健脾疏肝解毒方对小鼠肝癌淋巴转移及MMP-9、VEGF表达影响的研究

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目的:观察健脾疏肝解毒方对肝癌H22小鼠癌细胞侵袭和淋巴转移的影响,探讨其作用机理,以期为临床运用健脾疏肝解毒方治疗肝癌特别是晚期肝癌和防止肝癌术后放化疗后复发转移提供客观的依据。方法:SPF级雄性昆明小鼠48只,体重18±2g,以肝癌H22细胞建立小鼠肝癌淋巴道转移模型。称重后随机分为:模型对照组,中药高、低剂量组,环磷酰胺（CTX）组和中药高、低剂量分别加CTX组,每组8只。分组后第2天,CTX给药4d,中药连续21d灌胃,模型组予等量生理盐水。实验结束后第2天,各组小鼠颈椎脱臼处死,称取瘤体、脾脏、胸腺及一侧腘窝、骼动脉旁和肾门淋巴结。计算抑瘤率,淋巴结指数,脾指数,胸腺指数。HE染色,光镜下观察淋巴结转移程度。运用免疫组化法检测局部瘤组织MMP-9的表达水平。运用RT-PCR技术,测定肝癌组织中VEGF的mRNA的表达,以探讨健脾疏肝解毒方对肝癌淋巴转移的作用及机制。结果:健脾疏肝解毒方对小鼠H22肝癌及淋巴转移灶有显著的抑制作用,并能提高CTX对两者的抑制率,与对照组相比有显著性差异（P＜0.05）;另外,健脾疏肝解毒方能显著提高荷瘤小鼠的免疫功能,其中中药高剂量组的作用效果最为显著,与对照组相比差异显著（P＜0.05）。健脾疏肝解毒方能降低肝癌组织VEGF mRNA的表达量,同时也能降低MMP-9蛋白的表达量,其中中药高剂量组的作用效果最为显著,与对照组相比有明显差异（P＜0.05）;尤其是健脾疏肝解毒方联合CTX组与单纯的CTX组及模型组差异有均有统计学意义（P＜0.05）。结论:健脾疏肝解毒方能明显抑制小鼠H22肝癌,以及小鼠H22肝癌的淋巴转移,与化疗药合用有协同增效作用;其作用机制可能与降低肝癌组织VEGF,MMP-9的表达有关;并且健脾疏肝解毒方对H22肝癌小鼠的免疫功能也有显著的增强作用。

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前言

1 黏附与肿瘤转移

2 降解与肿瘤转移

3 血管生成与肿瘤转移

4 基因调控与肿瘤转移

1 健脾疏肝解毒方对小鼠H22肝癌的抑制作用

1.1 实验材料

1.2 实验方法

1.3 结果

2 健脾疏肝解毒方与CTX合用对小鼠肝癌的抑瘤增效作用

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 实验结果

3 健脾疏肝解毒方对H22肝癌小鼠淋巴指数和免疫功能的影响

3.1 实验材料

3.2 实验方法

3.3 实验结果

4 健脾疏肝解毒方对H22肝癌小鼠淋巴转移灶及淋巴组织病理形态的影响

4.1 实验材料

4.2 实验方法

4.3 实验结果

5 健脾疏肝解毒方对小鼠H22肝癌组织MMP-9表达的影响

5.1 实验材料

5.2 实验方法

5.3 实验结果

6 健脾疏肝解毒方对小鼠H22肝癌组织VEGF mRNA表达的影响

6.1 实验材料

6.2 实验方法

6.3 实验结果

7 讨论

7.1 传统中医对肝癌转移的认识

7.2 中医对肝癌转移的防治

7.3 健脾疏肝解毒方的组方依据

7.4 主要药物现代药理研究

7.5 动物模型评价

7.6 健脾疏肝解毒方抑制小鼠H22肝癌及淋巴转移的机理

7.7 健脾疏肝解毒方对H22肝癌小鼠免疫功能的影响

8 结论

参考文献

附图

主要缩略语中英文对照表

附录

致谢

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