论文摘要
前言膀胱出口梗阻（Bladder Outlet Obstruction，BOO）在临床上比较常见，其主要危害在于常导致膀胱功能障碍，出现膀胱过度活动症（Overactive Bladder，OAB）。长期的慢性梗阻对膀胱的影响很大，常常会引起尿频、尿急、尿潴留、尿失禁，甚至上尿路损害。P2X嘌呤受体是近年新发现的一种嘌呤能ATP受体，现已发现有七种P2X受体亚型，广泛分布于中枢神经系统和外周神经系统，在膀胱的感觉和运动方面起着重要作用。本研究通过手术方法部分结扎大鼠的膀胱出口，制作出膀胱出口梗阻的动物模型，并根据梗阻时间不同进行分组。应用RT-PCR方法检测P2X受体亚型mRNA在正常及BOO大鼠膀胱组织中的表达，以初步探讨P2X受体在BOO时膀胱舒缩功能调节中的作用及其与膀胱功能障碍的关系，为临床治疗BOO所引起的膀胱功能障碍提供新的思路。材料与方法一、实验材料1、实验动物雌性Wistar大白鼠，3-4月龄，250克左右。2、主要试剂、引物总RNA分离试剂、RT-PCR试剂盒、DNA聚合酶、P2X1～P2X7受体亚型基因mRNA引物。3、主要实验仪器设备眼科手术器械、紫外分光光度计、PCR扩增仪、台式低温高速离心机、水平电泳槽、电泳仪、自动电泳凝胶成像分析仪。二、实验方法1、膀胱出口梗阻模型的建立。2、采用RT-PCR方法检测P2X受体各亚型mRNA在膀胱中的表达情况。3、统计分析所有数据均以x±s表示，采用SPSS统计分析软件进行t检验。实验结果一、动物模型结果对照组10只大鼠全部存活，梗阻2周组和梗阻4周组分别存活7只。死亡大鼠均存在肾积水，存活大鼠中梗阻2周组和梗阻4周组发现肾积水分别为2只和5只。二、RT-PCR结果正常及BOO大鼠膀胱中都表达有7种P2X受体亚型。正常大鼠膀胱中P2X1和P2X4受体表达相对较高，而在BOO大鼠膀胱中P2X1、P2X4、P2X6和P2X7受体亚型mRNA表达降低，P2X2和P2X3表达升高，P2X6在各组中表达均很低且无明显变化。与正常组相比梗阻2周组P2X1降低与P2X2升高有显著差异，其余各亚型变化均无显著差异。正常组与梗阻4周组差别均具有显著性。讨论BOO是临床上引起膀胱功能障碍的最重要原因之一。近年国外研究表明非胆碱能非肾上腺素能（non-adrenergic non-cholinergic，NANC）神经是除胆碱能和肾上腺素能神经之外的另一个参与膀胱功能调节的重要因素，但相关的研究报道还比较缺乏。P2X受体是近年来新发现的一种嘌呤能受体，属于ATP门控的离子通道型受体，现已发现有七种亚型为P2X1-7。这些受体广泛分布于全身各组织当中，在中枢神经系统和外周神经系统中均有表达，在多种生物活动中发挥重要的生理和病理作用，主要参与平滑肌的舒张和收缩功能的调节。本研究结果显示BOO产生后，膀胱功能受到损害，P2X受体亚型发生变化，P2X2和P2X3受体有取代P2X1和P2X4成为主要的调节BOO膀胱功能的嘌呤能受体。随着梗阻时间的增加，膀胱功能损害加重，上尿路损害亦加重，P2X受体亚型变化更为明显，可推测P2X受体亚型变化可能是BOO后膀胱功能障碍产生的机制。结论BOO大鼠膀胱中P2X受体部分亚型mRNA表达发生变化，这些变化在BOO后膀胱功能障碍的发病机制中可能有重要作用。
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标签：受体论文; 膀胱出口梗阻论文; 逆转录聚合酶链式反应论文;