论文摘要
二甲基甲酰胺（Dimethylformamide,DMF）是一种重要的有机化工原料、农药和医药中间体,也是性能优良的溶剂和多种气体的吸附剂,广泛应用于化学纤维、皮革、染料及制药等工业生产中。随着现代工业的发展,DMF的需求量在逐年增加,职业接触DMF的工人也越来越多,DMF对工人健康的影响逐渐引起人们的重视。1948年Smyth等首先报道了DMF的毒性和职业危害,引起各国科学家对DMF毒性的关注。80年代以来我国已有数百例DMF职业中毒发生。DMF属中等毒性物质,人群对DMF的暴露是多途径的,职业环境中DMF主要经呼吸道,也可经皮肤、消化道进入体内。DMF可对全身多个器官及系统产生毒性。以往研究中,国内外大多数学者都将对DMF的研究重点放在其肝毒性上,而对生殖系统尤其是雄性生殖系统的毒作用研究较少。因此,我们就DMF对雄性生殖系统的影响进行研究,并进一步探讨其作用机制。目的:通过对雄性昆明小鼠亚慢性染毒,对小鼠的睾丸组织结构,睾丸及附睾脏器系数,精子的计数、活动度、畸形率以及睾丸酶活性、性激素的变化进行观察,探讨DMF对雄性生殖系统的影响及其作用机制,为DMF卫生标准的制定和其生殖危害的防治提供科学依据。方法:昆明小鼠40只,体重为（25±2）g,饲养条件为每天光照12h,普通饲料喂养,温度为（23±2）℃,相对湿度为（50±10）%。适应性喂养一周后,随机分为空白对照组和低、中、高三个剂量组,每组10只。染毒剂量分别为0、0.5、1和2g/kg（body weight）。每天灌胃染毒一次,连续灌胃30天。于染毒前1天对小鼠称重,以后每3天称重1次。30天后摘除眼球取血并颈椎脱臼处死。所取血液在室温下静置一小时后,置离心机中离心20分（3000pm/min）,吸取上清液,-20℃保存用于测定血清睾酮（T）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）水平。分离双侧睾丸和附睾,称重并计算脏器系数。每组随机抽取两个动物的一侧睾丸,放入预先配制好的中性福尔马林溶液（4%甲醛）中进行固定,用于制作病理切片,其余睾丸-80℃保存,用作睾丸琥珀酸脱氢酶（SDH）、乳酸脱氢酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）、超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）和睾酮（T）水平的测定。取右侧附睾用作精子活动度的测定,左侧附睾置-20℃保存,用作精子计数和精子畸形率的测定。结果:1.DMF对雄性小鼠体重、脏器重量及脏器系数的影响与对照组相比,各染毒组小鼠实验后体重显著降低（P＜0.05）。小鼠睾丸、附睾重量及睾丸脏器系数随染毒剂量增高有下降趋势。与对照组相比,2g/kg剂量组睾丸重量（P＜0.01）、附睾重量（P＜0.05）及睾丸脏器系数显著降低（P＜0.01）。2.DMF对雄性小鼠精子计数、精子活动度及精子畸形率的影响随染毒剂量的增高,精子计数及精子活动度有下降的趋势,呈剂量-效应关系,且1g/kg和2g/kg剂量组精子计数与对照组相比显著降低（P＜0.05）。精子活动度与对照组相比显著降低（P＜0.01）。各剂量组精子畸形率与对照组相比均无明显变化（P＞0.05）。3.DMF对雄性小鼠睾丸酶活力及MDA含量的影响随染毒剂量增高睾丸组织中ACP、SOD活力及MDA含量均有增高趋势,LDH、SDH活力有下降趋势。各剂量组ACP活力显著高于对照组（P＜0.01）,1g/kg和2g/kg剂量组SOD活力显著高于对照组（P＜0.01）,SDH活力显著低于对照组（P＜0.01）,2g/kg剂量组睾丸MDA含量显著高于对照组（P＜0.01）,各剂量组LDH活力显著低于对照组（P＜0.01）。4.DMF对雄性小鼠血清及睾丸组织中性激素的影响各剂量组血清LH水平与对照组相比无明显变化（P＞0.05）;各剂量组血清FSH水平均高于对照组,1g/kg和2g/kg剂量组血清FSH水平显著高于对照组,（P＜0.05）;各剂量组血清T和睾丸T均低于对照组,2g/kg剂量组血清T和睾丸T水平显著低于对照组（P＜0.01）。5.DMF对雄性小鼠睾丸组织结构的影响睾丸组织的病理切片显示,染毒组小鼠睾丸曲细精管明显萎缩,曲细精管中各级精母细胞减少,细胞间有中毒空泡,个别曲细精管管腔中可见脱落的生精细胞,管腔内成熟精子变少或消失。间质疏松,血管扩张。结论:1.DMF亚慢性染毒可以使小鼠睾丸及附睾重量下降,睾丸脏器系数降低。2.DMF亚慢性染毒可以引起小鼠精子计数及精子活动度下降。3.DMF亚慢性染毒能引起小鼠睾丸组织的形态改变。4.DMF亚慢性染毒会对小鼠睾丸T、血清T和血清FSH产生显著影响。5.DMF亚慢性染毒可以影响小鼠睾丸ACP、LDH、SDH、SOD的活性及MDA的含量。6.各染毒组小鼠LDH、SDH、ACP活性变化,提示DMF可能影响到睾丸的能量代谢;各染毒组小鼠SOD活性及MDA含量变化,提示DMF可能对小鼠睾丸组织产生脂质过氧化损伤;各染毒组小鼠性激素水平变化,提示DMF可能干扰小鼠的生殖内分泌功能。