Humanin保护缺氧诱导神经元损伤的机制研究

论文摘要

Humanin （HN）是从老年痴呆病人未受损的脑区分离出来的一种含有24个氨基酸的多肽。早期的研究证实,HN对一些与老年痴呆有关的基因突变引起的细胞损伤具有保护作用。最近的研究表明,HN可能具有更为广泛的生物学作用。例如,HN可以抑制未分化的PC12细胞在无血清的培养基中引起的凋亡。HN还可抑制朊蛋白诱导的细胞凋亡。而且,HN的类似物HNG,在小鼠脑缺血/再灌注中发挥保护作用。然而,对于HN保护作用的机制了解的并不清楚。本实验观察了HN对缺氧所致神经细胞死亡的保护作用及其机制。用calcein-AM对原代培养的神经元进行荧光染色后,进行细胞计数来观察HN对神经元缺氧的保护作用。结果显示,缺氧24小时可导致大量的神经元死亡。在对细胞进行缺氧处理前16小时,预先给予不同浓度的HN,1μM HN对缺氧细胞没有明显的保护作用,10μM和20μM HN对缺氧细胞有明显的保护作用,20μM HN的保护作用更为明显。用荧光染料JC-1（反映线粒体膜电位的变化）对神经元进行染色,在激光共聚焦显微镜下观察线粒体膜电位的变化。缺氧24小时使线粒体膜电位明显下降,预先给予20μM HN可以保护缺氧所致的线粒体膜电位下降。用calcein-AM和CoCl2共孵育后在激光共聚焦显微镜下观察calcein从线粒体释放的方法检测线粒体膜通透性孔的开放。结果显示,缺氧导致线粒体膜通透性孔开放,线粒体内的calcein荧光强度明显减弱,说明calcein由线粒体释放增多。预先给予20μM HN可以抑制缺氧诱导的线粒体膜通透性孔开放。上述结果表明,HN可以抑制缺氧引起的细胞损伤,发挥保护作用,这些保护作用重要机制之一是通过抑制线粒体膜通透性孔开放和保护线粒体膜电位实现的。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• Introduction
• Materials and Methods
• Results
• Discussion
• References
• 译述
• 参考文献
• 致谢