VKORC1-1639A/G、CYP2C9基因多态性与瓣膜置换术后患者华法林用量关系的临床研究

论文摘要

研究背景:华法林是在人工机械瓣膜置换术后病人中常用的口服抗凝药物,在达到同样的抗凝效果的下,华法林其药物剂量在不同个体间有近20倍的差距。因个体差异的因素导致因药物引起的不良药物反应很多。为了减少华法林抗凝治疗并发症,通过药物基因组学的研究,对服药个体的基因进行分析,在口服药物之前对药物与个体进行分析,明确药物的功效,代谢过程,毒副作用,可以使个体与药物的人-药功效达到最佳的效果。目前上述研究结果表明CYP2C9酶作为华法林代谢酶,和VKOR酶作为华法林的功效酶的编码基因CYP2C9和VKORC1-1639A/G基因多态性的因素可以部分解释华法林口服剂量个体差异。国内尤其在中国西南地区上述两种基因型的分布还无文献报道。本课题通过对中国西南地区汉族人心脏机械瓣膜置换术后达到抗凝稳定状态后VKORC1-1639A/G及CYP2C9基因多态性的筛选,与患者口服华法林剂量、稳态华法林血药浓度的关系进行分析探讨中国西南地区人口CYP2C9及VKORC1-1639A/G遗传多态性等因素对华法林剂量的影响。临床资料和方法:1.收集第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心100例中国重庆地区心脏瓣膜置换手术后华法林治疗达到抗凝稳态的患者临床资料,分析患者性别、年龄、病因、手术类型、手术方式、术后心律及CYP2C9及VKORC1-1639A/G遗传多态性对抗凝稳态患者口服华法林剂量的影响。2.应用HPLC法测定100名中国重庆地区心脏瓣膜置换手术后华法林治疗达到抗凝稳态的患者血浆中华法林血药浓度,并探讨心脏瓣膜置换术后患者华法林血药浓度与抗凝疗效的关系。2.应用聚合酶链式反应（PCR）-限制性片断长度多态分析（RFLP）的方法,对上述患者CYP2C9及VKORC1-1639A/G遗传多态性分布情况进行分析,及上述基因多态性与抗凝稳态患者华法林维持剂量及血药浓度个体间差别的关系。结果:1.100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝稳态病人中,患者口服华法林维持剂量平均值为（2.68±1.04mg/d）;60岁以上（2.14±0.60mg/d）患者平均日剂量比60岁以下者低（p <0.05）;术后房颤心律组比窦性心律组相华法林口服剂量多（p <0.05）;不同性别（p >0.05）、不同手术方式（p >0.05）与华法林维持剂量无明显不同。2.通过HPLC法对术后抗凝治疗病人血浆华法林血药浓度的检测,华法林血药浓度平均值在（845.48±388.16ng/ ml）。不同年龄、手术方式、性别间的华法林血药浓度无差别（p>0. 05）,房颤心律组与窦性心律组相比组间的血药浓度无差异（p>0. 05）。3. 100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝稳态病人中,VKORC1-1639A/G基因多态性共筛选到2种等位基因: VKORC1-1639A和VKORC1– 1639G。VKORC1 - 1639A/ G基因多态性共检测到3种基因型,以VKORC1- 1639AA基因型常见,共86例,占86%,其次为VKORC1-1639AG型,共12例,占12%,VKORC1-1639A/G型共2例,占2%。在达到稳定抗凝指标后, VKORC1-1639AA组华法林平均剂量（n=86; 2.41±0.75 mg/d）,VKORC1 - 1639AG组华法林平均剂量（n=12;3.99±0.48 mg/d）,VKORC1-1639GG组华法林平均剂量（n=2;6.56±0.44 mg/d）间有差别（p<0.01）,VKORC1-1639GG组华法林平均剂量比其他两组华法林剂量高（p<0.01）。4. 100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝治疗病人,共筛选到2种等位基因CYP2C9*1与CYP2C9*3,未发现CYP2C9*2型等位基因。以CYP2C9*1/*1基因型常见,共95例,占95%,其次为CYP2C9*1/*1基因型,共5例,占5%。在达到稳定抗凝指标INR后, CYP2C9*1/*3杂合体组（n=5;1640.95±287.89ng/ml）血浆稳态华法林浓度比CYP2C9*1/*1纯合体组（n=95;805.50±329.77ng/ml）明显增高（p<0.01）。5.100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝治疗病人中,基因型为VKORC1-1639AA/ CYP2C9*1/*1型,共82例,其平均华法林平均剂量为（2.43±0.70 mg/d）,平均血浆稳态华法林浓度为（777.72±311.31 ng/ml）;其次为VKORC1-1639AG/CYP2C9*1/*1型,共12例,其平均华法林平均剂量为（4.10±0.48 mg/d）,平均血浆稳态华法林浓度为（985.86±416.24 ng/ml）;而VKORC1-1639AA/ CYP2C9*1/*3型,4例,其平均华法林平均剂量为（1.61±0.66 mg/d）,平均血浆稳态华法林浓度为（1323.43±155.55 ng/ml）;VKORC1- 1639GG/CYP2C9*1/*1型及VKORC1-1639GG/ CYP2C9*1/*3型分别仅有1例,其平均华法林平均剂量分别为（6.25±0.00mg/d）及（6.88±0.00mg/d）,平均血浆稳态华法林浓度分别为（919.95±0.00ng/ml）及（2731.02±0.00ng/ml）,不同组间华法林口服剂量及血药浓度有差别（p<0.01）。结论:1.100例重庆地区汉族人工机械瓣膜置换术后抗凝稳态病人中,患者口服华法林维持剂量平均值为（2.68±1.04mg/d）。60岁以上患者平均日维持剂量比60岁以下患者低;房颤心律组比窦性心律组需要较多的华法林维持剂量;华法林剂量与性别、手术方式无相关。2.VKORC1-1639A/G基因多态性的不同与中国重庆地区汉族人中华法林抗凝药物剂量的个体间差异有关。华法林维持剂量在VKORC1-1639AA型患者（2.41±0.75mg/d）、VKORC1-1639AG型患者（3.99±0.48 mg/d）及VKORC1-1639GG型患者（6.56±0.44 mg/d）中呈递增状态,组间剂量相差很明显。3.CYP2C9基因多态性与抗凝稳态华法林血药浓度的个体间差异性有很大的相关性。CYP2C9*1/*3型患者（1640.95±287.89ng/ml）稳态华法林血药浓度明显高于CYP2C9*1/*1型患者（805.50±329.77ng/ml）。4.对CYP2C9及VKORC1-1639A/G遗传多态性同时筛选可以用于区分抗凝治疗安全组（基因型为VKORC1-1639AA/CYP2C9*1/*1 ）和危险组（基因型为VKORC1-1639AG/CYP2C9*1/*1,VKORC1-1639GG/CYP2C9*1/*3,VKORC1-1639AA/ CYP2C9*1/*3及VKORC1-1639GG/CYP2C9*1/*1）患者,起到对华法林治疗的预见性用药,减少抗凝治疗的诱导期及避免出现抗凝并发症的作用。在收录的病人资料中VKORC1- 1639AA/CYP2C9*1/*3型患者需要较少的华法林维持剂量即可达到较高的血药浓度,易出现出血并发症,是属于出血危险组;VKORC1-1639AG/CYP2C9*1/*1,VKORC1-1639GG/CYP2C9*1/*3及VKORC1-1639GG/ CYP2C9*1/*1型患者需要较多的华法林维持剂量却仅仅达到较低的血药浓度,易出现栓塞倾向,是属于栓塞危险组。

论文目录

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• 论文正文 VKORC1-1639A/ G、CYP2C9 基因多态性与瓣膜置换术后患者华法林用量关系的临床研究
• 前言
• 第一部分 重庆地区人工机械瓣膜置换术后病人华法林抗凝稳态分析
• 资料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第二部分 高效液相色谱法（HPLC）测定重庆地区人工机械瓣膜置换术后患者血浆中华法林浓度
• 对象及方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第三部分 重庆地区机械瓣膜置换术后病人 VKORC1-1639A/ G、CYP2C9遗传基因多态性与华法林剂量调整的临床研究
• 对象及方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 全文结论
• 致谢
• 文献综述 华法林抗凝维持剂量与其药物基因组学的研究进展
• 参考文献
• 研究生期间发表论文