Toll样受体在真菌性鼻—鼻窦炎中的表达及意义

论文摘要

目的真菌性鼻-鼻窦炎（fungal rhinosinusitis,FRS）是鼻科临床常见的一种特异性感染性疾病。近年来研究表明,FRS的发病率呈上升趋势,约占各种慢性鼻窦炎手术治疗的6%～13%。根据组织病理学特征将真菌性鼻-鼻窦炎分为四种类型:真菌球、变应性真菌性鼻-鼻窦炎、慢性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎和急性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎。各种不同类型的真菌性鼻-鼻窦炎的临床特征,治疗原则及预后有很大的不同。因此,对真菌性鼻-鼻窦炎进行组织病理学分型分类诊断,对于指导真菌性鼻-鼻窦炎的治疗和改善预后,以及提高真菌性鼻-鼻窦炎的治愈率有重要意义。真菌性鼻-鼻窦炎的发病机制仍不清楚。真菌属于条件性致病菌,缺乏角化酶,正常情况下并不能侵蚀健康、完整的黏膜而不出现鼻黏膜感染。因而,机体的自身免疫状态以及鼻-鼻窦黏膜局部防御体系在真菌性鼻-鼻窦炎的发病机制中显得更为重要。近年来Toll受体（Toll-like receptors,TLR）在鼻黏膜免疫防御中的作用越来越受到人们的重视。研究表明,人类鼻-鼻窦黏膜中存在Toll样受体的表达,参与其天然免疫防御机制,对鼻黏膜抵抗微生物感染发挥重要作用,但其在真菌性鼻-鼻窦炎发病中的作用研究报道较少。本研究拟对2006年3月至2007年4月我科收治的并经病理学证实的24例真菌性鼻-鼻窦炎病例的临床资料进行分析、分型,探讨其与临床治疗及预后的关系;采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcriptase-polymerase chainreaction,RT-PCR）技术和免疫组织化学（Immunohisto-chemistry,IHC）方法,研究Toll样受体在真菌性鼻-鼻窦炎中的表达情况,探讨Toll样受体在真菌性鼻-鼻窦炎发病中的作用。方法1、收集2006年3月至2007年4月本科收治的并经病理学证实的24例真菌性鼻-鼻窦炎病例,采用常规HE染色、高碘酸品红（periodic acid-Schiff,PAS）染色和六胺银染色三种方法,对手术标本进行组织病理学诊断,对本组病例进行病理学分型;总结全部病例临床资料,术后随访6个月至2年,分析真菌性鼻-鼻窦炎病理学类型与治疗选择及预后的关系。2、收集2006年3月至2007年4月本科收治的手术患者组织标本,真菌性鼻-鼻窦炎24例、慢性鼻-鼻窦炎24例和正常下鼻甲鼻黏膜15例,采用逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）技术和免疫组织化学（Immunohisto-chemistry,IHC）方法分别检测三组鼻黏膜中TLR2和TLR4 mRNA和蛋白的表达水平。结果1、本组24例真菌性鼻-鼻窦炎病理学分类中,侵袭型真菌性鼻-鼻窦炎5例（慢性侵袭型）,非侵袭型真菌性鼻-鼻窦炎19例（真菌球）。本组病例致病菌明确为曲霉菌者21例;术后经6个月至2年随访,治愈20例,复发4例。复发病例中慢性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎3例（60%）,非侵袭型真菌性鼻-鼻窦炎复发1例（5.6%）。复发4例经再次上颌窦根治术或鼻内镜辅助下上颌窦根治术后治愈。2、RT-PCR结果显示TLR2和TLR4 mRNA在真菌性鼻-鼻窦炎、慢性鼻-鼻窦炎和正常下鼻甲鼻黏膜组织中均有表达,真菌性鼻-鼻窦炎组织中的表达水平（0.208±0.063;0.159±0.059）明显低于慢性鼻-鼻窦炎（0.505±0.097;0.406±0.102）和正常下鼻甲组织（0.327±0.047;0.232±0.088）,且每两组间差异均具有统计学意义（P值均小于0.05）。免疫组织化学检查发现在真菌性鼻-鼻窦炎组织中TLR2和TLR4蛋白的阳性表达率分别为12.5%（3/24）、16.7%（4/24）,明显低于慢性鼻-鼻窦炎组织的83.3%（20/24）、87.5%（21/24）和正常下鼻甲组织的46.7%（7/15）、53.3%（8/15）,每两组间差异均有统计学意义（P值均小于0.05）结论1、本组收集的24例真菌性鼻-鼻窦炎病例的病理学类型以真菌球为主,慢性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎次之;真菌特异性染色可以作为慢性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎诊断和鉴别诊断的主要依据;在真菌性鼻-鼻窦炎病理诊断中以曲霉菌感染为主。真菌性鼻-鼻窦炎病理学分类对真菌性鼻-鼻窦炎治疗选择和预后有很重要的指导意义。2、TLR2和TLR4在正常鼻黏膜组织中表达,且在慢性鼻-鼻窦炎鼻黏膜中表达上调,表明鼻黏膜上皮具备TLR参与的局部正常防御系统;在鼻-鼻窦炎症过程中,炎症刺激能上调TLR在鼻黏膜组织中的表达,表明TLR可能启动和参与了鼻-鼻窦的一系列的免疫防御性炎症反应,构成抵御多种病原微生物入侵的第一道防线。3、本研究首次检测了TLR2和TLR4 mRNA和蛋白在真菌性鼻-鼻窦炎鼻黏膜组织中的表达水平,结果发现TLR2和TLR4在真菌性鼻-鼻窦炎中表达下调,与正常对照组及慢性鼻-鼻窦炎组比较差异有统计学意义;表明其在真菌性鼻-鼻窦炎发病个体,存在鼻窦黏膜组织TLRs及其介导的天然免疫作用下降,可能是引起鼻黏膜真菌清除率下降和真菌易感性增加的原因之一。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 真菌性鼻-鼻窦炎的临床和病理学分析
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 Toll在真菌性鼻-鼻窦炎中的表达及作用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 缩略词表
• 攻读学位期间成果
• 综述
• 致谢
• 研究生毕业论文统计学审稿证明