交联法制备肽聚糖微球,该缓释微球的载药量（46.41±0.829）g/100g,包封率为（82.80±1.74）%。傅立叶红外光谱（FT-IR）分析微球的结构变化结果表明肽聚糖被包埋在壳聚糖微球内部。肽聚糖缓释微球对小鼠免疫效果的评价。200只昆明清洁级小鼠随机分为四组：（1）对照组灌胃0.9%无菌生理盐水0.2mL/只；（2）肽聚糖组灌胃肽聚糖2mg/只；（3）壳聚糖组灌胃壳聚糖空白微球3mg/只；（4）肽聚糖-壳聚糖缓释微球组灌胃肽聚糖-壳聚糖复合微球5mg/只；每隔24h灌胃一次,连续灌胃7d。分别在第3d,7d,14d,21d进行眼球取血,运用流式细胞法测定外周血及脾脏T淋巴细胞亚群；采用间接ELISA测定小鼠外周血中免疫球蛋白IgA、IgG和IgM的动态变化；同时监测小鼠的临床行为和脏器指数。结果显示：肽聚糖缓释微球组免疫器官绝对重量和指数均高于对照组。说明肽聚糖缓释微球能够增强机体对特异性抗原的免疫功能,提高免疫器官的生长功能。经检测小鼠外周血和脾脏T淋巴细胞中CD3+、CD4+、CD3+CD4+结果表明,肽聚糖-壳聚糖缓释微球组与空白组相比有较显著提高。说明肽聚糖微球能够增强机体免疫的能力,提高T淋巴细胞亚群的数量。肽聚糖-壳聚糖复合微球组在第14d时小鼠IgG含量有明显提高,在第21d时变化显著（p<0.01）。肽聚糖微球组在第21d,28d感染铜绿假单胞菌时,存活率分别为50%,60%,与空白组相比有显著差异。本课题研究将为口服肽聚糖的理化性质及生理活性提供理论依据,对肽聚糖作为免疫增强剂的研究与开发具有重要意义。
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中文摘要Abstract第1章 前言1.1 植物乳杆菌简介1.1.1 植物乳杆菌及其代谢产物的生理功能1.1.2 免疫调节作用1.1.3 降低血清胆固醇含量及预防心血管疾病1.1.4 对致病菌的拮抗作用1.2 肽聚糖作为免疫增强剂的研究现状1.2.1 肽聚糖免疫识别蛋白研究进展1.2.2 肽聚糖作为免疫增强剂的研究进展1.2.3 肽聚糖的应用前景与展望1.3 开发肽聚糖缓释制剂的必要性1.4 本实验室的前期研究工作基础1.5 本课题研究的目的意义第2章 植物乳杆菌细胞壁肽聚糖微球的研制2.1 实验材料2.1.1 菌种2.1.2 培养基2.1.3 实验试剂2.1.4 实验仪器2.2 肽聚糖-壳聚糖缓释微球制备方法2.3 肽聚糖-壳聚糖缓释微球结构表征及物理性能检测2.3.1 缓释微球扫描电镜观察2.3.2 红外光谱分析（FTIR）2.3.3 肽聚糖-壳聚糖缓释微球载药量和包封率检测2.4 结果与讨论2.4.1 扫描电镜观察微球形态2.4.2 傅立叶红外光谱分析（FTIR）2.4.3 载药量包封率2.5 本章小结第3章 肽聚糖-壳聚糖缓释微球对小鼠免疫功能的影响3.1 实验材料3.1.1 实验动物3.1.2 实验材料及试剂3.1.3 实验仪器和设备3.2 试验方法3.2.1 动物分组及饲养管理3.2.2 小鼠免疫器官重量的测定3.2.3 外周血T淋巴细胞亚群的测定3.2.4 脾脏T淋巴细胞亚群的测定3.2.5 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的测定3.2.6 数据处理3.3 结果与分析3.3.1 小鼠免疫器官重量的测定3.3.2 外周血T淋巴细胞亚群的测定3.3.3 脾脏T淋巴细胞亚群的测定3.3.4 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的测定3.4 讨论3.4.1 小鼠免疫器官重量的测定3.4.2 T淋巴细胞亚群的测定3.4.3 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的测定第4章 肽聚糖-壳聚糖缓释微球对铜绿假单胞菌感染小鼠的保护效果研究4.1 实验材料4.1.1 实验动物4.1.2 实验材料及试剂4.1.3 实验仪器和设备4.2 试验方法4.2.1 环磷酰胺致小鼠免疫低下模型的建立4.2.2 缓释微球对感染铜绿假单胞菌小鼠免疫保护效果评价4.3 实验结果与讨论4.3.1 环磷酰胺致小鼠免疫低下模型的建立4.3.2 不同时间给予铜绿假单胞菌后小鼠存活率的比较4.4 本章小结第5章 结论第6章 本论文的主要创新点及展望6.1 创新点6.2 展望参考文献致谢攻读学位期间发表的学术论文
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