嗅质丁香酚改善嗅觉认知及其机制的探讨

论文摘要

目的嗅质或气味能通过嗅觉通路影响脑功能。通过神经行为学观察确定嗅质丁香酚（EG）可以改善C57BL/6小鼠对EG的嗅觉认知能力;在此基础上研究EG干预后小鼠嗅上皮嗅觉受体（ORs）mOR-EG的基因表达变化,及通过EG干预体外嗅觉感觉神经元（OSNs）的培养,对OSNs的mOR-EG的基因表达变化进行检测。探讨嗅质改善嗅觉认知及其机制。方法EG干预小鼠从出生开始（PND0）分别至6w和10w,对EG 6w和6w对照组,EG 10w组和10w对照组。然后进行嗅质偏爱和嗅质辨识实验,检测小鼠对EG的嗅觉认知的变化;通过Real-time PCR技术,比较EG 6w和6w对照组,EG 10w和10w对照组的嗅上皮mOR-EG的基因表达差异,对mOR-EG基因变化与EG的嗅觉认知行为学之间可能的联系进行探讨;利用OMP和TUJ-1的免疫细胞化学和RT-PCR实验对体外培养的OSNs进行鉴定,后利用30μm,100μm和300μm EG分别干预OSNs培养,再通过Real-time PCR技术对各组mOR-EG的基因表达进行检测,对EG改善嗅觉认知的机制进一步探讨。结果1.EG 6w和6w对照组,EG 10w和10w对照组神经行为学结果之间的比较,EG6w组对EG的嗅觉辨识时间明显快于6w对照组,EG 10w组对EG的嗅觉辨识时间亦明显快于6w对照组;2.Real-time PCR技术对上述各组嗅上皮mOR-EG的基因表达差异检测,发现EG 6w组的mOR-EG基因表达量明显高于6w对照组,EG 10w组的mOR-EG基因表达量明显高于10w对照组,且EG 6w组和EG 10w组的mOR-EG基因表达量约为相应对照组的9倍;3.经OMP和TUJ-1的免疫细胞化学和RT-PCR鉴定,体外培养的多数细胞为OSNs。EG不同浓度干预OSNs的培养后,Real-time PCR检测各组mOR-EG基因表达量,发现30μm EG和100μm EG组的mOR-EG基因表达量明显高于空白对照组,分别约为空白组的2倍和4倍,300μm EG组的mOR-EG基因表达量与空白组之间没有明显差异。结论1.EG能够改善小鼠对EG的嗅觉认知能力;2.EG干预能够诱导小鼠嗅上皮mOR-EG基因表达;3.EG体外干预能够诱导OSNs的mOR-EG基因表达。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 嗅质EG改善嗅觉认知的神经行为学研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 数据处理
• 4 实验结果
• 第二部分 EG干预后嗅上皮mOR-EG基因表达研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 数据处理
• 4 实验结果
• 第三部分 OSNs的培养、鉴定与EG干预
• （一） OSNs的培养
• 1 材料
• 2 方法
• （二） OSNs的鉴定
• 1) 免疫细胞化学鉴定
• 1 材料
• 2 方法
• 2) RT-PCR鉴定
• 1 材料
• 2 方法
• （三） EG干预OSNs培养mOR-EG基因表达变化
• 1 材料
• 2 方法
• （四） 数据处理
• （五） 实验结果
• 讨论
• 1 嗅觉系统的结构及工作机制
• 2 嗅质与嗅觉认知
• 3 EG干预改善嗅觉认知的可能机制及其意义
• 结论
• 参考文献
• 附录1 幼鼠低浓度甲苯吸入的成瘾性行为学研究
• 附录2 个人简历
• 致谢
• 综述
• 参考文献