共振瑞利散射技术测定多糖大分子的新方法

论文摘要

摘要:共振瑞利散射（Resonance Rayleigh Scattering,RRS）是二十世纪90年代发展起来的新分析技术,它以灵敏度高（检出限可达ng/mL级）、仪器廉价易得、操作简便以及分析快速等优点引起了人们越来越多的关注。目前,这一技术已用于蛋白质、核酸、痕量金属、非金属、纳米微粒和药物分析中。多糖物质不仅是自然界中全部生命体的组成部分,还是一种重要的信息分子,在生命科学、化学、医学等学科研究中都具有举足轻重的地位。因此建立一种快速、准确、灵敏的测定方法具有重要的现实意义。本文主要包括以下内容:1、中性红与透明质酸钠相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用在Britton-Robinson （pH 4.3～5.2）缓冲介质中,碱性吩嗪染料中性红与透明质酸钠作用形成结合产物时将导致溶液共振瑞利散射（RRS）大大增强并产生新的RRS光谱,其最大散射峰位于328 nm,另在605 nm处有一个较弱的散射峰。透明质酸钠浓度在0.08～2.5 mg/L范围内,与RRS强度有良好的线性关系。据此,建立了一种新的测定透明质酸钠的分析方法。该法具有高灵敏度,对透明质酸钠的检出限（3σ）为25.9 ng/mL,选择性也良好。应用于滴眼液和化妆水中透明质酸钠的测定,结果满意。二、透明质酸钠-溴化十六烷基吡啶缔合物体系的共振瑞利散射光谱研究及其分析应用在pH 4.3的Britton-Robinson缓冲溶液中,单独的透明质酸钠与溴化十六烷基吡啶的共振瑞利散射（RRS）均较弱,但当两者反应形成离子缔合物时,RRS大大增强并产生新的RRS光谱,最大RRS峰位于335 nm,另在546 nm处有一个强度较低的RRS峰。线性范围是0.09～3.0 mg/L,检出限（3σ）为29.0 ng/mL。实验表明该方法有较高的灵敏度和较好的选择性。应用于眼药水和化妆水中透明质酸钠的测定,结果满意。三、三氨基三苯甲烷染料共振瑞利散射法测定硫酸皮肤素在pH 5.5～6.5的Britton-Robinson缓冲溶液中,硫酸皮肤素（DS）可以与某些三氨基三苯甲烷染料如乙基紫（EV）、龙胆紫（CV）和甲基紫（MV）相互作用形成新产物,使共振瑞利散射（RRS）增强并产生新的RRS光谱。其中以最灵敏的EV-DS体系为例,其最大散射峰位于498 nm处,另在327和650 nm处有两个较弱的散射峰。硫酸皮肤素浓度在0.02～1.6 mg/L范围内,与RRS强度有良好的线性关系,检出限（3σ）为5.1 ng/mL。据此,建立了一种新的测定硫酸皮肤素的分析方法。应用于血清和尿样中硫酸皮肤素的测定,结果令人满意。四、健那绿与硫酸软骨素相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用健那绿与硫酸软骨素在pH 9.0的Britton-Robinson缓冲溶液中作用形成结合产物时将导致溶液共振瑞利散射（RRS）大大增强并产生新的RRS光谱,其最大散射峰位于326 nm处,另在407和560 nm处有两个较弱的散射峰。硫酸软骨素浓度在0.2～5.0 mg/L范围内,与RRS强度有良好的线性关系,检出限（3σ）为25.3 ng/mL。据此,建立了一种新的测定硫酸软骨素的分析方法。可用于注射液样品和片剂样品中硫酸软骨素的测定。五、肝素-氯化十六烷基吡啶体系的共振瑞利散射光谱研究及分析应用在pH 5.5的Britton-Robinson缓冲溶液中,肝素与阳离子表面活性剂氯化十六烷基吡啶反应形成离子缔合物时,共振瑞利散射（RRS）大大增强并产生新的RRS光谱,最大RRS峰位于293 nm,另在542 nm处有一个强度较低的RRS峰。线性范围是0.04～1.2 mg/L,检出限（3σ）为10.6 ng/mL。据此,建立了一种灵敏度高,选择性好的测定肝素的新方法。应用于肝素钠注射液的测定,结果满意。六、十六烷基三甲基溴化铵共振瑞利散射法测定肝素及分析应用在pH 6.0的Britton-Robinson缓冲溶液中,肝素与十六烷基三甲基溴化铵反应形成离子缔合物,使溶液共振瑞利散射（RRS）急剧增强并产生新的RRS光谱,最大RRS峰位于310 nm,并在548 nm处有一个较弱的RRS峰。肝素浓度在0.06～2.5 mg/L范围内,与RRS强度有良好的线性关系,对肝素的检出限（3σ）为19.4 ng/mL。该方法有较好的选择性,应用于肝素钠注射液的测定,结果满意。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• §1.1 糖研究简史
• §1.2 糖的分类
• §1.3 多糖常用的分析方法
• §1.4 共振瑞利散射法的分析应用
• §1.5 共振瑞利散射技术与其他技术的联用
• §1.6 本论文的选题背景及研究意义
• 第二章 研究报告
• 第1节 中性红与透明质酸钠相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用
• 第2节 透明质酸钠-溴化十六烷基吡啶缔合物体系的共振瑞利散射光谱研究及其分析应用
• 第3节 硫酸皮肤素与某些三氨基三苯甲烷染料的 共振瑞利散射光谱研究
• 第4节 健那绿与硫酸软肤素相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用
• 第5节 肝素-氯化十六烷基吡啶体系的共振瑞利散射光谱研究及其分析应用
• 第6节 十六烷基三甲基溴化铵共振瑞利散射法测定肝素及其分析应用
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文