论文摘要
目的：1.研究腺病毒介导肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）基因转染对人脂肪干细胞（human adipose derived stem cells,hADSCs）生物学特性的影响。2.研究腺病毒介导HGF基因转染人脂肪干细胞对脂肪移植血管化的影响。方法：1.腺病毒介导HGF基因以MOI=200pfu/cell转染hADSCs,以正常未转染hADSCs为对照,检测实验组HGF表达情况。比较实验组与对照组hADSCs的生物学特性,包括细胞形态学、细胞生长曲线、细胞表面标志物、细胞周期和成脂、成骨诱导分化能力的差别。2.BALB/C裸鼠18只随机分成三组每组6只,分别在裸鼠头皮下注射以下三组移植物：（1）实验组：7×106 Ad-HGF转染的hADSCs+0.5ml人脂肪颗粒；（2）未转染hADSCs对照组：7×106未转染的hADSCs+0.5ml人脂肪颗粒；（3）生理盐水对照组：100ul生理盐水+0.5m1人脂肪颗粒。饲养5周。分别于术前1天、术后1天、2天、4天、7天、15天取裸鼠尾血,HGF-ELISA试剂盒检测血清HGF表达水平。5周后处死裸鼠解剖取出脂肪移植物,称重比较。病理切片CD31免疫组化染色,观察移植物血管化情况。结果：1. hADSCs经Ad-HGF转染后仍呈成纤维细胞样生长,其生长增殖能力与未转染hADSCs无明显差别；转染后的hADSCs仍表达CD44、CD90、CD49d、CD 105,不表达CD45、CD34、CD31、CD106和STRO-1。转染组与未转染组细胞周期无明显差别。两组细胞成脂、成骨诱导分化能力无明显差别。2.实验组HGF表达水平、移植物重量和血管密度均明显高于对照组。结论：1.腺病毒载体介导HGF基因转染hADSCs并不影响其生物学特性,是HGF基因治疗的良好途径。2. Ad-HGF转染hADSCs能促进脂肪移植血管化,提高移植脂肪的存活率。本实验通过Ad-HGF转染hADSCs使HGF在体内稳定高效表达而产生促血管作用,国内外尚未见有文献报道,具有创新性和先进性,为促进人自体脂肪移植血管化提供了可借鉴的方法。