论文摘要
石榴果实营养丰富,花期长,是经济林和园林绿化的优选树种。石榴果皮、根皮可以入药,石榴叶能制成石榴保健茶。国际上已有35家研究机构建立了一个或多个核心种质库,涉及大田作物和园艺植物63种。迄今,关于石榴核心种质的研究,国内外尚未见报道。中国石榴核心种质的构建,对中国石榴种质资源的保存、研究和利用具有重要意义。ISSR分子标记技术是研究植物遗传多样性的有力工具,能够直接从DNA水平上反映各材料间的遗传差别,方法简便快捷。根据中国石榴135份总体种质的14个植物学、农艺学性状,采用Popgen Version 1.31软件,分析总体种质、初级核心种质以及8个不同产区石榴种质资源的遗传多样性。用SPSS 11.0 for Windows软件,以欧氏距离平方（Squared Euclidean distance）为系数,采用组间连接法（between-groupslinkage）,对总体种质进行系统聚类（Hi erarchical cluster）,采取系统取样和随机取样法,构建石榴不同比例的初级核心种质。对不同产区初级核心种质、总体种质的香浓信息指数以及总体和初级核心种质性状的Nei基因多样性进行差异显著性测验。分别以30%、20%、15%、10%的选取比例从石榴135份总体种质中选取41份、27份、20份、14份资源类型构成初级核心种质。计算不同取样比例的初级核心种质和总体种质性状的符合率,并用F检验来检测不同取样比例构建初级核心种质的效果。试验结果表明,135份总体种质的观察位点数是2～6、有效等位基因位点数为1.211～4.084、Nei基因多样性系数0.174～0.755、香浓信息指数0.317～1.511。初级核心种质和总体种质遗传多样性t检验未达到显著水平。说明构建的核心种质能够代表全部种质资源的遗传多样性。按30%的取样比例构建的初级核心种质和总体种质14个性状均值、极差、标准差和变异系数的平均符合率分别为0.956、0.957、0.950、0.958,20%的平均符合率为0.956、0.944、0.920、0.910,15%的平均符合率为0.953、0.927、0.893、0.892而10%的平均符合率为0.923、0.888、0.897、0.868。差异显著性检验结果表明,20%的取样比例为石榴初级核心种质构建适宜取样比例。试验以中国石榴45份代表资源为材料,运用优化的ISSR分子标记体系对其亲缘关系进行研究。从45条ISSR引物中筛选出重复性好、条带清楚的引物17条,对45份代表资源进行ISSR-PCR扩增,采用Popgen Version 1.31软件,分析扩增条带的多态性位点数及多态性频率。用SPSS 11.0 for Windows软件,以欧氏距离平方为系数,采用组间连接法,对45份代表资源进行聚类分析。结果表明,17条引物共扩增出187条谱带,其中多态性条带157条,平均每个引物11条,多态性条带达到84%。聚类分析结果显示,取遗传距离阀值为19时,45份代表资源聚为4类,第1类主要是安徽和山东栽培的品种,第2类中的3个亚类是按照果实风味、花色、皮色、籽粒颜色、核软硬度等分类。说明中国石榴栽培品种有较复杂的遗传背景。分类结果与传统形态学分类不完全一致。