论文摘要
基于山楂叶总黄酮（HLF）大鼠肠道吸收动力学考察结果,以体外释放度为指标,优化处方制得日服2次的HLF缓释片;以总牡荆素为指标成分考察Beagle犬单剂量口服缓释片后的药代动力学特征。1.HLF大鼠肠道吸收特性研究离体翻转肠囊法和在体单向灌流法考察HLF大鼠肠吸收特性。HLF在大鼠各肠段吸收良好;离体试验表明HLF在十二指肠、空肠、回肠和结肠中的表观渗透系数(Papp)分别为（1.32±0.41）×10-5、（1.62±0.27）×10-5、（1.51±0.34）×10-5和（0.92±0.11）×10-5cm/sec;在体试验表明HLF在十二指肠、空肠、回肠和结肠中的有效渗透系数(Peff)分别为（4.25±0.47）×10-5、（2.33±0.27）×10-5、（2.80±0.72）×10-5和（2.91±0.97）×10-5cm/sec;HLF吸收具有浓度依赖性,可能受某种Na+依赖性分泌蛋白和多药耐药蛋白2（Multidrug resistance-associated protein 2,MRP2）外排作用的影响。2.HLF缓释片的制备及体外释药机理研究紫外分光光度法测定缓释片HLF含量和体外释放度;建立水解测定HLF中总牡荆素含量的HPLC方法;以HLF体外释放度为指标,经单因素考察和预试验筛选得较优处方及制备工艺,按选定处方制得三批样品,测定含量和释放度;考察HLF缓释片中总牡荆素的释放行为,作为体内外相关性考察依据。结果:所得缓释片均一性和重现性较好,体外释放符合缓释制剂设计要求;各时间点总牡荆素累积释放量均大于HLF,表明牡荆素及其糖苷属于HLF中水溶性较好的一类成分。建立HLF缓释片的质量标准。本品为棕黄色至棕色片;本品2、6、10 h的释放量应分别为标示量的20～40%、50～85%、75%以上:本品含HLF应为标示量的90～110%。初步研究缓释片体外释药机理。各释药模型拟合结果表明Weibull方程拟合度最高（r=0.9731）,表明其能较好地描述缓释片释药行为;Ritger-Peppas方程拟合度也较大,释放特征参数n=0.7601,介于0.45～0.89之间,表明药物释放为药物扩散和骨架溶蚀协同作用:Harland方程分析结果表明药物释放过程中90%以上的药物通过扩散机制释放。3.HLF缓释片Beagle犬体内药代动力学研究及体内外相关性评价建立水解测定Beagle犬血浆中总牡荆素含量的HPLC法。方法学研究表明该方法在0.2～10μg·ml-1浓度范围内线性良好,低、中、高三种浓度提取回收率均大于80%,日内、日间RSD均小于5%,符合生物样品检测要求。以HLF普通片为参比制剂,研究HLF缓释片在Beagle犬体内药代动力学。单剂量分别给予Beagle犬受试制剂和参比制剂后总牡荆素药时曲线下面积AUC0-t分别为253.05±73.69 ng·h·ml-1和213.21±75.19 ng·h·ml-1;AUC0-∞分别为423.90±1156.35 ng·h·ml-1与442.09±1156.76 ng·h·ml-1;达峰时间Tmax分别为2.71±0.71 h和0.58±0.49 h;峰浓度Cmax分别为43.09±9.92 ng·ml-1和66.89±35.35ng·ml-1;t1/2分别为4.52±2.99 h和5.12±2.29 h;MRT分别为2.49±0.93 h和1.29±0.46h。经配对t检验,受试制剂的MRT和Tmax较参比制剂显著延长（P＜0.05）,表明两制剂在吸收速度方面生物不等效:HLF缓释片相对生物利用度为97.94±18.85%,在80～125%的生物等效范围内,表明两制剂在吸收程度方面生物等效。体内外相关性研究表明HLF缓释片体外累积释放百分率与Beagle犬体内药物吸收分数之间相关性较好,线性相关系数r=0.981（P＜0.02）,表明体外释放度可为HLF缓释片内在质量控制提供有效保证。