葡萄茎段培养生物反应器微环境调控

论文摘要

为了改进常规组培方法,本研究利用气升式生物反应器,以‘5BB’葡萄试管苗的茎段为试材,研究了影响反应器内试管苗增殖的若干因素,并对驯化基质进行了筛选,结果表明利用生物反应器培养的葡萄苗的增殖生长明显好于传统固体培养,其中反应器接触式培养方式好于反应器间歇浸没式培养。进行反应器接触培养中的结果,发现反应器内接种密度、光照强度及通气量和培养基中糖浓度对葡萄试管苗增殖影响很大。当5L反应器中（2 L工作容积）,接种65个茎段,光照强度调节为1600 Lux,培养基中通入0.15 vvm气体,培养基糖浓度为20 g·L-1时,葡萄节数、株高、鲜重及干重指标良好。对反应器培养过程中试管苗生长动态及培养基中pH、EC及糖浓度的变化进行调查的结果,发现pH和EC值随着培养时间增加先呈下降的趋势,分别在20d和40 d时出现最低值,以后则出现上升的趋势;培养基中蔗糖浓度在培养40 d时基本耗尽,葡萄苗的增殖系数在培养40 d时最高,反应器葡萄苗增殖培养周期以40 d为好。将反应器培养苗移栽到不同的基质中进行驯化栽培的结果,移栽苗在蛭石中全部成活,且生长良好。但在蛭石和珍珠岩混合基质中成活率明显下降,尤其是在河沙中成活仅为45%。在移栽驯化阶段,通过调查葡萄叶片中气孔的变化,发现移栽第14d时,气孔全部恢复关闭能力。利用生物反应器可大量培养葡萄优良种苗,是一种可取代传统组织培养,在规模化生产提高经济效益的一种有效方法。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 一、葡萄组织培养与快繁技术研究进展
• 二、利用生物反应器进行植物组织培养的研究进展
• 三、研究目的和意义
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 葡萄茎段培养反应器参数调控研究
• 1.2.1.1 不同培养方式对葡萄茎段培养的影响
• 1.2.1.2 接种量对葡萄苗茎段培养的影响
• 1.2.1.2 光照强度对葡萄苗茎段培养的影响
• 1.2.1.3 通气量对葡萄苗茎段培养的影响
• 1.2.1.4 蔗糖浓度对葡萄苗茎段培养的影响
• 1.2.2 反应器培养过程中葡萄茎段生长及培养基变化动态研究
• 1.2.3 反应器培养葡萄苗的驯化移栽及气孔变化研究
• 1.2.4 测定方法
• 1.2.5 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 葡萄茎段培养反应器参数调控研究
• 2.1.1 不同培养方式对葡萄茎段培养的影响
• 2.1.2 接种量对葡萄苗茎段培养的影响
• 2.1.3 光照强度对葡萄苗茎段培养的影响
• 2.1.4 通气量对葡萄苗茎段培养的影响
• 2.1.5 蔗糖浓度对葡萄茎段培养的影响
• 2.2 反应器培养过程中葡萄茎段生长及培养基变化动态研究
• 2.2.1 葡萄茎段生长动态
• 2.2.2 培养基变化动态
• 2.3 生物反应器培养葡萄苗的驯化及气孔变化研究
• 2.3.1 不同移栽基质对葡萄茎段生长及移栽成活率的影响
• 2.3.2 葡萄组培苗驯化过程中叶表气孔的变化
• 3 讨论
• 3.1 葡萄茎段培养反应器参数调控研究
• 3.2 反应器培养过程中葡萄茎段生长及培养基变化动态研究
• 3.3 生物反应器培养葡萄苗的驯化及气孔变化影响
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢