论文题目: 小麦抗条锈病基因YrSp的分子标记研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 植物病理学
作者: 王丽娟
导师: 牛永春
关键词: 小麦,条锈病,抗病基因,分子标记
文献来源: 中国农业科学院
发表年度: 2005
论文摘要: 我国小麦条锈病危害普遍而严重,培育和应用抗病品种是防治小麦条锈病最经济、安全、有效的方法。由于条锈病菌的高度变异性以及生产品种中抗条锈基因较为单一,品种抗病性“丧失”成为小麦条锈病防治中的突出问题。小麦品种Spaldings Prolific是欧洲小麦条锈菌鉴别寄主,其所具有的抗条锈病基因YrSp具有较好的抗性,可抗当前我国大多数小麦条锈菌生理小种,但在我国小麦育种中还很少应用。因此,开展抗条锈病基因YrSp的分子标记研究,将促进YrSp基因在小麦抗锈育种中的应用,并有助于实现多基因聚合育种,对于逐步实现小麦生产品种抗病基因多样化具有重要意义。 本研究采用AFLP分析方法,以小麦抗条锈病基因YrSp的供体亲本Spaldings Prolific、近等基因系YrSp/6 x Avocet S、轮回亲本Avocet S及由Avocet S和YrSp/6 x Avocet S杂交制备的F2代分离群体为材料,开展了小麦抗条锈病基因YrSp的分子标记研究,取得了如下主要结果: 1.采用225对AFLP引物组合,对Spaldings Prolific、YrSp/6 x Avocet S、Avocet S三组材料进行分析,发现12条稳定出现的多态性DNA片段。经用10株感病F2代单株和10株抗病F2代单株进行遗传连锁性初步检测,确定了分别由4条引物扩增的P34M54421、P70M62171、P70M62170、P32M59208、P32M59163、P36M53164共6条多态性片段与YrSp基因有连锁性。 2.将多态性片段P34M54421、P70M62171、P70M62170、P32M59208、P32M59163、P36M53164分别进行克隆、测序,并根据序列设计特异性引物。将其中的P34M54421、P32M59208、P36M53164成功转化成了SCAR标记,即SC-P34M54378、SC-P32M59147和SC-P36M5399。 3.用208株Avocet S和YrSp/6 x Avocet S杂交制备的F2代分离群体,对获得的3个SCAR标记和YrSp的SSR标记Xwmc441之间的遗传关系进行了检验。用MAPMAKER 3.0b软件计算各个标记与目的基因间及各个标记间的遗传距离及相互关系,绘出了4个标记的遗传连锁图,4个标记位于目的基因的一侧,其中SC-P34M54378与目的基因相距最近（2.9cM）,其余3个标记由近到远依次是SC-P32M59147（3.8cM）、SC-P36M5399（3.8cM）和Xwmc441（18.6cM）。
论文目录:
第一章 引言
1.1 小麦条锈病的防治及抗病基因的研究和利用
1.1.1 小麦条锈病的发生和防治
1.1.2 小麦抗条锈病基因的研究和利用
1.2 分子标记技术的发展和应用
1.2.1 分子标记技术的发展
1.2.2 分子标记在小麦遗传学研究中的应用
1.3 小麦抗条锈病基因的分子标记研究进展
1.3.1 RFLP标记
1.3.2 RAPD标记
1.3.3 AFLP标记
1.3.4 RGAP标记
1.3.5 SSR标记
1.4 本项研究的选题依据及意义
第二章 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 小麦材料
2.1.2 小麦条锈菌菌种
2.2 试剂及仪器
2.2.1 试剂
2.2.2 仪器设备
2.3 研究方法
2.3.1 基因组DNA的提取
2.3.2 AFLP实验程序
2.3.3 PCR产物的电泳检测
2.3.4 多态性DNA片段的克隆
2.3.5 序列测定及特异引物合成
2.3.6 遗传连锁性检验及遗传作图
第三章 结果与分析
3.1 小麦基因组DNA的提取
3.2 AFLP分析及多态性DNA片段的遗传连锁性初步检测
3.2.1 ALP多态性分析
3.2.2 遗传连锁性初步检测
3.3 小麦抗条锈病基因YrSp的SCAR标记的建立
3.3.1 多态性DNA片段的克隆
3.3.2 序列测定及引物设计
3.3.3 SCAR标记的遗传连锁性检验
3.4 遗传作图
3.5 SCAR标记的品种检测
第四章 讨论
4.1 小麦抗条锈病基因YrSp助的分子标记研究
4.2 AFLP标记向SCAR的转化
4.3 AFLP多态性分析中值得注意的问题
第五章 结论
参考文献
致谢
作者简历
发布时间: 2005-09-05
参考文献
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