LIF对小鼠眼视网膜缺血—再灌注损伤中视网膜神经节细胞保护作用的实验研究

论文摘要

目的:观察白血病抑制因子（Leukemia inhibitory factor, LIF）在小鼠眼视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）中的表达,探讨其对小鼠眼视网膜缺血-再灌注（retinal ischemia reperfusion,RIR）损伤中视网膜神经节细胞的保护作用,为临床治疗视网膜缺血-再灌注损伤类疾病尤其是青光眼提供一种有效的新方法。方法:将54只正常无眼疾昆明小鼠（108只眼）随机分为正常对照组（18只小鼠,36只眼）、视网膜缺血-再灌注组（RIR组,18只小鼠,36只眼）、LIF治疗组（18只小鼠,36只眼）。每组根据再灌注的时间不同分为4h、8h、12h、18h、24h、48h 6个小组（每小组3只小鼠,6只眼）。采用小鼠眼前房灌注至高眼压的方法制作实验性视网膜缺血-再灌注模型,治疗组于造模完成后立即向小鼠玻璃体腔内注射0.5ul/g LIF。分别于再灌注后4h、8h、12h、18h、24h、48h摘除眼球,固定、石蜡包埋、切片,进行HE染色及免疫荧光染色。普通光学显微镜下观察视网膜形态变化,应用医学图像分析系统对视网膜神经节细胞进行量化,并进行统计学分析。荧光显微镜下观察LIF的表达。结果:1.光镜观察: RIR组组织学变化早期为视网膜水肿（尤以视网膜神经纤维层及内丛状层为明显）。晚期视网膜内层萎缩、变薄,视网膜神经节细胞数目减少。治疗组视网膜神经节细胞明显多于RIR组。2.荧光显微镜观察:LIF表达于各组视网膜神经节细胞上。3.细胞计数结果:治疗组4h与RIR组4h、正常对照组4h视网膜神经节细胞数目相比较差异无显著性（P>0.05）,治疗组8h、12h、18h、24h、48h比RIR组8h、12h、18h、24h、48h视网膜神经节细胞数目明显增多,差异有显著性（P<0.05）。但比正常对照组8h、12h、18h、24h、48h数目为少,相比差异有显著性（P<0.05）。结论:1.病理学改变显示视网膜缺血-再灌注模型建模成功。2.LIF在小鼠正常眼及视网膜缺血-再灌注后视网膜神经节细胞上均有表达。3. LIF对小鼠眼视网膜缺血-再灌注后视网膜神经节细胞具有保护作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验动物及分组
• 2.2 主要仪器设备及试剂
• 2.3 视网膜缺血-再灌注模型的建立
• 2.4 LIF 玻璃体腔内注射
• 2.5 取材及标本的制备
• 2.6 普通HE 染色
• 2.7 光镜检查，视网膜神经节细胞计数
• 2.8 免疫荧光染色
• 2.9 荧光显微镜下观察LIF 的表达情况
• 2.10 统计学处理
• 第三章 结果
• 3.1 常规病理组织切片观察（图1- 14）
• 3.2 视网膜神经节细胞计数结果（表1，图15，16）
• 3.3 免疫荧光检测LIF 在小鼠视网膜神经节细胞上的表达（图17-23）
• 第四章 讨论
• 4.1 视网膜缺血-再灌注模型
• 4.2 视网膜缺血-再灌注的病理损伤及机制
• 4.3 青光眼的视神经保护治疗
• 4.4 白血病抑制因子对小鼠视网膜缺血再灌注中视网膜神经节细胞的保护作用
• 第五章 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 个人简历
• 致谢